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22TechnicalcodeofpracticefordiagnosisandintegratedmanagenmentoftomatolateblightI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定喆、屈亚飞、张丹、孙西琳、马馨悦、龚镕烈、王1番茄晚疫病诊断与防治技术规程GB/T8321（所有部分）农药合理使DB22/T3495—2023露地辣椒疫病诊断与防治技术3.1由致病疫霉菌[Phytophthorainfestans（Mont.）deBary]侵染3.2聚合酶链式反应polymerasechainreacti4诊断与防治流程2整个生育期均可发病，主要危害成株期的叶、茎和果实。具35.2.1.1徒手制片a)取洁净的载玻片，在中间滴一滴清水；5.2.1.2镜检5.2.2.1病原菌分离培养5.2.2.1.1在超净工作台上，将采集的病叶浸于75%酒精中，表面消毒30s，再用3%菌2min～3min,用无菌水漂洗3次，吸水纸吸干水后将5.2.2.1.2取4小块病叶置于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基上,在25℃培养箱中培养3d~5d，待菌丝形成后，切取单根菌丝顶端移至新的PDA培养基上纯化培养。纯化以病菌基因组DNA为模板，采用通用引物ITS4/ITS5（ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’ 行。经检测得到ITS序列长度为750bp～760bp。检测结果5.2.2.4序列比对定为番茄致病疫霉菌，其ITS序列长度为754bp。详4对土壤采用生石灰消毒，用量80kg/667m2～100kg白天温度控制在25℃~28℃,夜间温度保持在13℃~18℃,地温不低于13℃。其点燃，插挂于大棚内适当位置，熄灭明火发烟，封棚一夜，次日放烟。每季最多用药次数3次。弱5678C.1.2.3在凝胶成像系统进行电泳结果观察，判断是否为预扩增长度的条带，无非特异性条带，且浓凝胶成像检测PCR扩增产物，经检测得到病原菌ITS序列长度为750bp～760bp。9将PCR产物纯化后测序，测试结果显示番茄晚疫病疫霉菌ITS序列片段长度为1AACCGTTTCAACCCAATAGTACTTGGCGGCATTTTAAACCACTGTGGGGAACGCTGCGAAAGTGAGTCATAACGCATATTAAACTTGGCTACTAAACTGTACTTCTCTTTATGGAGAAATATGGACTGGTATCCATTTGG123456789农药管理b)有农药登

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