微生物的选择培养和计数+高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第1章第2节二微生物的选择培养和计数1分离特定种类的微生物实验室分离微生物的原理；选择培养基的概念。二微生物的选择培养和计数2对微生物进行计数稀释涂布平板法的步骤；微生物计数的方法。资料

PCR是体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。任务一分离特定种类的微生物1、水生栖热菌被筛选出来的条件是什么？提示水生栖热菌能在70～80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。2、这对实验室筛选微生物有什么启示？提示提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。任务一分离特定种类的微生物选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。任务一分离特定种类的微生物现学现用一：

地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些酶的研究与应用，使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。任务一分离特定种类的微生物1）你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌？提示纤维素分解菌大多数分布在富含纤维素的环境中，寻找纤维素分解菌时，可以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土等。任务一分离特定种类的微生物2）有同学说，可以把滤纸埋在土壤中，一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。提示这是人工设置适合纤维素分解菌生存的环境，腐烂的滤纸上很可能有纤维素分解菌。任务一分离特定种类的微生物现学现用二：

尿素含氮量高，是一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成氨，氨再转化为NO₃⁻、NH4+等被植物吸收。这些细菌能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生氨，氨可作为细菌生长的氮源。任务一分离特定种类的微生物1）如何筛选能分解尿素的细菌？提示设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。2）怎么证明选择培养基具有选择作用？提示设置一个完全培养基作为对照，若完全培养基上生长的菌落数多于该选择培养基，则该培养基具有选择作用。任务一分离特定种类的微生物1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数1、稀释涂布平板法任务二对微生物进行计数1）设置空白对照组的目的是什么？提示检测培养基灭菌是否彻底，保证实验结果的准确性。2）稀释涂布平板法的统计原理？提示当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。任务二对微生物进行计数

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

②为了增强实验的说服力，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。

③分析实验结果时，如果重复组结果相差太大，表示操作有误，需要重新实验。任务二对微生物进行计数3）稀释涂布平板法统计的细菌数量准确吗？提示

稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上的观察到的只是一个菌落。任务二对微生物进行计数4）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？提示每克样品中的菌落数=（C÷V）×MC：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V：涂布平板时所用的稀释液的体积M：稀释倍数任务二对微生物进行计数

（2020年全国卷I节选）实验中初步估测摇瓶M中细菌数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____________倍。提示每克样品中的菌落数=（C÷V）×M

2×107=（200÷0.1）×MM=1×104任务二对微生物进行计数1×1042、显微镜直接计数提示

显微镜直接计数不能区分死菌与活菌，因此统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，统计结果往往比实际值偏大。任务二对微生物进行计数

1、允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。2、制备以尿素作为唯一氮源的选择培养基是筛选分解尿素细菌的基础。3、可以利用稀释涂布平板法和显微镜直接计数的方法对微生物进行计数。小结从下列项目中选做一个：1.空气中微生物总数的检测；2.水中细菌总数的检测；3.牛奶中细菌的分离与计数；4.土壤中真菌（或放线菌）的分离与计数。到社会中去1、根据选择培养