植物生物学实验理论

一、植物生物学实验理论

（一）、实验的重要性1、是证明科学理论，获得科学发现的重要手段。2、进一步理解课堂内容，把理性认识和感性认识结合起来。3、掌握科学研究的基本技能，培养创新人才的重要途径。（二）植物生物学实验室规则：1、认真预习实验报告。明确目的，掌握原理，列出步骤，提出问题。2、认真操作，仔细观察，从实记录。3、正确操作仪器，不乱开仪器。4、注意安全和清洁卫生（包括值日）。5、正确处理废物。（三）植物生物学实验应注意的共同问题取材一致性。个体、部位、年龄（生理）等。定量准确性。称量、移液、浓度、时间等。处理同一性。温度、抽气、加压等。研究重复性。3次以上。数据处理的统计学原则。（四）植物生物学中常用实验数据处理技术１、数据数据采用统计分析，把每次重复的最终结果用统计分析处理。用表表示，三线表。图表示：曲线图、柱形图、照片等。原则：可用图表示的不用表表示。表1水稻抽穗期不同叶位叶片光与光合作用关系的测定值(已知测定的条件相同,光合的单位为μmolCO2m-2s-1

，光强的单位为μmolphotonm-2s-1

）B.用于论文或实验报告数据，平均值与标准差（Means±SD)

表1水稻抽穗期不同叶位叶片光和光合作用关系C.最好直接用图，线为趋势线，巴是重复计算的标准差4.常用PAR<200（不同植物不同）

molphotonsm-2s-1。求量子效率，光补偿点和呼吸速率。光饱和点的估算？5.通过模型计算1.YEZP(2007).AnewmodelforrelationshipbetweenirradianceandtherateofphotosynthesisinOryzasativa.Photosynthetica,45(4):637-6402.SharkeyTD,BernacchiCJ,FarquharGD,SingsaasEL(2007).FittingphotosyntheticcarbondioxideresponsecurvesforC3leaves.Plant,CellandEnvironment,30:1035–10403.叶子飘(2010).光合作用对光和CO2响应模型的研究进展.植物生态学报,34

(6):

727-740模型优点PnPARmeanssdmeanssd5.000.34800.420.915.270.40600.300.155.230.26400.560.165.370.32300.590.015.150.25201.340.104.200.11100.420.132.720.0950.360.061.760.1129.980.091.280.1120.390.040.650.049.910.020.190.055.350.04-0.150.060.120.05绿萝光合-光响应曲线比较。实际曲线：呼吸速率：0.15量子效率：？光补偿点：？光饱和点：？？Pmax:5.37拟合曲线：呼吸速率：0.258量子效率：0.099光补偿点：0.269光饱和点：402Pmax:5.44Pn(

molCO2.m-2.s-1)PPFD(

molphotons.m-2.s-1)２.照片大量的形态、结构、长相等通过像机、显微镜、电子显微镜、激光共聚焦等记录，甚至摄像。会产生综合类型的图，要有一致性。表型叶倾角和测量数据、电泳图与测定数据要有一致性五、实验报告撰写格式要求浙江大学实验报告课程名称：植物生物学及实验实验类型:

探索、综合或验证.

实验项目名称：

.

学生姓名：

专业：

学号：

.

同组学生姓名：

指导老师:.

实验地点：生物学实验中心313

实验日期：

.一、实验目的和要求：明了二、实验内容和原理：材料、内容和简明原理三、主要仪器设备：1-若干。四、操作方法与实验步骤：简明易操作。五、实验数据记录和处理：记录原始数据，相关计算公式及计算。六、实验结果与分析：根据自己和邻组的结果及分析。七、讨论、心得：结合理论和课外知识。（六）、实验成绩（占总成绩的30%）每次实验3学时计10分记，6学时计20分，最终折算为20分1）实验目的和要求：0.52）实验内容和原理：13）主要仪器设备：0.54）操作（包括课堂）方法与实验步骤）：2(4)5）实验数据记录和处理：2(5)6）实验结果与分析：3(7)7）讨论、心得：1(2)缺席三分之一以上实验，不能参加考试，要重修。（七）本学期实验内容与安排春23.4-3.10植物生理学实验理论+红外线CO2分析仪测定植物光合和呼吸基本原理和LI-6400使用方法33.11-3.17植物组织水势测定——小液流、压力室43.18-3.24叶绿素理化性质和含量53.25-3.31硝酸还原酶活力测定——体内法

(郑绍建)74.8-4.141.植物光合、呼吸、蒸腾，气孔导度测定——红外线CO2分析法。2.改良半叶法测光合。84.15-4.211.植物光合、呼吸、蒸腾，气孔导度测定——红外线CO2分析法。2.改良半叶法测光合。夏2-45.6-5.26植物组织培养技术45.20-5.26植物衰老生理实验（1）植物组织可溶性蛋白和丙二醛含量变化55.27-6.2植物衰老生理实验（2）植物组织SOD活力测定66.3-6.9冰冻逆境对植物组织电导率的影响6CO2+6H2O6(CH2O)+6O2二、红外线CO2分析仪测定植物光和CO2响应曲线。1、红外线CO2分析仪法——测CO2变化：CO2吸收4260nm红外线封闭式：单位时间内CO2下降量√开放式：参比室和叶室CO2差值分析器叶室叶室分析器参比室CO2入口气体出口LI-6400portablephotosynthesissystem(便携式光合测定系统)红兰光源叶室和CO2红外分析器光合仪气体流程图分流器75%Sample25%Reference进入样品室,测定,输出进入参比室,测定,输出开路式原理分析器的俯视图分析器侧视图装有CO2注入系统的气体流程图匹配（Macth）原理示意图连接光源和控制器的地缆LI-6400控制系统（一）操作方法：仪器安装：1、选择叶室。根据测定对象选择不同叶室进行安装,本实验选用仪器自备的红兰光源（一般测定选择红兰光源或自然光源不透明叶室，荧光测定选择荧光叶室，详见说明书）。2、连接仪器各部件2、连接仪器各部件电源连线与控制器正确匹配（管道和线路切不可接错），多孔插线和分析器对准（红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与分析器相接并使另一端与控制器“sample”相接。接上带“buffer”的进气管，接上电源（切记，除“Sleep”状态外，在电源开情况下，不可接或卸管道和线路，否则会烧毁仪器）。LI-6400控制系统接线侧LI-6400控制系统干燥管和碱石灰管侧LI-6400控制系统侧电缆连接LI-6400控制系统侧气管连接LI-6400分析器电缆连接LI-6400分析器气管连接LI-6400分析器分析电缆连接开机与校正：3、插上电池，打开电源开关后。（仪器自动进行状态检测，并进入Dir:/user/configs/Userprefs菜单）。在该菜单下，选择一与叶室、光源相匹配的内容（如“LEDredbluelight”表示用红兰光源不透明底叶室）<enter>，仪器显示：Isthechamber/IRGAconnected?4、已连接，按“Y”，CO2分析仪有“噗……”声，仪器进入开机状态。没有连接，按“NO”。关机或在“Sleep”状态下再连接。5、校正。把碱石灰管和干燥剂管旋至“Scrub”,按F3（Calibration），关闭叶室，选择‘IRGAzero’,按<enter>,“Y”。校正到|CO2|<1μmol,|H2O|<0.1mmol,(约20分)，（CO2,每天应较正，H2O可以1周一次）。按F5(Quit)和escape返回测定界面，校正完成后碱石灰管到“bypass”

。(三)测定参数设置及测量：6、按F4（NewMSMNTS）,按2，按F2（FLOW）设置100-500能合适控制叶室内相对湿度的值，<enter>，按F5（Lampoff）选PAR<enter>，下移到Target<enter>,输入到确定光强（根据植物类型选择饱和光强200-2000），<Keep>,按1。7、夹好叶片，关紧叶室，必要时控制湿度（干燥剂管旋至控制到所要的RH和温度（通过2，F4tempoff）。8、按F1“OpenLogfile”，命名（植物，处理，组号等），及附加标记<enter>。9、调节叶面积，按3，按F1（Area）,输入面积。按1返回。按F5（Match)，如界面显示正常，按F5（IAGRMatch），F1（exit