(高清版)GBT 39946-2021 唇用化妆品中禁用物质对位红的测定 高效液相色谱法

唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会GB/T39946—2021本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东福瑞达生物工程有限公司、上海市日用化学工丁环。IGB/T39946—2021本标准的被测物质是我国《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定的禁用物质。禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，国家有限量规定的应符合其规生危害。目前我国尚未规定该物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定该物质提供检测方法。1GB/T39946—2021唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理4试剂和材料4.2对位红标准品：纯度不小于98%,对位红的英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A的表A.1。4.3三氯甲烷(CHCl₃):优级纯。4.4乙腈(CH₃CN):色谱纯。4.5流动相：乙腈十水=85+15(体积比)。2mL三氯甲烷(4.3),待溶解后用乙腈(4.4)4℃避光保存，有效期3个月)。量取适量的对位红标准储备液，用流动相(4.5)稀释成质量浓度分别为5.3超声波清洗器。2GB/T39946—20215.4涡旋混合器。5.5离心机：转速不低于6000r/min。5.7氮气吹干仪。6试验步骤6.1样品处理称取0.5g(精确至0.0001g)混合均匀试样于50mL离心管中，加入2mL三氯甲烷(4.3),涡旋混匀，加入13mL乙腈(4.4),超声提取10min,6000r/min离心10min。取5mL上清液于40℃条件下氮吹浓缩至近干，用流动相(4.5)溶解定容至1mL,超声提取5min,经0.45μm微孔滤膜(5.6)过滤，供高效液相色谱测定。6.2测定6.2.1色谱条件液相色谱分析参考条件如下：a)色谱柱：C₁8,250mm×4.6mm(内径),5μm,或其他等效色谱柱；b)流动相(4.5);d)柱温：30℃;6.2.2标准工作曲线绘制将标准工作溶液(4.6)按色谱条件(6.2.1)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。对位红标准溶液的典型色谱图和DAD光谱图参见附录B的图B.1和6.2.3试样测定将试样溶液(6.1)按色谱条件(6.2.1)进行测定，外标法定量。试样溶液中被测物的响应值应在标准曲线的线性范围内，超出线性范围则应稀释后再进行分析。必要时，阳性样品需经液相色谱-质谱法进行确证试验(参见附录C)。6.3空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。7结果计算试样中对位红的含量按式(1)计算： (1)3GB/T39946—2021V——试样提取溶液的体积，即三氯甲烷与乙腈体积之和，单位为毫升(mL);V₂——分取液经浓缩后的最终定容体积，单位为毫升(mL);1000——单位换算常数；V₁——用于浓缩分取的样品体积，单位为毫升(mL)。计算结果应扣除空白值，保留两位小数。8回收率和精密度在添加浓度0.60mg/kg～4.00mg/kg范围内，回收率在88.1%～103.8%,相对标准偏差小9允许差在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。4GB/T39946—2021(资料性附录)对位红标准物质的信息表A.1对位红标准物质的信息中文名称英文名称分子式相对分子质量结构式对位红ParaRed6410-10-2C₁6H₁N₃O₃JNN5(资料性附录)对位红标准溶液的典型色谱图和DAD光谱图对位红标准溶液的典型色谱图和DAD光谱图分别见图B.1和图B.2。0.0070.0077.2810.0050.0030.001-0.0010.0时问/min图B.1对位红标准溶液的典型色谱图0.0082260.0064850.0040.0020.000210260310360410460510波长/nm图B.2对位红标准溶液的DAD光谱图6GB/T39946—2021(资料性附录)C.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下：4.0min,20%A～95%A;4.0min～7.0min,95%A;7.0min～7.1min,95%A～20%A;7.1min～10.0min,20%A;d)柱温：40℃;C.2质谱参考条件c)气帘气(CUR):241.3kPa;d)碰撞气(CAD):55.2kPa;e)电喷雾电压(IS):5000.0V;f)离子源温度(TEM):450.0℃;g)雾化气(GS1):206.8kPa;h)辅助气(GS2):206.8kPa;室出口电压(CXP)见表C.1,对位红定量离子对和定性离子对的MRM色谱图分别见图C.1和图C.2。表C.1对位红的质谱参数化合物保留时间/min母离子m/子离子m/z对位红强度/cps强度/cps图C.1对位红定量离子对的MRM谱图(10ng/mL)2.3e42.2e42.0e4Max.2.3e4cps4,858000.06000.04000.02000.0C.3定性测定进行试样测定时，将试样适当稀释，按液相色谱和