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文档简介
1牛羊冷冻精液重要垂直传播人畜共患病原的检测技术本标准规定了动物布鲁氏菌病、结核病、Q热、衣原体四种疫病诊断所用的常规分离鉴定及qPCR4缩略语BHQ1:无荧光猝灭基团(Blackholequencher-1)Ct值:每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值所经历的循环FAM:6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein)PCR:聚合酶链式反应(polymerase25.3精液采样器。5.4高速台式冷冻离心机,可控温至4℃,离心速度可达12000g以上。5.6涡旋震荡仪。5.7无菌注射器或EP管。5.10恒温水浴锅:0℃~1005.12高压灭菌锅。6.1除另有规定,本方法试验用水应符合GB/T6682-2008规定的二级水,所用化学试剂均为分以种特异的基因组序列为模板;Q热立克次体qPCR以IS1111为模板;流产衣原体以OmpA基因为3刺激其射精。也可按摩雄性动物的生殖器或用电刺激其发情中枢或性敏感区,使其射精。临床症状和采样时间、采样人等信息。此外采样、样品处理及检测过程所涉及的实验操作应遵守GB9.1精液前处理加1倍~2倍量的灭菌水,1000g离心20物涂片镜检、培养。安福民(antiformin)沉淀浓缩法具体操作参见附录B9.2基因组DNA的提取在上述已完成前处的样品(沉淀物)中加人509.3qPCR反应体系和条件42μL,补充ddH2O至20μL9.4结果判定5酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,溶于蒸馏水中B液(0.2mol/LNa2HPO4溶液称取十二水合磷酸氢二钠(N酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)35.6g,溶于蒸馏水称取17g氯化钠,用适量蒸馏水溶解,量取13mLA液和87mLB液,混合,用蒸馏水定容至6物加蒸馏水恢复
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