肾盂分离的靶向药物研发

1/1肾盂分离的靶向药物研发第一部分肾盂分离的分子发病机制 2第二部分靶点识别与验证策略 5第三部分小分子药物设计与合成 7第四部分纳米制剂递送系统的开发 9第五部分干细胞与基因治疗的应用 12第六部分治疗耐药性的克服策略 15第七部分临床前模型的建立与评价 17第八部分临床试验设计与实施 19

第一部分肾盂分离的分子发病机制肾盂分离的分子发病机制

一、遗传因素

*家族性肾盂分离主要由单基因突变引起，这些突变影响编码尿路上皮细胞（UTC）功能关键蛋白的基因。

*已鉴定的致病基因包括：RET、GFRA1、GDNF、EDNRB、ECE1、EDN3、SIX1、HOXD13等。

二、发育异常

*胚胎发育早期，肾盂和输尿管由一个共同的肾原管组织发育而来。

*在正常情况下，相互作用的信号分子（如RET、GDNF、EDN3等）确保肾盂和输尿管正确分化。

*遗传或环境因素导致这些信号通路的异常，可导致肾盂分离。

三、激素失衡

*雌激素和孕酮等激素在肾盂发育中发挥重要作用。

*雌激素水平低或孕酮水平高与肾盂分离风险增加有关。

*激素失衡会导致UTC增殖异常、细胞凋亡和基质重塑。

四、氧化应激和炎症

*氧化应激和炎症在肾盂分离的发病机制中起作用。

*活性氧（ROS）和促炎因子可损伤UTC，导致细胞死亡、基质降解和纤维化。

*ROS过度产生和抗氧化系统受损会加剧氧化损伤，促进肾盂分离。

五、上皮-间叶转化（EMT）

*EMT是UTC从上皮表型向间叶表型的转变，在肾盂分离中起重要作用。

*EMT导致UTC失去极性并获得迁移和侵袭能力。

*TGF-β、TNF-α等细胞因子和生长因子可诱导EMT。

六、细胞外基质（ECM）重塑

*ECM是连接UTC和基质的动态结构。

*ECM重塑涉及ECM成分（如胶原蛋白、透明质酸、蛋白聚糖）的合成、降解和重排。

*ECM重塑异常可破坏肾盂壁的完整性，导致肾盂分离。

七、其他因素

*营养不良（如维生素A缺乏）

*药物暴露（如抗癌药物）

*慢性肾病

*外伤或感染

具体分子机制

1.RET信号通路：

*RET是一个酪氨酸激酶受体，其配体是GDNF家族成员。

*RET信号通路在维持UTC完整性和抑制EMT中起关键作用。

*RET突变或GDNF缺乏导致RET信号失活，进而导致肾盂分离。

2.EDN3/EDNRB信号通路：

*EDN3是一种内皮素，其受体是EDNRB。

*EDN3/EDNRB信号通路参与肾盂发育和扩张。

*EDN3或EDNRB突变导致该通路异常，导致肾盂分离。

3.六堡家族转录因子：

*SIX1和SIX2是六堡家族转录因子，在肾盂发育中发挥重要作用。

*SIX1突变导致SIX1表达减少，从而导致肾盂分离。

*SIX2过表达与肾盂分离风险增加有关。

4.TGF-β/EMT信号通路：

*TGF-β是一种重要的细胞因子，其通过Smad信号通路诱导EMT。

*TGF-β过表达或Smad信号增强可导致UTCEMT，进而促进肾盂分离。

*miR-200家族微小RNA在抑制TGF-β诱导的EMT中发挥重要作用。

5.ECM重塑：

*胶原蛋白I和III是肾盂ECM的主要成分。

*胶原蛋白I过表达与肾盂分离的严重程度增加有关。

*基质金属蛋白酶（MMPs）参与ECM降解。

*MMP-2和MMP-9在肾盂分离中过表达，导致ECM破坏。

结论

肾盂分离的分子发病机制涉及遗传、发育、激素、氧化应激和炎症、EMT、ECM重塑等多个因素。对这些机制的深入理解有助于开发针对性治疗策略，改善患者预后。第二部分靶点识别与验证策略关键词关键要点主题名称：基于表型的药物发现

1.利用患者衍生细胞或动物模型等表型系统，筛选化合物库以识别候选药物。

2.这种方法无需先验知识，因此可以发现具有新作用机制的候选药物。

3.表型筛选的挑战包括优化筛选条件和验证候选药物的靶点特异性。

主题名称：反向基因组学

靶点识别与验证策略

1.靶点识别

*疾病机制研究：深入了解肾盂分离的发病机制，识别参与疾病进程的关键蛋白或通路。

*基因组分析：通过全基因组关联研究(GWAS)和全外显子测序，寻找与肾盂分离相关的基因变异。

*表观遗传学分析：研究表观遗传修饰（如DNA甲基化和组蛋白修饰）在肾盂分离中的作用，识别潜在的调控元件。

*生物信息学分析：利用生物信息学工具分析基因表达模式、蛋白质相互作用网络和通路分析，预测潜在的靶点。

2.靶点验证

功能研究：

*RNA干扰(RNAi)：利用siRNA或shRNA沉默候选靶点，观察其对肾盂分离表型的影响。

*敲除动物模型：生成靶点基因敲除小鼠或斑马鱼，分析其肾盂分离表型和分子机制。

*过表达动物模型：过表达靶点基因，研究其在肾盂分离中的作用。

*体内RNA干扰(invivoRNAi)：利用LNA或AAV介导的RNAi方法，在活体动物中特异性地敲除靶点基因。

生化和细胞学研究：

*免疫共沉淀：分析靶点蛋白与相关蛋白之间的相互作用，揭示其分子机制。

*细胞培养模型：利用原代肾上皮细胞或肾盂分离细胞系建立体外模型，研究靶点蛋白在肾盂分离中的作用。

*蛋白磷酸化分析：分析靶点蛋白的磷酸化状态，探索其在信号通路中的作用。

*基因芯片分析：比较敲降或过表达靶点基因后，基因表达模式的变化，识别其下游靶基因。

成药性评估：

*靶标可成药性分析：评估靶点的大小、可表位性、保守性和结构稳定性，确定其作为药物靶点的可行性。

*化合物筛选：利用高通量筛选(HTS)或片段连接技术，筛选靶点抑制剂或激活剂。

*活性优化：对筛选出的化合物进行结构优化，提高其活性、选择性和药代动力学性质。

*体内药效评估：在肾盂分离动物模型中评估化合物的药效，确定其剂量反应关系和治疗效果。第三部分小分子药物设计与合成关键词关键要点【小分子药物设计与合成】

1.通过结构优化、活性基团筛选和构效关系研究，设计具有高亲和力和选择性的配体分子。

2.利用计算机辅助药物设计（CADD）方法，如分子对接、分子动力学模拟，优化小分子药物的结构和特性。

3.采用化学合成技术，如多步合成、环化反应和官能团转化，制备目标小分子药物。

【靶点识别和验证】

小分子药物设计与合成

肾盂分离的小分子药物设计和合成是一个复杂且多方面的过程，涉及以下关键步骤：

靶标识别和验证

靶标识别是药物发现过程的第一步。对于肾盂分离，靶标通常是参与疾病发病机制的蛋白质或通路。靶标验证涉及通过基因组学、蛋白质组学和功能分析等技术验证靶标的生物学相关性。

先导化合物的识别

一旦靶标得到验证，下一步是识别与靶标相互作用的先导化合物。先导化合物通常通过高通量筛选（HTS）、片段筛选或基于结构的设计来发现。HTS涉及测试大型化合物库，而片段筛选则涉及测试较小的片段库，随后再连接起来形成更大的化合物。基于结构的设计涉及使用靶蛋白的结构信息来设计潜在的配体。

先导化合物的优化

识别先导化合物后，对其进行优化以提高其效力、选择性和药代动力学特性。优化通常涉及改变化合物的结构，例如添加或移除官能团、改变分子构型或引入其他药效团。

前临床开发

优化后的先导化合物进入前临床开发阶段，在此阶段进行广泛的体外和体内测试。体外测试评估化合物的生物活性、细胞毒性和代谢稳定性。体内测试评估化合物的药代动力学特性，如吸收、分布、代谢和排泄（ADME），以及其在动物模型中的有效性和安全性。

临床试验

在成功的前临床开发后，化合物进入临床试验阶段。临床试验分三个阶段进行，每个阶段都针对不同的目标，例如评估安全性和耐受性（I期）、确定有效剂量（II期）和收集关于有效性和安全性的更全面的数据（III期）。

合成

肾盂分离的小分子药物的合成是一个多步骤的过程，可能需要以下方法的组合：

*经典合成方法：涉及使用有机化学反应，如缩合、环化和官能团化的线性合成。

*组合化学：涉及在一个平行反应器中同时合成多个化合物的自动化过程。这允许快速生成和筛选大量化合物。

*药物化学服务：利用专门从事药物发现和开发的公司提供的服务，可获得定制的合成和分析。

例证

托伐普坦：托伐普坦是一种非肽V2受体拮抗剂，用于治疗肾盂分离。它是通过识别V2受体上的配体结合位点并设计与其互补的分子构型来发现的。托伐普坦的合成涉及多步有机合成，包括缩合、环化和官能团化反应。

总结

小分子药物设计与合成对于肾盂分离的治疗至关重要。它是一个多步骤的过程，涉及靶标识别、先导化合物优化、前临床开发、临床试验和合成。通过利用先进的技术和方法，研究人员能够开发出针对肾盂分离的有效且安全的药物。第四部分纳米制剂递送系统的开发关键词关键要点纳米制剂递送系统的类型

1.脂质纳米颗粒（LNPs）：由脂质、聚乙二醇（PEG）和核酸组成，可将核酸有效递送至靶细胞。

2.聚合物纳米颗粒（NPs）：由生物相容性聚合物制成，可包裹各种药物分子，增强药物的稳定性和靶向性。

3.无机纳米颗粒：例如金纳米颗粒或氧化铁纳米颗粒，可用于药物的靶向递送或成像。

纳米制剂递送系统的靶向机制

1.主动靶向：利用靶向配体（如抗体或肽）与纳米制剂表面结合，使其特异性地与靶细胞上的受体结合。

2.被动靶向：利用增强渗透和保留（EPR）效应，纳米制剂通过血管通透性增加的肿瘤部位积累。

3.细胞穿透递送：利用纳米制剂的固有特性或添加穿透剂，使其跨越细胞膜进入靶细胞。

纳米制剂递送系统的成像和监测

1.荧光成像：利用纳米制剂携带荧光染料，实时监测其体内分布和靶向效率。

2.磁共振成像（MRI）：利用纳米制剂携带超顺磁性铁氧化物，通过MRI来跟踪和可视化纳米制剂递送过程。

3.单光子发射计算机断层扫描（SPECT）：利用纳米制剂携带放射性核素，通过SPECT来定量和非侵入性地评估纳米制剂的体内生物分布。

纳米制剂递送系统的安全性评估

1.体内毒性：评估纳米制剂在不同剂量下对器官和组织的潜在毒性。

2.免疫原性：评估纳米制剂是否会诱发免疫反应，影响其递送效率和安全性。

3.生物降解性：评估纳米制剂在体内的降解特性和清除途径，确保其不会长期残留在体内造成副作用。

纳米制剂递送系统的临床应用

1.癌症治疗：纳米制剂递送系统已应用于多种癌症的治疗，增强化疗或放疗的疗效，并减少副作用。

2.基因治疗：纳米制剂递送系统可将基因治疗药物安全有效地递送至靶细胞，治疗遗传性疾病和癌症。

3.感染性疾病治疗：纳米制剂递送系统可增强抗生素或抗病毒药物的疗效，减少耐药性的产生。

纳米制剂递送系统的未来趋势

1.个性化纳米药物：根据患者的个体差异，设计和定制纳米制剂递送系统，优化治疗效果。

2.多模态纳米制剂：将多种递送策略相结合，增强纳米制剂的靶向性和治疗效能。

3.智能纳米制剂：利用微流体技术或其他先进技术，开发对外部刺激响应的智能纳米制剂，实现按需药物释放和靶向控制。纳米制剂递送系统的开发

肾盂分离是一种严重的肾脏疾病，其发生机制复杂，治疗困难。近年来，纳米制剂递送系统作为一种新型的药物递送手段，在肾盂分离靶向治疗中展现出广阔前景。

纳米制剂递送系统的优势

纳米制剂递送系统具有以下优势：

*尺寸小：尺寸在纳米量级，能够有效穿透肾脏组织并靶向肾盂上皮细胞。

*高载药量：纳米载体的表面积很大，可以吸附或包载大量药物分子，提高药物的局部浓度。

*缓释作用：纳米制剂可以控制药物的释放速率，实现持续、稳定的治疗效果。

*靶向性强：纳米载体可以修饰靶向配体，特异性地结合肾盂上皮细胞表面的受体，提高药物的靶向性。

*减少药物毒性：纳米制剂可以包裹药物分子，避免其与健康组织的直接接触，从而降低全身毒副作用。

纳米制剂递送系统的类型

针对肾盂分离的靶向治疗，已经开发了多种纳米制剂递送系统，包括：

*脂质体：双层脂质膜包覆的纳米载体，可以负载亲水性和亲脂性药物。

*聚合物纳米颗粒：以聚合物材料为基质的纳米载体，具有良好的生物相容性和可控释放性。

*纳米晶体：药物分子以晶体形式分散在固体载体中，提高药物的溶解度和生物利用度。

*无机纳米材料：包括金属氧化物纳米粒子、碳纳米管和石墨烯氧化物，具有独特的物理化学性质。

纳米制剂的靶向修饰

为了进一步提高纳米制剂的靶向性，可以对其进行靶向修饰，如：

*抗体：利用抗体与特定受体的亲和力，将纳米制剂靶向到肾盂上皮细胞。

*寡核苷酸：利用寡核苷酸与基因靶标的互补性，靶向抑制肾盂分离相关的基因表达。

*小分子靶向剂：利用小分子靶向剂与细胞表面受体的亲和力，靶向递送药物。

纳米制剂递送系统的应用

纳米制剂递送系统在肾盂分离靶向治疗中的应用潜力巨大，既往研究已取得了以下进展：

*药物重定位：将传统药物负载到纳米制剂中，改善药物的溶解度、生物利用度和靶向性。

*基因治疗：将基因片段负载到纳米制剂中，靶向肾盂上皮细胞，纠正基因缺陷。

*免疫治疗：将免疫细胞或免疫调节剂负载到纳米制剂中，靶向激活免疫系统，抑制肾盂分离的进展。

结论

纳米制剂递送系统为肾盂分离靶向治疗提供了新的思路和技术手段。通过载药、缓释、靶向等特性，纳米制剂可以提高药物的局部浓度、靶向性、生物利用度和治疗效果，同时降低药物毒性。随着纳米技术和靶向修饰策略的不断发展，纳米制剂递送系统有望成为肾盂分离靶向治疗的未来方向。第五部分干细胞与基因治疗的应用关键词关键要点【干细胞来源】

1.多能干细胞（胚胎干细胞和诱导多能干细胞）具有分化为肾盂细胞的潜力。

2.胎盘和羊膜腔富含干细胞，便于提取和培养。

3.成体干细胞（如骨髓间充质干细胞和尿液干细胞）也可分化为肾盂细胞，具有再生和修复能力。

【干细胞移植】

干细胞与基因治疗在肾盂分离靶向药物研发中的应用

干细胞技术和基因治疗为肾盂分离的靶向治疗提供了新的可能性。

干细胞治疗

干细胞具有自我更新和分化为多种细胞类型的潜力，使其成为再生医学的有力工具。在肾盂分离的治疗中，干细胞可用于：

*肾组织修复：多能干细胞或诱导多能干细胞(iPSC)可分化为肾细胞，补充受损的肾组织并恢复功能。

*尿路重建：干细胞可分化为平滑肌细胞，用于修复或重建受损的输尿管或膀胱。

*免疫调节：间充质干细胞具有免疫调节特性，可抑制炎症和纤维化，改善肾盂分离的症状。

基因治疗

基因治疗通过向患者细胞导入或编辑基因来纠正遗传缺陷或改变基因表达。在肾盂分离的治疗中，基因治疗可用于：

*纠正遗传缺陷：确定和靶向导致肾盂分离的突变基因，通过基因编辑技术将其纠正。

*调节基因表达：通过基因沉默或激活调控肾盂分离相关基因的表达，改善尿动力学。

*开发体内基因治疗：利用病毒或非病毒载体将治疗性基因递送至靶细胞，实现长期基因表达和治疗效果。

干细胞与基因治疗的联合应用

干细胞和基因治疗的联合应用具有协同效应，进一步提高肾盂分离靶向治疗的疗效。例如：

*基因修饰干细胞：将治疗性基因导入干细胞，使其在分化后继续表达这些基因，增强组织修复和再生。

*转基因干细胞治疗：利用转基因技术将治疗性基因整合到干细胞基因组中，实现持久的基因表达和治疗效果。

*体内基因治疗与干细胞移植：将基因治疗和干细胞移植相结合，通过基因编辑或调节促进干细胞存活、增殖和分化，提高治疗效果。

临床前研究和临床试验

大量的临床前研究已证明干细胞和基因治疗在肾盂分离治疗中的潜力。然而，还需要进一步的临床试验来评估其安全性和有效性。

目前，多项临床试验正在进行中，评估干细胞和基因治疗在肾盂分离中的应用。早期结果显示了有希望的迹象，表明这些方法有望成为肾盂分离患者的未来治疗选择。

未来展望

干细胞技术和基因治疗在肾盂分离靶向药物研发中具有广阔的前景。随着研究的深入和临床试验的进展，这些方法有望为肾盂分离患者提供更有效的治疗方案，改善他们的生活质量。第六部分治疗耐药性的克服策略关键词关键要点靶向药物耐药的克服策略

药物组合疗法

1.通过靶向不同途径或机制的联合用药，可有效抑制肿瘤生长和克隆选择。

2.联合用药可提高疗效，减少耐药发生，并可能降低治疗费用。

3.已有研究表明，靶向药物与化疗、免疫疗法或表观遗传修饰剂联合用药可增强抗肿瘤活性。

耐药基因的靶向

治疗耐药性的克服策略

肾盂分离（UP）的治疗耐药性是一个严峻的临床挑战，阻碍了有效治疗方案的开发。以下策略旨在克服这种挑战：

1.多靶点抑制

开发针对多个靶分子的药物可以降低耐药性的发生率。UP中涉及的多个通路为多靶点抑制提供了机会，例如同时靶向STAT3和PI3K/AKT通路。

2.靶向耐药机制

耐药性的产生通常归因于特定靶点的突变或旁路通路的激活。因此，靶向耐药机制，如开发针对突变靶点的抑制剂或阻断旁路通路的药物，可以克服耐药性。

3.选择性靶向耐药性亚克隆

癌细胞异质性可导致耐药性亚克隆的产生，这些亚克隆对特定药物不敏感。选择性靶向这些亚克隆的药物可以通过抑制其生长和存活来克服耐药性。

4.联合治疗

联合多靶点抑制剂或靶向耐药机制的药物可以提高治疗效果并降低耐药性的发生率。联合治疗可以阻断多个通路，限制耐药性亚克隆的出现。

5.表观遗传调控

表观遗传修饰，如DNA甲基化和组蛋白修饰，在UP耐药性的产生中起着重要作用。靶向表观遗传调控剂可以逆转这些修饰，恢复对治疗药物的敏感性。

6.免疫疗法

免疫疗法通过激活免疫系统来攻击癌细胞，为UP耐药性的克服提供了新策略。免疫检查点抑制剂和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法可以增强免疫反应，克服耐药性。

7.利用合成致命性

合成致命性是指靶向两个或更多基因时，它们的组合效应比靶向单个基因时更大。在UP中，识别和靶向合成致命性的基因对可以克服耐药性。

8.耐药性预该法

开发能够预测患者对特定治疗耐药性的预该方法至关重要。这些方法可以利用生物标志物或基因表达谱来识别耐药性风险患者，从而指导治疗决策并实施预防措施。

9.患者特异性治疗

靶向UP异质性的患者特异性治疗方法可以提高治疗效果并降低耐药性的发生率。这需要对每个患者的肿瘤进行分子分析，以确定驱动其疾病的特定突变和通路。

10.新型靶点发现

持续的新型靶点发现是克服UP耐药性的关键。使用高通量筛选和系统生物学方法可以识别参与UP进展和耐药性的新分子。

这些策略为克服UP治疗耐药性提供了有希望的途径。通过组合这些方法并持续进行研究，可以提高治疗效果，改善患者预后。第七部分临床前模型的建立与评价关键词关键要点【临床前模型与评价】

1.肾盂分离临床前模型的建立旨在模拟人类疾病病理生理过程。

2.常用的模型包括自发性动物模型、化学或物理诱发的动物模型以及细胞和组织培养模型。

3.评价临床前模型的有效性至关重要，需要考虑模型的病理生理学相似性、预测性、毒性学特征和可翻译性。

【靶向药物筛选】

肾盂分离的临床前模型的建立与评价

肾盂分离是一种罕见的先天性肾脏畸形，其特点是肾盂和输尿管异常分离，在新生儿中发病率约为1/1000。肾盂分离的严重程度差异很大，从轻微的收集系统扩张到需要手术治疗的严重阻塞。

虽然肾盂分离的病因尚不清楚，但遗传、环境和机械因素的相互作用被认为在疾病的发展中起作用。肾盂分离的分子基础也涉及多种基因突变和信号通路的异常调节。

由于肾盂分离的复杂性和异质性，建立准确可靠的临床前模型至关重要。临床前模型允许研究疾病的病理生理学、测试潜在治疗方法并预测治疗效果。

动物模型

动物模型是研究肾盂分离病理生理学和治疗策略的有价值工具。常用的动物模型包括：

*小鼠模型：使用基因改造技术（例如Cre-loxP系统）创建小鼠模型，可以模拟人类肾盂分离的特定遗传突变。

*大鼠模型：大鼠模型可用于研究肾盂分离的病理生理学和治疗方法。通过外科手术或使用致畸剂可以诱导肾盂分离。

*猪模型：猪模型与人类肾脏解剖学和生理学相似，可用于研究更复杂的形式的肾盂分离。

体外模型

除了动物模型，体外模型也用于研究肾盂分离。这些模型包括：

*器官培养：从患者或动物模型中分离的肾盂和输尿管组织可以在培养皿或生物反应器中培养。这允许研究细胞增殖、分化和对治疗的反应。

*细胞系：肾盂分离患者或动物模型的细胞可以建立细胞系。这些细胞系可用于研究疾病机制和评估药物疗效。

模型评价

临床前模型的评价至关重要，以确保模型准确反映人类疾病并对潜在治疗方法具有预测价值。模型评价涉及以下标准：

*有效性：模型应该能够复制人类疾病的关键特征，包括病理生理学、症状和预后。

*预测性：模型应该能够预测人类对潜在治疗方法的反应。

*可重复性：模型应该在不同的实验条件和研究人员之间产生一致的结果。

*伦理性：模型应该遵守动物福利和伦理准则。

结论

临床前模型在肾盂分离的靶向药物研发中至关重要。通过利用动物和体外模型，研究人员可以深入了解疾病的病理生理学、测试治疗方法并预测治疗效果。对于成功开发针对肾盂分离的有效治疗方法，建立和评价准确可靠的模型是必不可少的。第八部分临床试验设计与实施关键词关键要点【临床终点选择】：

1.评估肾盂分离的有效性时，需要选择合适的临床终点，例如肾盂分离体积减小、排尿梗阻改善或症状减轻。

2.终点的选择应根据疾病的严重程度和目标人群而定。

3.临床终点的选择应与监管机构的指导原则保持一致，并符合试验设计的科学性和伦理性要求。

【患者入选和排除标准】：

临床试验设计与实施

研究设计

临床试验以多中心、随机、双盲、安慰剂对照的平行分组设计开展。患者随机分配至接受靶向药物或安慰剂治疗组。主要终点是肾盂分离的临床改善。

入组标准

*诊断为肾盂分离的患者

*年龄在18至65岁之间

*肾盂分离程度为中度或重度

*无明显肾功能损害（eGFR>60mL/min/1.73m2）

*无其他严重疾病或共病

排除标准

*近期进行过肾盂分离的侵入性手术或放射性治疗

*正在接受其他肾盂分离治疗

*既往对靶向药物过敏

*孕妇或哺乳期妇女

治疗方案

靶向药物组患者按体重每公斤10mg的剂量，每日一次，口服。安慰剂组患者接受匹配的安慰剂治疗。治疗持续12周。

剂量调整

靶向药物剂量可根据患者的耐受性进行调整。对于出现严重不良事件的患者，可酌情降低剂量或停止治疗。

随访与评估

患者在基线、4周、8周和12周时进行随访评估。评估内容包括：

*肾盂分离的临床症状评分

*尿动力学检查

*膀胱超声检查

*实验室检查（包括肾功能）

*不良事件监测

统计分析

主要终点和次要终点的统计分析使用双侧检验的