分光光度计使用注意事项剖析

11419日分光光度计使用注意事项剖析分光光度计使用注文档仅供参考文档仅供参考22419日分光光度计的使用一．使用及维护安装环境 温度要求：装在不受阳光直接曝晒的房间；最好装空调，使室温维持在〔20±2℃〕；仪器四周不应有高温的暖气管或其它电热器具；仪器后面板与墙之间应留肯定空间。1.2湿度要求：水蒸气在〔1350～1450〕nm和〔1800～1950〕nm两个波长区域内有光吸取，会严峻干扰测定。潮湿会导致分光器反射膜层斑剥、脱落等。故相对湿度最好保持在〔40～75〕％。高档紫外－可见－近红外分光光度计要用高纯氮气冲洗。枯燥筒内的变色硅胶应及时更换。1.3防震、防尘、防腐和防电磁干扰：光源灯拿灯时不要碰窗口，以免手上的油污经紫外照耀后，形成结痕难以去掉.如果不留神而碰触，应准时用无水乙醇抹擦干净。灯有寿命，要节约使用.但工作间歇时间短，不要关灯和停机.在灯虽然能点亮，但不稳定或强度大大减弱而影响测量时，就应更换灯.应待灯冷却后，再重启动.启动后预热15-30min才能读数.不要用眼睛直视灯，由于紫外辐射会损伤人的眼睛。单色器单色器是仪器的心脏局部.不要轻易装、拆，也不要去摸触镜面.寻常要保持内部枯燥，准时更换枯燥剂，以防止色散元件和反射镜受潮而发霉，测定挥发样品必需使用密封吸取池，以免样品蒸气进入单色器，腐蚀反射镜、透镜及色散元件的镜面.假设选定波长和狭缝宽度是用旋钮，则要按说明书规定的方向转动到欲测的位置，切勿来回转动，以防回衡误差.样品室样品室是存放吸取池的地方，防止样品的穿插污染，决不行将样品留在样品室中过夜.吸取池的光学面肯定要维护好，不能用刷子刷.否则光学面发毛会增加散射而影响测定准确度.保护吸取池最重要的一条是使用后准时清洗，否则留下液痕，日后再洗，事倍功半.用完的吸取池可放在中性肥皂水中(将十二烷基硫酸钠)，或放在8mol／l盐酸加45％乙醇的等量混合液中浸泡，然后用自来水冲洗，再用蒸馏水洗净，放在无灰尘的地方凉干备用.假设急于使用，可在真空中抽干.但不要用热吹风吹干。对于盛过蛋白质和核酸的样品池最好不要用市售的烷基磺化型的清洗剂，由于它们有类似蛋白质的吸取光谱，清洗不慎会引入误差，因此此时最好使用非离子型清洗剂(如triton)浸泡.假设吸取池实在太脏，质量好的吸取池可放在洗液中稍加处理，但要随即取出冲洗，不宜浸泡过长的时间。洗液必需冲洗干净，由于它也有类似蛋白质和核酸的吸取光谱。为了准确的定量测定，吸取池应事先进展校正.校正的方法是在池中参加欲测浓度的溶液，读出各吸取池的吸光度.以一个池为标准读出其它各池的吸光度.然后在读取样品吸光度后，再予校正.市售常规光径(10mm)的吸取池一般匹配到0.Olmm.为了某种工作的需要(如差示光谱测定)必需查找匹配池时，可在池中装入高吸取的样品，读数后加以挑选。一台仪器上的比色皿不得与其它仪器上的比色皿单个调换。比色皿每次用完后应马上用蒸馏水洗净，用软布或擦镜纸擦干，放于比色皿盒内。倾注溶液时要留神，不要弄湿外壁.如不慎弄湿，可用滤纸轻轻吸干后，再用绸布或擦镜纸擦净(最好用白绸，擦镜纸常有纸毛)。检测器：检测器室要保持枯燥，以保证绝缘良好.在使用光电倍增管时，最重要的一点是通电后避开不必要的曝光。在仪器的光电倍增管的前面(一般在样品室的上方)常有暗闸〔微动开关)，这是光电倍增管的保护装置，用来保护其在开启样品室盖时，不受日光照耀.否则通电后的光电倍增管，受强光照耀，会造成永久性的损坏，或至少因“疲劳“而降低灵敏度。硫化铅光电池忌受紫外线照耀，否则会降低其灵敏度。仪器用完后应用罩布盖好，以防落入灰尘。仪器应每半年左右或搬动后应检查波长精度等，以确保仪器性能正常。二．分光光度计的性能检查1．波长范围指分光光度计上限波长和下限波长之间的工作范围，在这个范围内的全部波长应具有足够的能量进展工作.这种检测波长极限是与光源、单色器及检测器的光谱响应特性有关的.190-900nm的紫外-可见分光光度计必需具备氘灯和碘钨灯两个光源，而只有碘钨灯的分光光度计的工作范围，在短波侧不能低于340nm.有时在说明书规定的工作波长范围的两