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课时4动物细胞工程一、选择题1.[2024辽宁]大量悬浮培育产流感病毒的单克隆细胞,可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是(D)A.悬浮培育单克隆细胞可有效避开接触抑制B.用于培育单克隆细胞的培育基通常需加血清C.当病毒达到确定数量时会影响细胞的增殖D.培育基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量解析悬浮培育单克隆细胞,可以保证足够的气体交换,通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散状态悬浮于培育液内,可有效避开接触抑制,A正确;由于细胞的生长是比较困难的过程,血清中含有一些细胞生存的必要成分,用于培育单克隆细胞的培育基通常需加血清,B正确;病毒借助于细胞进行繁殖,利用了宿主细胞的物质、能量等,当病毒达到确定数量时细胞的生命活动会受到影响,进而影响细胞的增殖,C正确;细胞的正常生命活动须要相宜的pH,培育基的pH会影响细胞代谢,进而影响单克隆细胞的病毒产量,D错误。2.[2024牡丹江一模]试验小鼠皮肤细胞进行贴壁生长培育的基本过程如图所示。下列叙述错误的是(D)A.甲过程须要在无菌条件下进行B.乙过程须要用机械的方法或用胰蛋白酶等处理皮肤组织C.丙过程是原代培育,可能出现接触抑制现象D.丁过程可以干脆离心来进行传代培育解析甲过程表示取试验小鼠的组织细胞,离体动物细胞培育须要无菌、无毒的环境,因此甲过程须要在无菌条件下进行,A正确;乙过程表示用机械的方法或用胰蛋白酶等处理皮肤组织,使其分散成单个皮肤细胞,B正确;丙过程表示原代培育,会出现接触抑制现象,C正确;丁过程表示传代培育,该过程也须要用胰蛋白酶等处理细胞,使贴壁细胞分散成单个皮肤细胞,再进行离心,D错误。3.[2024湖南九校联考]运用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”过程可选用如下技术路途。下列相关叙述错误的是(D)A.“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及供应精子的男子B.图中的精子在参加受精前须要进行获能处理C.该项技术的细胞学原理是动物细胞核具有全能性D.图中捐献者和母亲的卵母细胞取自卵巢或输卵管解析由题图分析可知,“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及供应精子的男子,A正确;图中的精子参加受精前需经过获能处理才具有受精实力,B正确;题图所示为动物细胞核移植技术,其细胞学原理是动物细胞核具有全能性,C正确;从题图可以看出,重组后的卵母细胞须要在体外培育至MⅡ期,说明卵母细胞不是来自输卵管,因为来自输卵管的卵母细胞已经进入了MⅡ期,D错误。4.[2024浙江联考]抗原确定簇是确定抗原特异性的特别化学基团,大多存在于抗原物质的表面,一个自然抗原可以有多种和多个抗原确定簇。如图是某种RNA病毒的结构蛋白M表面的两种抗原确定簇及这两种抗原确定簇与相应抗体结合的示意图,将蛋白M注入小鼠体内一段时间后,提取该小鼠的血清和免疫细胞,并利用免疫细胞制备单克隆抗体。下列有关叙述错误的是(B)A.抗体与抗原的结合实质是抗体与抗原确定簇的结合B.制备单克隆抗体时须要先将分别出的免疫细胞进行克隆化培育C.利用该小鼠能制备不止一种抗蛋白M的单克隆抗体D.该蛋白M可用于制备针对该RNA病毒的疫苗解析单克隆抗体制备过程中须要先将分别出的免疫细胞与骨髓瘤细胞融合,不须要先将免疫细胞进行克隆化培育,B错误。二、非选择题5.[2024长沙模拟,10分]随着基因工程等现代生物技术的发展,动物细胞工程的理论和应用均获得了突破性的进展。如图为动物细胞工程涉及的主要技术领域。回答下列问题:(1)在进行动物细胞培育时,将成块的组织中的细胞分散成单个细胞的方法是用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。在培育过程中,要向培育液中加入确定量的抗生素,以防止微生物的污染;还须要向培育液中加入血清等一些自然成分,以保证细胞所需的养分。(2)与植物细胞不同,动物细胞的全能性会随着细胞分化程度的提高而渐渐受到限制,因此,到目前为止,用动物体细胞克隆的动物,实际是通过图中所示的核移植技术实现的。接受图中的细胞融合技术,可使两个或多个动物细胞结合形成一个单核(填“单核”或“多核”)的杂交细胞。解析(1)在进行动物细胞培育时,需用机械的方法或用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理组织块,使其分散成单个细胞。在细胞培育过程中,要向培育液中加入确定量的抗生素,以防止微生物的污染;须要向培育液中加入血清等一些自然成分,以保证细胞所需的养分。(2)动物细胞的全能性会随着细胞分化程度的提高而渐渐受到限制,因此,用动物体细胞克隆的动物,实际是通过核移植技术实现的。细胞融合技术可使两个或多个动物细胞结合形成一个单核的杂交细胞。一、选择题6.[2024山西联考]我国科学家胜利用iPS细胞克隆出了活体小鼠,部分流程如图所示,其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶,TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是(A)A.推想组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程B.①过程的小分子化合物可诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞C.③过程中运用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合D.图示流程未运用胚胎移植等技术解析结合题图可知,在重构胚中注入Kdm4d的mRNA,并用TSA处理后,重构胚发育成克隆鼠,而Kdm4d的mRNA的翻译产物为组蛋白去甲基化酶,可以使组蛋白去甲基化,TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂,可抑制组蛋白脱乙酰酶的作用,组蛋白可发生正常的乙酰化修饰,故推想组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程,A正确;①过程的小分子化合物可诱导小鼠成纤维细胞形成iPS细胞,而不是突变为iPS细胞,B错误;③为动物细胞融合的过程,诱导动物细胞融合所用的病毒是灭活的病毒,C错误;图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术,D错误。7.[2024安徽六校联考]探讨人员利用CD14蛋白制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示,下列选项错误的是(A)A.步骤②可干脆将从小鼠脾脏中分别出的能分泌抗CD14抗体的浆细胞与骨髓瘤细胞诱导融合B.步骤③中的特定培育基属于选择培育基C.步骤⑤除图中所示途径外还可以将筛选出的杂交瘤细胞置于动物细胞培育液中培育D.图中步骤⑥能从小鼠的腹水中提取与CD14蛋白特异性结合的抗CD14单克隆抗体解析步骤②无法将能分泌抗CD14抗体的浆细胞与其他B淋巴细胞分别开,因此应先将从小鼠脾脏中分别出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合,之后再进行筛选,A错误;步骤③为用选择培育基进行培育,以筛选出杂交瘤细胞,步骤④为通过克隆化培育和专一抗体检测进行进一步筛选,以筛选出既能大量增殖,又能产生所需抗体的杂交瘤细胞,B正确;筛选出的杂交瘤细胞既可以注射到小鼠腹腔内增殖,也可以在动物细胞培育液中培育,其中注射到小鼠腹腔内增殖时,可从小鼠腹水中提取相应单克隆抗体,C、D正确。8.[2024宿迁检测]6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6PD)有F和S两种类型,分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两条X染色体会有一条随机失活,且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变更。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培育,再对不同的单细胞分别进行单克隆培育。分别对原代培育和单克隆培育的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测,结果如图所示。有关叙述错误的是(D)A.动物细胞培育是其他动物细胞工程技术的基础B.用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞C.原代培育的细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了不止一个细胞D.单克隆培育的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同解析动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、单克隆抗体的制备等都须要用到动物细胞培育,故动物细胞培育是其他动物细胞工程技术的基础,A正确;用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理皮肤组织,可使其分散成单个细胞,B正确;由题干信息可知,基因型为XFXS的女性体细胞中的两条X染色体会有一条随机失活,且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变更,故对一个细胞进行G-6PD蛋白电泳检测后只显示1个条带,原代培育的细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了不止一个细胞,C正确;单克隆培育的细胞,是通过有丝分裂增殖得到的细胞,故单克隆培育的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同,表达的基因不愿定相同,D错误。二、非选择题9.[2024西安检测,15分]非洲猪瘟是由ASFV(一种双链DNA病毒)感染猪引起的烈性传染病。某探讨小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中,利用核移植技术培育转基因猪,从而得到自动产生ASFV抗体的个体,其过程如图所示。回答下列问题:(1)图中步骤①接受的技术手段是细胞核移植,结构乙处于胚胎发育过程的囊胚期。进行步骤③时,受体C猪子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,从而为来自供体的胚胎在受体内的存活供应了可能。(2)B猪体细胞在培育瓶中培育时,除必需保证环境是无菌、无毒的之外,还必需定期更换培育液,以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。培育到确定程度后,须要分瓶接着培育,分瓶后的培育过程称为传代培育。(3)若要将目的基因导入受体细胞,须要构建基因表达载体,该过程接受双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒,其优点是保证目的基因和载体定向连接。(4)利用抗原—抗体杂交技术推断D猪是否产生ASFV抗体时,运用的抗原物质最好是ASFV外壳蛋白。该抗体也可以运用杂交瘤技术来制备,利用杂交瘤技术制备该抗体时,杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和经ASFV外壳蛋白免疫后的B淋巴细胞融合获得的。解析(1)步骤③表示胚胎移植,进行胚胎移植时,要对受体进行同期发情处理,受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为来自供体的胚胎在受体内的存活供应了可能。(2)进行动物细胞培育时,必需保证环境是无菌、无毒的,此外,还要定期更换培
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