适用于新高考新教材2025届高考生物一轮总复习考点规范练35微生物的培养技术及应用新人教版

考点规范练35微生物的培育技术及应用一、选择题1.在微生物培育过程中,要重视无菌操作。现代生物学试验中的很多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。下列操作错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的养分细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰旁边进行③无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培育基要进行湿热灭菌⑥加入培育基中的指示剂和染料不须要灭菌A.①③ B.②④C.③⑤ D.④⑥2.(2024山东卷)平板接种常用在微生物培育中。下列说法正确的是()A.不含氮源的平板不能用于微生物培育B.平板涂布时涂布器运用前必需进行消毒C.接种后未长出菌落的培育基可以干脆丢弃D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分别出合成脲酶的微生物3.生长图形法是一种测定微生物养分需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,探讨小组将该菌的悬浮液在不含任何生长因子但含有其他必需养分物质的平板培育基上涂布匀整,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培育结果如下图所示。下列说法错误的是()A.倒平板后不接种,干脆培育可推断培育基是否被污染B.倒平板后须要进行灭菌处理C.图示结果表明该菌须要生长因子乙和丙D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选4.(不定项选择题)下图所示为分别某种以尿素为氮源的细菌试验过程。下列叙述正确的是()A.从有哺乳动物排泄物的地方采集土样,获得目的菌的概率更高B.取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL,分别涂布于全养分的LB固体培育基、以尿素为唯一氮源的固体培育基上C.将试验组和比照组的平板倒置,放入37℃的恒温培育箱中培育24~48hD.在以尿素为唯一氮源的固体培育基上生长的细菌都以尿素为氮源二、非选择题5.回答下列与酵母菌有关的问题。(1)分别培育酵母菌通常运用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“马铃薯琼脂”)培育基,该培育基应接受灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是

。

(2)进行酵母菌培育时,若通入氧气,可促进;若进行厌氧培育,可促进。(填“菌体快速增殖”“酒精产生”或“乳酸产生”)

(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加确定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的缘由是。

6.某科研所从腐烂的葡萄皮及葡萄汁、自酿葡萄酒中筛选出一株性能优良的醋酸菌M12,其分别纯化步骤如下:样品→富集培育→分别纯化→定性试验→定量试验→菌种鉴定。请回答下列问题。(1)培育醋酸菌时在培育基中加入体积分数为95%的酒精作为。醋酸菌在的状况下会将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸。

(2)无菌技术除了可以防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,还能

。(3)某同学买来食醋并尝试从食醋中分别醋酸菌,结果没有得到任何菌落,缘由是

。

请你提出改进措施:

。

(4)培育基中加入酒精的量不能过多,因为。为测试M12的耐酒精实力,需进行相关试验,请简要说明试验的设计思路。

。

7.有机化工原料氯苯不易降解,会污染环境,现欲从土壤中分别高效降解氯苯的微生物。回答下列问题。(1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种,可在被氯苯污染的土壤中取样,并应选用以为碳源的培育液进行选择培育。除含有碳源外,培育液还应含有、无机盐和水等。(2)将获得的三种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg氯苯的相同培育液中培育(培育液中其他养分物质充裕、条件相宜),观测从试验起先到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33h、15h、46h,则应选择微生物作为菌种进行后续培育。

(3)若要测定培育液中选定菌种的菌数,既可用干脆计数法,也可选用法统计活菌数目,一般前者得到的结果(填“大于”“等于”或“小于”)后者。

(4)对选定的菌种进行细胞学检测,发觉它没有具膜细胞器,如线粒体等,则该菌种属于生物,其产生的降解氯苯的酶蛋白在上合成。

8.阿拉伯胶是一种多糖,可被土壤中某些能合成阿拉伯胶降解酶的微生物分解。回答下列问题。(1)为从土壤中分别获得能分解阿拉伯胶的单菌落,某同学设计了A、B、C、D四种培育基(成分见下表,单位:g/L)。培育基ABCD阿拉伯胶25252525NaNO3——33牛肉膏—3——K2HPO41111MgSO4·7H2O1111KCl0.50.50.50.5FeSO4·7H2O0.010.010.010.01琼脂1515—15据表推断,应选用表中的培育基,并分别说明不选用其他培育基的缘由。

①;

②;

③。

(2)为获得单菌落,可将土壤稀释液涂布接种在上述选定的培育基上。在涂布平板时,滴加到培育基表面的菌悬液量不宜过多的缘由是。在样品稀释和涂布平板步骤中,下列不须要的是(填序号)。

①酒精灯②培育皿③显微镜④无菌水(3)为了确定微生物产生的阿拉伯胶降解酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g阿拉伯胶所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应在℃范围内设计后续试验。

9.牛奶富含矿物质和满意人体生长发育所需的多种氨基酸,长期饮用牛奶有利于增加体质,但牛奶也是多种病菌的传播载体。下图是牛奶消毒及细菌检测试验的过程。请回答下列相关问题。(1)培育基中的蛋白胨为细菌的生长供应的养分物质主要有(答出2点即可),对培育基常接受法进行灭菌。

(2)步骤①称为消毒法,步骤②是。

(3)步骤③的接种方法是。微生物培育过程中,为防止冷凝水对细菌生长的影响,需将培育皿培育。

(4)将接种后的培育基放入中培育,36h后取出,统计3个平板上的菌落数分别是87、83和85。经过消毒的牛奶中,细菌数大约是个/mL。

10.(2024全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培育所利用的碳源关系亲密。为此,某小组通过试验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见下表。碳源细胞干重/(g·L-1)S产量/(g·L-1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题。(1)通常在试验室培育微生物时,须要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有(答出2点即可)。

(2)由试验结果可知,菌株C生长的最适碳源是;用菌株C生产S的最适碳源是。菌株C的生长除须要碳源外,还须要(答出2点即可)等养分物质。

(3)由试验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其缘由是。

(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关试验。请简要写出试验思路:。

(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是(答出1点即可)。

答案：1.D无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体、操作的空间、操作者的衣着和手等;需进行灭菌的有用于微生物培育的器皿、接种工具、培育基、添加剂(指示剂或染色剂)等。家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能灭菌;加入培育基中的指示剂和染料须要灭菌。2.D不含氮源的平板可用于固氮微生物的培育,A项错误。平板涂布时涂布器运用前通常用酒精消毒后通过火焰灼烧灭菌,B项错误。接种后未长出菌落的培育基须要经过高压蒸汽灭菌后丢弃,以防污染环境,C项错误。只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,因此利用以尿素为唯一氮源的平板能分别出合成脲酶的微生物,D项正确。3.B可通过培育空白培育基推断培育基是否被污染,A项正确。应当先将培育基灭菌再倒平板,B项错误。图中菌落生活在乙、丙区域之间,说明须要生长因子乙和丙,C项正确。不同菌种所需生长因子不同,可利用题干方法筛选某些菌种,D项正确。4.ABC含哺乳动物排泄物的土壤中有较多能合成脲酶的细菌,因此从有哺乳动物排泄物的地方采集土样,获得目的菌的概率更高,A项正确。取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL,分别涂布于全养分的LB固体培育基、以尿素为唯一氮源的固体培育基上,其中全养分的LB固体培育基是比照组,B项正确。将试验组和比照组的平板倒置,放入37℃的恒温培育箱中培育24~48h,C项正确。在以尿素为唯一氮源的固体培育基上生长的细菌大多数以尿素为氮源,还有一些以空气中的氮为氮源,D项错误。5.答案(1)马铃薯琼脂高压蒸汽(或湿热)分散的微生物在相宜的固体培育基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有确定形态结构的子细胞群体(2)菌体快速增殖酒精产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软解析(1)牛肉膏蛋白胨培育基一般用于培育细菌,MS培育基用于植物组织培育,因此,分别培育酵母菌可用马铃薯琼脂培育基。培育基常接受高压蒸汽(或湿热)灭菌法进行灭菌,所视察到的菌落通常是分散的微生物在相宜的固体培育基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有确定形态结构的子细胞群体。(2)在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,繁殖速度快;在无氧条件下,酵母菌进行无氧呼吸,产生酒精和CO2。(3)制作面包时,加入酵母菌,酵母菌分解有机物产生CO2,CO2受热后膨胀使面包松软。6.答案(1)碳源糖源不足、氧气足够、相对培育温度较高(30~35℃)(2)有效避开操作者自身被微生物感染(3)市场购买的食醋在装瓶之前经过灭菌处理,已无活菌从自酿食醋或其他含活醋酸菌的食品中分别醋酸菌(4)酒精会抑制微生物的生长分别在含有完全培育基的平板中添加等量不同浓度梯度的酒精,每个浓度设置3个或3个以上平板,接种等量M12并在相同且相宜的条件下培育一段时间,视察并记录M12菌落的生长状况解析(1)酒精中含有碳元素,可为醋酸菌的生长供应碳源。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃,当氧气足够、缺少糖源时,醋酸菌干脆将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸。(2)无菌技术除了可以防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,还能有效避开操作者自身被微生物感染。(3)买来的食醋在装瓶之前经过灭菌处理,已无活菌,因此不能从食醋中分别出醋酸菌。若要分别醋酸菌,可从自酿食醋或其他含活醋酸菌的食品中分别。(4)酒精会抑制微生物的生长,因此培育基中加入酒精的量不能过多。测试M12的耐酒精实力,自变量是酒精的浓度,因变量是M12菌落的生长状况。为了增加试验结果的可信度,无关变量应限制相同且相宜。据此并依据试验应遵循的单一变量原则、重复原则等所设计的试验思路是分别在含有完全培育基的平板中添加等量不同浓度梯度的酒精,每个浓度设置3个或3个以上平板,接种等量M12并在相同且相宜的条件下培育一段时间,视察并记录M12菌落的生长状况。7.答案(1)氯苯氮源(2)乙(3)显微镜稀释涂布平板大于(4)原核核糖体解析(1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种,应选用以氯苯为碳源的培育液进行选择培育。在该培育液中,只有能降解氯苯的微生物才能生长,而其他微生物不能生长。培育液中除含有碳源外,还应含有氮源、无机盐和水等。(2)微生物乙在含有氯苯的培育液中从试验起先到停止生长所用的时间比微生物甲、丙短,说明微生物乙分解氯苯的实力比微生物甲、丙更强,所以应选择微生物乙作为菌种进行后续培育。(3)若要测定培育液中选定菌种的菌数,既可在显微镜下用特定的细菌计数板或血细胞计数板干脆计数,也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。显微镜干脆计数法不能区分活菌和死菌。而稀释涂布平板法中,当两个或多个细胞连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落。所以一般前者得到的结果大于后者。(4)选定的菌种没有具膜细胞器,如线粒体等,则该菌种属于原核生物。组成原核生物的原核细胞有核糖体,而核糖体是蛋白质合成的场所,所以该菌种产生的降解氯苯的酶蛋白在核糖体上合成。8.答案(1)D①A培育基缺少氮源②B培育基不是以阿拉伯胶为唯一碳源③C为液体培育基,不能分别单菌落(2)培育基表面的菌悬液量过多会出现积液,导致菌体积累,影响分别效果③(3)4535~459.答案(1)碳源、氮源(和维生素)高压蒸汽灭菌(或湿热灭菌)(2)巴氏系列梯度稀释(3)稀释涂布平板法倒置(4)恒温培育箱8.5×104解析(1)培育基中的蛋白胨为细菌的生长供应的养分物质主要有碳源、氮源和维生素等;常接受高压蒸汽灭菌(或湿热灭菌)法对培育基进行灭菌。(2)题图中步骤①把牛奶放在80℃恒温水浴锅中处理15s,接受的是巴氏消毒法,步骤②是系列梯度稀释。(3)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,其中只有稀释涂布平板法可以用于微生物计数。微生物