糖化血红蛋白测定试剂盒综述资料

PAGEPAGE2糖化血红蛋白测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）综述资料目录目录 11．产品预期用途 11.1产品预期用途 11.2与预期用途相关的临床适应症背景情况 11.3相关的临床或实验室诊断方法等 12.产品描述 12.1技术原理 12.2主要原料及来源 12.3主要生产工艺过程 22.3.1仪器设备 22.3.2领料 22.3.3R1配制 22.3.4R2a的配制 22.3.5R2b的配制 32.3.6R3的配制 32.3.7半成品检验 32.3.8分装和密封 32.3.9贴标 32.3.10包装 32.3.11成品检验 32.3.12贮存 33.试剂盒主要研究结果总结和评价 33.1．主要研究结果简述 33.2．试剂盒主要性能指标 43.2.1空白吸光度 43.2.2准确度评价 43.2.3分析灵敏度 43.2.4重复性 43.2.5批间差 43.2.6测定范围 43.2.7相关性 43.2.8试剂效期稳定性 43.2.9试剂开盖稳定性 44．有关生物安全性方面的说明 45.其它 45.1同类产品在国内外批准上市情况 45.2相关产品所采用的技术方法临床应用情况 5糖化血红蛋白测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）综述资料1．产品预期用途1.1产品预期用途本试剂盒为体外诊断试剂，用于检测人全血中的糖化血红蛋白的含量。1.2与预期用途相关的临床适应症背景情况糖化血红蛋白是血红蛋白生成后与糖类经非酶促结合而成，它的结合过程缓慢且相对不可逆，持续存在于红细胞120天生命期中，其合成率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比。因此，糖化血红蛋白所占比率能反映测定前1～2个月内平均血糖水平。目前，糖化血红蛋白HbA1c作为糖尿病的筛选、诊断、血糖控制、疗效评价指标已被临床上广泛使用。1.3相关的临床或实验室诊断方法等HbA1c的测定方法主要有四类：色谱法、电泳法、免疫法和化学法。其中色谱法主要有离子交换层析法、高效液相色谱法（HPLC）和亲和层析法。免疫法主要包括放射免疫法（RIA）、酶免疫法（EIA）和胶乳免疫凝集法（LIAA）。测定糖化血红蛋白，目前临床主要采用乳胶凝集反应法和离子交换高效液相色谱法两种，分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。本试剂盒采用的胶乳免疫比浊法具有灵敏度高，特异性好，重复性好，线性范围宽，干扰小的优点。2.产品描述2.1技术原理本试剂盒是利用抗原抗体反应直接测定总血红蛋白（Hb）中糖化血红蛋白（HbA1c）的百分含量。样品中总Hb和HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化，当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳-HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物，此复合物由于羊抗鼠lgG抗体而形成凝集，凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。通过测定吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后，可求出样品中HbA1c占总Hb的百分含量。2.2主要原料及来源试剂盒的主要原材料来源列表如下：试剂名称级别来源胶乳微球生物级别北京迈迪卡科技有限公司_鼠抗人HbA1c单克隆抗体生物级别深圳菲鹏公司羊抗鼠IgG抗体生物级别深圳菲鹏公司2.3主要生产工艺过程2.3.1仪器设备电子天平：BP310S；BP3100S分析仪器：HITACHI7180/7060以及OlympusAU400全自动生化分析仪其它仪器：pH计、量筒、移液器、配液桶、超声波清洗器、离心机、储液罐、灌装机、贴标机2.3.2领料根据生产指令领取物料，并核实物料的名称、批号、数量，确认无误后方可领用。2.3.3R1配制甘氨酸缓冲液：按设计量准确称取甘氨酸若干克，溶解在一定量的纯水中，搅拌3分钟，至完全溶解。称取一定量的NaOH，缓慢加到溶液中，边加入边搅拌，同时用pH计进行监控，调整缓冲液至25℃时pH9.0（8.95~9.05）。按设计量量取90nm胶乳微球若干毫升，加入甘氨酸缓冲液，混合均匀。按设计量称取EDAC若干克，倒入到胶乳溶液中，溶解后混合均匀，再室温旋转混合20分钟。按设计量量取二抗若干毫升，加入到胶乳溶液中，充分混匀，室温旋转混合3小时。将胶乳溶液用离心机4500rpm，离心30分钟，离心后弃上清液，沉淀物用甘氨酸缓冲液重悬，混合均匀。定容，混匀。用0.45μm的滤膜，对R1溶液进行过滤，收集滤液。2.3.4R2a的配制配制甘氨酸缓冲液：按设计量准确称取Gly若干克，溶解在一定量的纯水中，搅拌3分钟，至完全溶解。准确称取一定量的NaOH，缓慢加到溶液中，边加入边搅拌，同时用pH计进行监控，调整缓冲液至25℃时pH9.0（8.95~9.05）。准确称取一定量的PEG6000，加入到缓冲液中，搅拌5分钟，至完全溶解。准确称取一定量的N3防腐剂，加入到缓冲液中，搅拌5分钟，至完全溶解。定容，混匀。用0.45μm的滤膜，对R2a溶液进行过滤，收集滤液。2.3.5R2b的配制按设计量准确量取一抗和二抗若干，溶解在一定量的纯水和甘油的混合液中，搅拌10分钟，至完全溶解。定容，混匀。2.3.6R3的配制配制溶血剂：按设计量准确分别称取TTAB和N3防腐剂若干克，溶解在一定量的纯水中，搅拌3分钟，至完全溶解。用0.45μm的滤膜，对R3溶液进行过滤，收集滤液。2.3.7半成品检验从配制好的R1、R2a、R2b和R3中分别取样，按相应的《糖化血红蛋白试剂盒（胶乳免疫比浊法）半成品检验规程》进行检验，合格后分装。2.3.8分装和密封将R1、R2a、R2b、R3按规格分装到相应塑料瓶或螺口管中，然后进行旋盖密封2.3.9贴标将分装后的试剂用帖标机或手工帖标。2.3.10包装将贴标后的试剂按照包装规格和组件要求，包装成成品。2.3.11成品检验随机抽取包装好的试剂盒，按《糖化血红蛋白试剂盒（胶乳免疫比浊法）成品检验规程》进行检验，合格后即可入库储存。2.3.12贮存将包装好的成品放入2℃～8℃3.试剂盒主要研究结果总结和评价3.1．主要研究结果简述如：产品研究中对反应体系中的缓冲体系、pH值以及主要原料的选择和浓度进行了有效的探索，并确定了检测时间及其它参数特征。在配方确定后，对试剂盒进行了全性能验证和确认，结果显示了性能特征完全符合临床检测需要。在效期稳定性跟踪测试和开盖稳定性测试中，结果满足产品研制要求，也符合临床需要。3.2．试剂盒主要性能指标3.2.1空白吸光度在波长660nm（640~680nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤1.0。3.2.2准确度评价检测中生糖化血红蛋白质控品，测定结果与靶值的相对偏差应≤±15％。3.2.3分析灵敏度测定中生HbA1c校准品，对应于8.5%的HbA1c所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.05～0.20的范围内。3.2.4重复性重复性测定结果的变异系数（CV）≤10%。3.2.5批间差试剂盒的批间差（R）≤10%。3.2.6测定范围在2%～14%范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；绝对偏差应不超过±2％。3.2.7相关性本试剂盒与同类试剂进行比对实验，在2%～14%的范围内，对两试剂的测值进行线性回归，其相关性系数可满足R2≥0.975。3.2.8试剂效期稳定性试剂盒有效期为12个月。在效期满后三个月以内