【关于新冠病毒感染检测的质量管理的文献综述3000字】

关于新冠病毒感染检测的质量管理的文献综述新型冠状病毒肺炎具有早期隐匿、无症状，潜伏期较长，影像显示肺部无典型改变甚至无改变的特点，为临床诊断和鉴别诊断带来了极大的困难[1]。下文将对新冠病毒感染检测的方法及质量管理展开综述。一、抗原检测方式1.抗原检测苏疾的研究指出，抗原是指所有能诱导机体发生免疫应答的物质。新冠病毒是一种核糖核酸（RNA）病毒，有刺突蛋白（S）、膜蛋白（M）、包膜蛋白（E）和核衣壳蛋白（N）4种结构蛋白，可经过B细胞上免疫球蛋白的辨识或经抗原呈现细胞的处理并与主要组织相容性复合体结合成复合物再活化T细胞，引发连续的免疫反应，可被用于抗原检测的目标蛋白。结构蛋白N是新冠病毒里量最大的抗原，感染后会在人体咽部释放出来，可检测此抗原判断是否感染新冠病毒[2]。SARS-CoV2-抗原检测SARS-CoV2-抗原检测能在初期快速识别感染SARS-CoV2-的患者,特别是在实时RT-PCR结果难以获得的情况下,能有效防止病毒传播,以及保证患者得到及时救治[3]。SARS-CoV2-抗原检测是基于S和N蛋白。S蛋白位于病毒颗粒的表面,因此可能更容易被免疫系统识别,N蛋白主要包装病毒基因组RNA,在病毒复制、组装、释放和干扰宿主细胞的过程中发挥重要作用[4]。《新冠病毒抗原检测应用方案(试行)》指出了抗原检测适用人群：（1）到基层医疗卫生机构就诊，伴有呼吸道、发热等症状且出现症状5d以内的人员。（2）隔离观察人员，包括居家隔离观察、密接和次密接、入境隔离观察、封控区和管控区内的人员。（3）有抗原自我检测需求的社区居民[5]。2.质量管理刘义兰等围绕医院参与全员新冠病毒核酸检测采样管理进行阐述,重点对组织管理,采样前准备,采样点、采样台及采样人员设置,采样过程管理,标本管理,医疗废弃物处理,支持督导管理及采样后续管理等进行规范,为医院管理者组织参与核酸检测采样提供参考借鉴[6]。二、血清抗体检测方式1.血清抗体检测旷翠萍等将采集有静脉血的干燥管用3000r/min离心10min分离血清；采用博奥赛斯（天津）生物科技有限公司Axceed260化学发光测定仪开展检测；试剂盒为博奥塞斯SARS-CoV-2抗体化学发光检测试剂（IgM批号：G20205304，国械注准：20203400182；IgG批号：G20200050004，国械注准：20203400183）。将20μl血清样品添加到980μl样品稀释液中，混匀5s，静置15min后开始实验。样本的发光值与其中的新冠病毒IgG/IgM抗体浓度呈正相关，并通过相对光单位（RLU值）和内置的校准曲线进行计算，超过1S/CO截断值判断为阳性[7]。2.质量管理梁咏梅等为了测量新冠病毒核蛋白(N)的血清抗体IgG和刺突(S)蛋白RBD的IgM抗体水平，使用经过充分验证的ELISA试剂盒进行实验（北京万泰生物制药企业有限公司）。参与实验的工作人员必须经过严格的生物安全防护培训与实验标准操作培训。检测人员在实验过程中严格按照标准操作，强化防治污染的意识，及时学习，不断提高实验操作能力与数据分析能力。对使用仪器进行验证、校准，对操作人员、仪器、不同批号试剂进行比对，均符合要求；对弱阳性样本使用至少来自2个不同厂家但包被抗原一致的试剂进行复核检验；对阳性标本均经2次复核。当日每批次检测均设立阴阳性质控，阴阳性质控品检测结果符合预期时判断在控，如若不符合则判断失控，分析失控原因，调整后重新检测样本[8]。三、核酸检测方式1.核酸检测目前，sars-cov-2的核酸检测技术是基于实时荧光RT-PCR。RT-PCR技术已在临床实验室中应用多年。其检测系统成熟[9]。它不仅具有特异性强、灵敏度高、检测周期短、定量检测等优点，而且可以动态监测。病毒感染及治疗效果[10]。然而，由于实时荧光RT-PCR检测sars-cov-2的阳性率较低，检测的准确性受到业内人士的高度质疑。阳性率低的主要原因可能有以下几点[11]。根据国家卫生委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》，用于检测sars-cov-2的样本类型包括上呼吸道样本(如咽拭子、鼻拭子等)、下呼吸道样本(如呼吸道喷雾剂、支气管冲洗液、深咳痰等)、结膜拭子、粪便标本、抗凝血标本等。最高的阳性检出率仍在探索中[11]。此外，sars-cov-2的感染途径还不完全清楚，最佳采样时间也不确定。如果样品中病毒载量浓度低于检出限，将不可避免地出现假阴性结果；此外，目前实验室检测结果显示，下呼吸道样本中srs-cov-2核酸检测的检出率是最高的冠状病毒诊疗方案(最新版本)[12]。痰液是核酸检测的首选样本，但临床检测所需的样本多为上呼吸道样本。采集质量的差异必然会导致错误的阴性结果[13]。2.质量管理由于环境条件和实验设备的限制，RNA病毒核酸稳定性较差，容易降解，容易产生假阴性[14]。苏娟等研究证实srs-cov-2的基因组结构由5'untranslateregion(UTR)、转录复合物(orf1ab)、S基因、E基因、M基因、N基因和3'UTR从上到下依次组成。除了读取之外，还有一些未知的帧序列。实时荧光RT-PCR检测srs-cov-2DNA需要根据这些具体结构进行初步设计。理论上，探测到的目标越多，探测率(灵敏度)越高。然而，在实际的研发中，目标数量越多，设计前缀和查询就越复杂，这无疑会给设计方法和产品加工带来更多的困难[15]。根据美国疾病控制与预防中心的建议，orf1ab是准确率最高的靶点，e基因是一线筛查的靶点，N基因是额外的靶点。因此，目前的sars-cov-2DNA检测试剂盒可分为单靶点(orf1ab+N基因/E基因)、双靶点(orf1ab+N基因/E基因)和三个靶点(orf1ab+N基因+E基因)。不完整的目标设计自然会降低检测率。此外，研究与开发;D、生产sars-cov-2应急检测试剂盒缺乏足够的临床应用验证和系统验证。扩增区域的突变和试剂批次的变化可能导致假阴性结果；此外，目前的检测试剂是用来提取RNA的:质量不保证，定量测量样品通常是用于扩增而不是RNA拷贝数。目前大多数检测试剂盒的检出限为500份/ml，有的检出限为200份/ml，检出限过低，可能会影响最终的扩增效果，导致错误的阴性结果[16]。此外，影响核酸检测分析的因素还有很多，如采样周期、样品的正确储存和运输、实验室操作规范、结果的正确判断和解释等。问题可能导致不可靠的结果[17]。[2]苏疾.抗原检测助力战胜新冠疫情[J].江苏卫生保健,2022(05):56.[3]许玉玲,王海霞,李金月,夏向群,黄学勇.新型冠状病毒抗原检测胶体金法与核酸检测实时荧光RT-PCR方法比较[J].实用医学杂志,2022,38(07):791-794.[4]明焱,冯汝鹏,朴永杰.基于新冠病毒荧光检测的RT-qPCR温控系统[J].电子测量技术,2022,45(06):18-23.[5]新冠病毒抗原检测应用方案(试行)[J].全科医学临床与教育,2022,20(04):293-294.[6]刘义兰,金艳,陈秋香,陈庆,方红梅,耿力,刘倩,吕冬梅,莫蓓蓉,宋锦平,王莉,吴艳艳,杨起,张红梅,周依群,周凤,朱小平,朱震宇,祝毅,程范军.医院参与全员新冠病毒核酸检测样本采集管理专家共识[J].护理学杂志,2022,37(05):1-4.[7]旷翠萍,王恩运,李博生,李林涛,陈伟红,宋铁,孔东峰,叶秋燕,王艳梅,张家儿,江仕清,陈戊申,史蓉婕.血清抗体检测在一起本地传播新冠肺炎聚集性疫情溯源调查中的应用[J].现代预防医学,2021,48(22):4192-4196.[8]梁咏梅,岳营,李立博,樊文娟,姜静静,姜文国.新冠肺炎患者出院6个月后血清抗体水平的检测[J/OL].上海预防医学:1-5[2022-05-26].[9]张祎,李飞飞,汪琳,任彤.新冠病毒核酸检测免疫磁珠富集前处理研究[J].中国口岸科学技术,2022,4(03):60-65.[10]余静怡,余方友.新冠病毒实验室常见检测方法[J/OL].中华医院感染学杂志,2022(04):635-640[2022-05-26].[11]钱扬会,董建英.2019新型冠状病毒实验室检测与预防研究[J].检验医学与临床,2020,17(10):1457-1459+1463.[12]KunnumakkaraAB,RanaV,ParamaD,et.al.COVID-19,cytokines,inflammation,andspices:Howaretheyrelated?[J].LifeSciences,2021:(119201).[13]顾兵.新冠病毒检测技术和临床科研策略[J].中华临床实验室管理电子杂志,2021,9(03):192.[14]蒯文和,吴忠兰,韩坤,马学平,张薇,杨东智,曹慜,袁芳,赵建华.新冠病毒核酸检测实验室质量控制措施建立初探[J].中国公共卫生管理,2021,37(06):838-841.[15]苏娟,梁丹,黎薇,莫艳玲,廖剑洪,郑焕英,柯昌文.基于微量病毒中和抗体试验的新冠肺炎临床确诊病例血清样本的抗体检测方法评价[J].中华实验和临床病毒学杂志,2021,35(06):680-683.[16]MathuriaJP,YadavR,RajkumarLaboratorydiagnosisofSA