食品微生物快速检测 沙门氏菌的快速检测（食品安全快速检测技术课件）_第1页
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文档简介

沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）检测背景01实验方法及原理02样品处理与测定步骤03应用范围及结果分析04检测背景第一部分PART01检测背景沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。：）沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）@_@2实验方法及原理第二部分PART02实验方法及原理酶联免疫吸附法01该技术具有特异性强、敏感性高等优点，可以在短时间内准确地将有害微生物检测出来。沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）实验方法及原理实验试剂02固相的抗原或抗体1酶标抗体或抗原2显色剂3沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）实验方法及原理实验原理03@_@沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）3第三部分PART03样品处理与测定步骤样品处理与测定步骤样品处理01待测样品匀液的制备与稀释:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）样品处理与测定步骤测定步骤02加酶标抗体于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1mL,37℃孵育0.5～1h,洗涤。2:)加一定稀释的待测样品0.1mL于已包被异性抗体反应孔中，置37℃孵育1h，然后洗涤，同时做空白孔、阴性对照及阳性对照孔。1:)加底物液显色于各反应孔中，加入临时配制的底物溶液0.1mL,37℃孵育10～30min。3:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）样品处理与测定步骤测定步骤02结果测定置于酶标仪上测定各孔的OD值，并记录结果，读数在加终止液10min内完成。5:)终止反应于各反应孔中加入2mol/L硫酸0.05mL。4:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）样品处理与测定步骤测定步骤02@_@沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）4第四部分PART04适用范围及结果分析适用范围及结果分析应用范围01所有食品原料中的沙门氏菌检测:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）适用范围及结果分析结果分析02临界值(CO，cutoff)的计算:临界值=阴性对照孔OD均值×2.1。1:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）阴性对照孔OD(opticaldensity)均值大于0.1时重新实验，小于0.05时以0.05计算。2:)适用范围及结果分析结果分析02沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）样品OD值S/CO=1者为阳性,样品OD值S/C0＜1者为阴性结果判定适用范围及结果分析注意事项03加试剂前应混匀，力求滴加准确;2:)所有样品按传染源处理;1:)加样应加在板孔的底部，避免产生气泡并迅速完成;3:)沙门氏菌的快速检测（酶联免疫吸附法）适用范围及结果分析注意事项

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