基因工程复习题附有答案

基因工程复习题[复制]填空题、问答题不做二、判断题1．限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的。[判断题]*对错(正确答案)2．限制性内切核酸酶在DNA中的识别／切割位点的二级／三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。[判断题]*对(正确答案)错3．如果限制性内切核酸酶的识别位点位于DNA分子的末端，那么接近末端的程度也影响切割，如HpaⅡ和MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。[判断题]*对(正确答案)错4．能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。[判断题]*对错(正确答案)5．已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有3个切点，因此，用此酶切割该环状DNA,可得到3个片段。[判断题]*对(正确答案)错6．基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。[判断题]*对错(正确答案)7．甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶的星活性的主要原因之一，防止的办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5％以下。[判断题]*对(正确答案)错8．EcoRⅡ的识别序列是/CCWGG（W为A或T;/表示切割位点），因此具有EcoRⅡ末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoRⅡ末端的载体中。[判断题]*对(正确答案)错9．同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。[判断题]*对错(正确答案)10．T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。[判断题]*对错(正确答案)11．反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以RNA为模板合成的DNA是互补DNA(complementaryDNA，cDNA)。若是以DNA模板合成DNA，dNTP的掺人速度很低(约5个核苷酸／秒)，比T7DNA聚合酶的合成速度差不多低100倍。[判断题]*对错(正确答案)12．当一个DNA结合蛋白同它识别的核苷酸序列结合以后，就保护了它们的磷酸二酯键免遭切割，其结果，电泳胶上就有明显可见的空缺带(与对照相比)，这就是DNA足迹法。[判断题]*对(正确答案)错13．T4DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。[判断题]*对错(正确答案)14．多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记，是因为它能够将32P标记的单核苷酸磷酸基团加到每一DNA链的5’端。[判断题]*对错(正确答案)15．DNA聚合酶I有三种酶活性，其中3’→5’外切核酸酶的活性在较多的dNTP存在下，常被5’→3’合成酶的活性所掩盖。[判断题]*对(正确答案)错16．用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。[判断题]*对错(正确答案)17．nick和gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。[判断题]*对错(正确答案)18．迄今发现的质粒DNA都是环状的。[判断题]*对错(正确答案)19．有a、b、c三个质粒，因为a和b能够共存于一个细胞，a和c也可共存于同一个细胞，所以b和c一定能够共存于同一个细胞。[判断题]*对(正确答案)错20.一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。[判断题]*对错(正确答案)21.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。[判断题]*对(正确答案)错22．只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。[判断题]*对(正确答案)错23．所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。[判断题]*对(正确答案)错24．一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。[判断题]*对错(正确答案)25．某一染色体DNA经内切酶SalI切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将这些片段分别在T4DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。[判断题]*对错(正确答案)26.M13噬菌体每个世代裂解宿主后，可释放100个子代噬菌体。[判断题]*对错(正确答案)27．氯霉素扩增DNA时，加氯霉素的时间是重要的，因为加得太早，菌数不够，加入时间过迟，菌龄过老，容易自溶。[判断题]*对(正确答案)错28．所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。[判断题]*对错(正确答案)29．脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶。[判断题]*对错(正确答案)30．如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA增加了一倍，那么，10个循环就扩增了约1000倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。[判断题]*对(正确答案)错31．大量制备已被克隆基因编码蛋白产物的常用方法是体外转录和体外翻译。[判断题]*对错(正确答案)32．温度敏感突变型是非常有用的，在这些突变型中，可以通过对温度的改变控制这些突变体中异常表型的出现。[判断题]*对错(正确答案)33．用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。[判断题]*对(正确答案)错34．在DNA贮存液中加一滴三氯甲烷，可防止真菌的污染。[判断题]*对(正确答案)错35．密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。[判断题]*对(正确答案)错36．碱法和煮沸法分离质粒DNA的原理是不相同的。[判断题]*对错(正确答案)37．用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不互补的黏性末端。[判断题]*对错(正确答案)38．cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。[判断题]*对错(正确答案)39．通过差示杂交后制备的cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的机率大为提高。[判断题]*对(正确答案)错40．人工感受态和自然感受态细胞都能吸收DNA。[判断题]*对(正确答案)错41．人工导入基因和正常染色体基因间的同源重组，可以发生基因置换。[判断题]*对(正确答案)错42．线性DNA片段被导入哺乳动物细胞后，在细胞内酶的作用下，很快相互连接成重复的DNA大片段，并能在随机位点整合到染色体中。[判断题]*对(正确答案)错43．限制性内切核酸酶BglⅡ识别的序列为A/GATCT，BamHI识别的序列为G/GATCC，用它们分别切割载体DNA和供体DNA，不必使酶失活，就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。[判断题]*对(正确答案)错44．不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。[判断题]*对(正确答案)错45．低丰度的mRNA不仅拷贝数少，而且种类也少。[判断题]*对错(正确答案)46．放射性标记的核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。[判断题]*对错(正确答案)47．在Northern杂交中，为了防止RNA形成部分环状发夹结构影响迁移率，所以要用变性缓冲液进行电泳。[判断题]*对(正确答案)错48．切口移位法(nicktranslation)只能标记线性双链DNA不能标记环状双链DNA。[判断题]*对错(正确答案)49．通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。[判断题]*对(正确答案)错50．尼龙膜(nylonmembrane)是核酸杂交的一种固体支持物，具有同DNA结合能力强、韧性强，可反复洗脱使用，并且杂交信号本底低等优点，就是成本高。[判断题]*对错(正确答案)51．如果DNA序列的某种变异在群体中是稀有的，称为突变;若是普遍的，则称为多态性。[判断题]*对(正确答案)错52．通过用化学标记法取代放射性标记法，并采用一种抗体来特异性地识别这种化学修饰，既保证原位杂交的分辨率，又消除放射危害。[判断题]*对(正确答案)错53．用DNA探针进行杂交反应非常敏感并具有选择性，可用来测定某一特定DNA序列在细胞基因组中的拷贝数。[判断题]*对(正确答案)错54．单克隆抗体是淋巴细胞和瘤细胞杂交后形成的单个杂交瘤细胞经无性繁殖而产生的特异性抗体。[判断题]*对(正确答案)错55．用免疫化学法筛选重组体不需要外源基因的表达。[判断题]*对错(正确答案)56．突出的3’末端或凹缺的3’末端都可以用Klenow大片段酶进行末端标记。[判断题]*对错(正确答案)57．用多核苷酸激酶进行5’末端标记前，DNA必须进行脱磷酸，否则无法标记。[判断题]*对错(正确答案)58．Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。[判断题]*对错(正确答案)三、选择题1．限制性内切核酸酶可以特异性地识别:[单选题]*(a)双链DNA的特定碱基对(b)双链DNA的特定碱基序列(正确答案)(c)特定的三联密码(d)以上都正确2．在下列酶中，催化反应不需要ATP的是[单选题]*(a)EcoK(b)EcoB(c)T4DNA连接酶(d)BamHl(正确答案)3．下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中，正确一项的是。[单选题]*(a)Sau3AI(b)E．coRI(c)hindIII(d)Sau3AI(正确答案)4．限制性内切核酸酶的星号活性是指[单选题]*(a)在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。(正确答案)(b)活性大大提高(c)切割速度大大加快(d)识别序列与原来的完全不同5．下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?[单选题]*(a)甘油含量过高(b)反应体系中含有有机溶剂(c)含有非Mg2＋的二价阳离子(d)酶切反应时酶浓度过低(正确答案)6．T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶[单选题]*(a)催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源(b)既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接(正确答案)(c)是一种单肽酶，分子量为74kDa(d)既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接7．DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中[单选题]*(a)将双链DNA分子中的5，磷酸基团同3，-OH末端重新形成磷酸二酯键(正确答案)(b)作用时不消耗能量(c)需要Mn2+等二价辅助离子(d)也可以连接RNA分子8．下列哪一种酶作用时需要引物?[单选题]*(a)限制酶(b)末端转移酶(c)反转录酶(正确答案)(d)DNA连接酶9．Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了(

)的活性。[单选题]*(a)5’→3’合成酶(b)3’→5’外切酶(c)5’→3’外切酶(正确答案)(d)转移酶10.在cDNA技术中，所形成的发夹环可用

[单选题]*(a)限制性内切核酸酶切除(b)用3’外切核酸酶切除(c)用S1核酸酶切除(正确答案)(d)用5’外切核酸酶切除11．同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是[单选题]*(a)OCDNA>SCDNA>LDNA(b)SCDNA＞LDNA＞OCDNA(正确答案)(c)LDNA>OCDNA>SCDNA(d)SCDNA>OCDNA>LDNA12．能够用来克隆32kb以下大小的外源片段的质粒载体是[单选题]*(a)YAC(b)pUC19(c)粘粒(正确答案)(d)λ噬菌体载体13.限制性内切核酸酶EcoRI在野生型的λ噬菌体DNA中有5个切点、HindⅢ有7个切点，BamHI也有5个切点。调整这些酶切位点的数量，主要通过[单选题]*(a)体内突变(正确答案)(b)完全酶切后连接(c)部分酶切(d)先用甲基化酶修饰后再酶切14.PBluescriptMl3载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两个噬菌体的启动子，这样增加了该载体的功能，下述四种功能中哪一种是不正确的?

[单选题]*(a)可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析(b)利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增(c)利用通用引物进行序列分析(d)利用这两个启动子进行定点突变(正确答案)15.下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，除了(

)外都是正确的。[单选题]*(a)通过电激法将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高了10—100倍(b)BAC载体在细菌中以环形超螺旋状态存在，使分离操作起来相对容易(c)BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝(正确答案)(d)克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列16.以黏粒为载体转染受体菌后，平板上生长的菌落会大小不一、生长速度不一的现象，其原因是[单选题]*(a)营养成分不足(b)重组后的质粒复制不稳定(c)重组后的黏粒整合到宿主染色体上(d)重组体中插入片段的大小不同(正确答案)17.M13K07是一种辅助噬菌体DNA,可用它帮助噬菌粒制备单链DNA,这是因为[单选题]*(a)M13K07能够进行滚环复制，得到大量的单链噬菌体DNA(b)M13K07能够提供成熟包装的蛋白(c)M13K07提供了成熟包装所需的信号(d)M13K07含有形成单链DNA和病毒包装所需的10个正常的基因。(正确答案)18.黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体，下面不正确的是[单选题]*(a)它具有COS位点，因而可进行体外包装(b)它具有质粒DNA的复制特性(c)进入受体细胞后，不引起裂解反应(d)进入受体细胞后，可引起溶源化反应(正确答案)19．Mu噬菌体也是一种转座元件，这种转座元件[单选题]*（a）可引起寄主的突变（b）可用于细胞内的基因工程（c）具有转座酶基因（d）以上说法都正确(正确答案)20．用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为[单选题]*(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大，而不能释放(c)染色体变性后来不及复性(正确答案)(d)染色体未同蛋白质分开而沉淀21．关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确?[单选题]*(a)溶液I的作用是悬浮菌体(b)溶液Ⅱ的作用是使DNA变性(c)溶液Ⅲ的作用是使DNA复性(d)质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性(正确答案)22．异戊醇的作用是[单选题]*(a)使蛋白质脱水(b)使DNA脱水(c)帮助DNA进入水相(d)减少气泡，促进分相(正确答案)23．Clark做了一个有趣的实验，发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在双链DNA的末端加一个碱基，主要是加[单选题]*(a)dGTP(b)dATP(正确答案)(c)dCTP(d)dTTP24．变色的酚中含有氧化物，这种酚不能用于DNA分离，原因主要是[单选题]*(a)氧化物可使DNA的磷酸二酯键断裂(正确答案)(b)氧化物会改变pH值(c)氧化物同DNA形成复合物(d)氧化物在DNA分离后不易除去25．重叠群(contig)是一群克隆，在这个克隆群体中各个体[单选题]*(a)相互之间重叠(正确答案)(b)都是来自不同生物的克隆(c)插人片段位于不同染色体的不同区段(d)位于同一染色体的不同区段26．下面关于多克隆位点(multipleclonesite,MCS)的描述，不正确的—句是(a)[单选题]*(a)仅位于质粒载体中(正确答案)(b)具有多种酶的识别序列(c)不同酶的识别序列可以有重叠(d)一般是人工合成后添加到载体中27．EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要。[单选题]*(a)用65℃处理5~10分钟使限制性内切核酸酶失活(b)用CIP处理载体DNA防止自身环化(c)进行琼脂糖凝胶电泳检测(d)上述说法都正确(正确答案)28．在cDNA技术中，所形成的发夹环可用[单选题]*(a)限制性内切核酸酶切除(b)用3’外切核酸酶切除(c)用S1核酸酶切除(正确答案)(d)用5’外切核酸酶切除29．黏性末端连接法，不仅操作方便，而且[单选题]*(a)产生新切点(b)易于回收外源片段(正确答案)(c)载体不易环化(d)影响外源基因的表达30．关于DNA接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确?[单选题]*(a)给外源DNA添加适当的切点(b)人工构建载体(c)调整外源基因的可读框(d)增加调控元件(正确答案)31．cDNA文库包括该种生物的[单选题]*(a)某些蛋白质的结构基因(正确答案)(b)所有蛋白质的结构基因(c)所有结构基因(d)内含子和调控区32．下列关于建立cDNA文库的叙述中，哪一项是错误的?

[单选题]*(a)从特定组织或细胞中提取DNA或RNA(正确答案)(b)用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA(c)以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA(d)新合成的双链DNA有时需末端修补33．下列对黏性末端连接法的评价中，哪一项是不正确的?

[单选题]*(a)操作方便(b)易于回收片段(c)易于定向重组(正确答案)(d)载体易于自身环化，降低重组率34．关于cDNA的最正确的提法是[单选题]*(a)同mRNA互补的单链DNA(b)同mRNA互补的双链DNA(c)以mRNA为模板合成的双链DNA(正确答案)(d)以上都正确35..Southern印迹的DNA探针（

）杂交。[单选