《中国药典》2010年版生物安全性检查-国明

《中国药典》2010年版

生物平安性检查山东省药品检验所药理室20山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl内容山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药理及生物检定方法修订概况注射剂平安性检查法应用指导原那么 中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况一、药理及生物检定方法修订概况生物检定法是利用生物体包括整体、离体组织、器官、细胞和微生物等评估药物生物活性的一种方法。它以药物的药理作用为根底，以生物统计为工具，运用特定的实验设计在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反响，通过等反响剂量间比例的运算或限值剂量引起的生物反响程度，从而测定供试品的效价、生物活性或杂质引起的毒性。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况一、药理及生物检定方法修订概况体内测定〔invivo〕以整体动物生物体评价药品的生物活性〔药效、活力或毒力〕体外测定〔inbitro〕以离体器官、组织、微生物、酶和细胞〔原代细胞、传代细胞〕为生物体，利用这些生物体评价药品的生物活性〔药效、活力或毒力〕山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-应用范围一、药理及生物检定方法修订概况如生化药物：一般是从生物体别离、纯化所得，如肝素钠、鱼精蛋白、促肾上腺皮质激素。中药：洋地黄制剂、人工麝香、水蛭等。药品〔生化药品、中药〕生物制品〔疫苗、血液制品〕平安性检查对从动物脏器、微生物或体液等提取的，有效成分不够确切，多组分、结构复杂，理化方法不能有效鉴定并具有生物活性的天然生化药物、中药，以及有些生物技术药物，由于空间结构的细微变化，影响药物的活性中心位点，目前质量标准中仍应用生物检定法评估药物的生物活性。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况工艺与方法验证效价与活性鉴别山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况工艺与方法验证对于新生产工艺、新检测方法的改进、变更，往往需要生物检定来验证核对。中、外药典在重组人生长激素〔rhGH〕重组人胰高血糖素质量标准中明确规定，在生产研发阶段，“生产过程中的产品必须用体内生物检定方法测定其生物效价”，直到生产稳定为止。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况效价与活性当采用理化方法测定如HPLC替代胰岛素等原有的生物效价测定法时，仍需作大量的方法比对、相关性研究等工作。

定量的测定方法半定量的测定方法山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况效价与活性定量的测定方法效价〔potency〕测定是生物检定的主要内容，它是以药理为根底，生物统计为工具，运用特定的实验设计，利用生物体在一定条件下比较供试品与相当于标准品或对照品所产生的特定反响〔可测量、量化的生理指标或生物药效或毒力〕的一种定量的方法，因而被称为定量药理学。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况效价与活性定量的测定方法胰岛素升压素缩宫素硫酸鱼精蛋白肝素洋地黄卵泡刺激素生长激素黄体生成素降钙素山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况效价与活性半定量的测定方法〔活性检查〕当理化测定占主导地位，效价测定一般来讲可以不必精确，可归于活性检查项，采用半定量方法，设定限值，不需精密生物统计，尽可能减少实验动物用量或其他生物体用量；甚至只用于定性的鉴别。例如：新药重组人胰高血糖素类多肽是治疗糖尿病用药，其质量标准中即采用该法〔限值为小鼠血糖降低大于20%〕进行活性检查。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl药品生物检定概况-作用一、药理及生物检定方法修订概况鉴别随着对动物保护意识提高，对实验动物减少、替代、优化〔3R：Reduction、Replacement、Refinement〕的实施，对能用理化测定的药品，生物效价测定逐渐降为鉴别项的定性或半定量测定。如USP升压素大鼠血压升高法用于鉴别。2010年中国药典缩宫素注射液将子宫收缩法放入鉴别项。一、药理及生物检定方法修订概况

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl附录检查法或指导原则增修订情况一部二部热原检查法修订修订细菌内毒素检查法修订修订异常毒性检查法新增修订溶血与凝聚检查法新增新增过敏反应检查法新增修订降压物质检查法新增修订生物检定统计法/

修订中药注射剂安全性检查法应用指导原则修订/

化学药品注射剂安全性检查法应用指导原则/

新增中药生物活性测定指导原则新增/

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl一、药理及生物检定方法修订概况附录增修订主要特点中药质量控制评价模式转变充分验证完善提高充分体现了“3R”原则

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl一、药理及生物检定方法修订概况附录增修订主要特点中药质量控制评价模式转变生物活性引入实现了中药质量标准由单一指标成分定性定量向活性有效成分及生物测定的综合检测转变。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl一、药理及生物检定方法修订概况附录增修订主要特点充分验证遵循科学性、合理性、可操作性，新建或新设立工程必须经不同实验室的共同验证或适用性研究，如注射剂平安性指导原那么对方法学的适用性研究；中药生物活性指导原那么要求对方法的专属性、准确性、精密度〔重复性、中间精密度、重现性〕、适用性、科学性进行了研究。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl一、药理及生物检定方法修订概况附录增修订主要特点完善提高对2010药典一、二部检查法和指导原那么进行修订和改进，对影响结果准确性的实验条件提出了要求，如热原检查法、溶血与凝聚、降压物质检查法、过敏试验。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl一、药理及生物检定方法修订概况附录增修订主要特点表达了“3R”原那么replace、reduce、refine如热原检查法取消家兔使用次数和体重上限规定。中药生物活性指导原那么中对动物的使用等。一、药理及生物检定方法修订概况

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl中药生物活性测定指导原则化药注射剂安全性检查法应用指导原则中药注射剂安全性检查法应用指导原则生物检定统计法降压物质检查法过敏反应检查法溶血与凝聚检查法异常毒性检查法细菌内毒素检查法热原检查法附录增修订主要内容二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl中药平安性检查工程的设定平安性检查方法和检查限值确定山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 本指导原那么为中药注射剂临床使用的平安性和制剂质量可控性而定。中药注射剂平安性检查包括：热原〔或细菌内毒素〕、异常毒性、降压物质、过敏反响物质、溶血与凝聚等项。根据处方、工艺、用法及用量等设定相应检查工程进行适用性研究。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 中药注射剂平安性检查工程的设定中药注射剂项目的设定备注静脉用设热原（或细菌内毒素）、异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚等安全性检查项，必要时考虑降压物质检查项。（功能主治中具有与升压相关内容的注射剂除外）中药注射剂中致热成分复杂，可能干扰细菌内毒素检查，一般首选热原检查项，如该药本身具有清热的药理作用或对家兔有毒性反应，也可选择细菌内毒素检查项。肌内注射用设异常毒性、过敏反应等检查项山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 中药注射剂平安性检查方法和检查限值确定方法适用性〔设定限值前研究〕应进行三批以上供试品的检查验证确定限值

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl热原-细菌内毒素检查二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 方法适用性（设定限值前研究）检查方法热原检查应做适用性研究，求得对家兔无毒性反应、不影响正常体温和无解热作用的剂量。细菌内毒素检查应进行干扰试验，求得最大无干扰浓度。参照热原检查法（附录ⅩⅢA）或细菌内毒素检查法（附录ⅩⅢD）。品种项下可以增加稀释浓度、调节pH和渗透压或缓慢注射等排除干扰或影响的特殊规定。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl热原-细菌内毒素检查二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 设定限值--热原检查设定限值--内毒素检查限值根据临床一小时内最大用药剂量计算。热原检查限值可参照临床剂量计算，一般为人用每公斤体重每小时最大供试品剂量的3～5倍，供试品注射体积每公斤体重一般不少于0.5mL，不超过10mL。限值剂量应不影响正常体温。限值根据临床一小时内最大用药剂量计算内毒素检查限值按规定要求计算，由于药物和适应症(如抗感染、抗肿瘤、心血管药等急重病症用药、儿童老人用药、复合用药、大输液等)的不同，限值可适当严格，至计算值的1/3～1/2，以保证安全用药。细菌内毒素测定浓度应无干扰反应。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 异常毒性检查方法适用性（设定限值前研究）检查方法可参考文献数据，并经单次静脉注射给药毒性试验确定该注射剂的急性毒性数据（LD50或LD1及其可信限）。可由多个实验室或多种来源动物试验求得LD50和LD1数据。注射速度0.1ml/秒，观察时间为72小时。如其它给药途径或延长观察时间应进行相应途径或相应观察时间的急性毒性试验。参照异常毒性检查法（附录ⅩⅢE）。对动物、给药途径和给药次数、观察指标和时间等，方法和限值有特殊要求时，可在品种项下另作规定。山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl限值应低于该注射剂本身毒性的最低致死剂量考虑到实验室间差异、动物反响差异和制剂的差异，建议限值至少应小于LD1可信限下限的1/3(建议采用1/3～1/6)，如难以计算最低致死量，可采用LD50可信限下限的1/4(建议采用1/4～1/8)。如半数致死量与临床体重剂量之比小于20，可采用LD50可信限下限的1/4或LD1可信限下限的1/3。静脉注射最大剂量0.8ml/20g仍未见毒性反响或死亡，可以此作为检查限值。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 设定限值异常毒性检查山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl降压物质检查方法适用性〔设定限值前研究〕供试品按一定注射速度静脉注射不同剂量，观察供试品对猫血压反响的剂量反响关系。供试品与对照品注射体积应相同，通常为0.2～1ml/kg，求得供试品降压物质检查符合规定的最大剂量〔最大无降压反响剂量〕。检查方法参照降压物质检查法〔附录ⅩⅢF〕。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl设定限值临床单次用药剂量的1/5～5倍作为降压反响物质检查剂量限值，急重病症用药尽可能采用高限。特殊情况下，如供试品有一定降压作用，那么可按最大无降压反响剂量的1/2-1/4作为限值剂量。供试品原液静脉注射1ml/kg剂量未见降压反响，该剂量可作为给药限值二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl过敏反响检查方法适用性〔设定限值前研究〕测定供试品对豚鼠腹腔(或皮下)和静脉给药的无毒性反响剂量。可采用注射剂的半成品原辅料进行致敏和激发研究，确定致敏方式和次数在首次给药后14、21、28天中选择最正确激发时间。检查方法参照过敏反响检查法〔附录ⅩⅢG〕。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl设定限值致敏和激发剂量应小于该途径的急性毒性反响剂量,适当参考临床剂量一般激发剂量大于致敏剂量。常用腹腔或鼠鼷部皮下注射途径致敏，每次每只0.5ml,每只1ml静脉注射激发。如致敏剂量较小，可适当增加致敏次数，方法和限值的特殊要求应在品种项下规定。过敏反响检查二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl溶血与凝聚检查方法适用性〔设定限值前研究〕对注射剂原液和稀释液进行溶血与凝聚实验研究,指标除目测外，可增加比色法和显微镜下红细胞计数方法,确定无溶血和或凝聚的最大浓度检查方法参照溶血与凝聚检查法〔附录ⅩⅢH〕。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl设定限值以无溶血和凝聚的最大浓度的1/2作为限值浓度一般应高于临床最大使用浓度过敏反响检查二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl修订背景1、增加了中药平安性检查工程的设定原那么。2、增加了限制前研究〔即方法适用性研究〕，使方法更具科学性、可操作性。3、平安性检查法内容省略，检查限值设定更加具体明确。4、家兔热原检查法检查限值由人用每公斤体重每小时最大供试品剂量的1-3倍修改为3-5倍。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl化学药品注射剂平安性检查法

应用指导原那么化学药品〔包括抗生素、生化药品〕平安性检查工程的设定平安性检查方法和检查限值确定化药与中药注射剂平安性检查法应用指导原那么的异同点二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl化学药品注射剂平安性检查法

应用指导原那么本指导原那么为化学药品注射剂临床使用的平安性和制剂质量可控性而定。化学药注射剂平安性检查包括异常毒性、细菌内毒素〔或热原〕、降压物质〔或组胺物质〕、过敏反响等项。根据处方、工艺、用法及用量等设定相应的检查工程进行适用性研究。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl应设细菌内毒素〔或热原〕检查项。所用原料系动物来源或微生物发酵液提取物，组分结构不清晰或有可能污染毒性杂质，且又缺乏有效的理化分析方法的静脉用注射剂，应考虑设立异常毒性检查项。检查工程的设定静脉用注射剂二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl所用原料系动物来源或微生物发酵提取物时,组分结构不清晰或有可能污染毒性杂质，且又缺乏有效的理化分析方法的肌内注射用注射剂，应考虑设立异常毒性检查项。检查工程的设定肌内注射用注射剂二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl所用原料系动物来源或微生物发酵提取物时,组分结构不清晰或有可能污染异源蛋白或未知过敏反响物质的肌内注射用注射剂，如缺乏相关理化分析方法且临床发现过敏反响，应考虑设立过敏反响检查项。临床用药剂量较大，生产工艺易污染细菌内毒素的肌内注射用注射剂，应考虑设细菌内毒素检查项检查工程的设定肌内注射用注射剂二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl椎管内、腹腔、眼内等特殊途径的注射剂，其平安性检查工程一般应符合静脉用注射剂的要求，必要时增加其它平安性检查工程，如刺激性检查、细胞毒性检查。检查工程的设定特殊途径的注射剂二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl注射剂辅料使用面广，用量大，来源复杂，与药品的平安性直接相关。在质量控制中，应根据辅料来源、性质、用途、用法用量，配合理化分析方法，设立必要的平安性检查工程。检查工程的设定注射剂辅料二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl原料和生产工艺特殊的注射剂必要时应增加特殊的平安性检查工程，如病毒检查、细胞毒性检查等。检查工程的设定其它二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl定义：本法系将一定浓度的供试品和组胺对照品分别观察出现的收缩反响幅度并加以比较，以判定供试品是否符合规定的一种方法。不合格供试品说明含有组胺和类组胺物质，在临床上可能引起血压下降和类似过敏反响等严重的不良反响。检查方法和限值确定组胺检查法二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl干扰试验按组胺类物质检查法，依以下顺序准确注入供试品稀释液加对照品稀释液低剂量、对照品稀释液低剂量、供试品稀释液加对照品稀释液高剂量、对照品稀释液高剂量〔dSL+T、dSL、dSH+T、dSH〕，重复一次，如dSL+T及dSH+T所致的反响值与dSL及dSH所致的反响值根本一致，可认为供试品不干扰组胺物质检查；同时应进行本法与降压物质检查法符合性的研究。否那么该品种不适合设立组胺物质检查项，建议设立降压物质检查项。检查方法和限值确定组胺检查法二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl限值确定除特殊要求外，原那么上与降压物质检查限值一致，以临床单次用药剂量的1/5～5倍量和每千克体重0.1μg组胺剂量计算注射剂含组胺类物质检查限值，其计算公式为：限值L=K/M，其中K值为人每千克体重接受的组胺量〔0.1μg/kg〕，M为降压物质检查限值〔mg/kg、ml/kg、IU/kg〕。供试品剂量应低于最大无收缩干扰剂量。抗肿瘤药、心血管病药等急重病症用药应采用高限。检查方法和限值确定组胺检查法

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl增订背景二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 降压物质检查法使用的动物为猫，现在猫来源复杂、而且难以得到，动物数量、质量都难以保证。因此使用组胺检查法作为体外替代方法。

许多中药注射剂品种在做降压物质检查时，存在一过性降压现象，如清开灵注射液、复方苦参注射液等，但在临床使用时并不存在降压现象；

还有一些活血化瘀类中药注射剂品种如红花注射液，丹参注射液，红花黄色素注射液等，本身具有扩张血管的作用，在做降压物质检查时，在与临床剂量等同的情况下，血压出现大幅度下降的情况。究其原因，是中药注射剂的成分复杂，还是其本身扩张血管的作用，尚不清楚。

因此，在中药注射液的平安性评价中是否增加降压物质检查项一直存在争议。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl增订背景二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 组胺检查法是豚鼠离体回肠收缩法在药品检验领域的应用。豚鼠离体回肠收缩法本身是一种成熟的药理实验方法，在根底药理研究领域应用广泛，其作用机制、拮抗剂与冲动剂的类型与剂量等根底研究均细致深入。本法在借鉴的根底上，对试验条件、结果判定等进行了明确与改进。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl附组胺检查法二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 营养液组成特点

A液：试验当日，取氯化钠160.0g、氯化钾4.0g、氯化钙〔按无水物计算〕2.0g、氯化镁〔按无水物计算〕1.0g与磷酸氢二钠〔含12个结晶水〕0.10g，加注射用水700ml使溶解，再参加注射用水适量，使成1000ml。

B液：取硫酸阿托品0.5mg、碳酸氢钠1.0g、葡萄糖〔含1个结晶水〕0.5g，加适量注射用水使溶解，加A液50.0ml，混合后加注射用水使成1000ml。B液应临用前配制，并在24h内应用。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl附组胺检查法二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 结果判定方法如供试品溶液引起回肠收缩：那么分别计算dSL、dT所致反响的平均值。假设dT所致反响的均值不大于dSL所致反响的均值，即判定供试品组胺类物质检查符合规定；假设dT所致反响的均值大于dSL所致反响的均值，即判定供试品组胺类物质检查不符合规定。

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl附组胺检查法二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-中药 结果判定方法如供试品不引起回肠收缩：那么在供试品溶液中参加组胺对照品高、低剂量，并按以下次序准确注入dSH、dSL+T、dSH+T、dSL,重复一次。假设供试品组胺溶液产生的收缩与对应组胺对照液高、低剂量的收缩根本一致，可判定供试品组胺类物质检查符合规定；假设供试品组胺溶液产生的收缩与对应组胺对照液高、低剂量产生的收缩不相符，即减少或无收缩，或不能重复出现，那么此检查结果无效，应进行供试品的降压物质检查。二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl1、实验证实纯种动物对组胺的反响更为灵敏，收缩值高，灵敏度也较为稳定。因此使用纯种动物是保证实验顺利的根底。2、动物体重应严格控制在250-350g，动物体重过大、过小灵敏度均难以重复。3、禁食时间对豚鼠的肠道平滑肌功能有直接影响，故动物禁食应控制在24h左右，禁食后未使用的动物近期内不应用于本实验。动物要求附组胺检查法-本卷须知二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl1、剖腹取出回肠一段〔选用远端小肠，因为此段最敏感〕，注意防止因牵拉使回肠受损，肠系膜不必要全局部离，容易损伤肠管，少带一些血管组织，肠管更有活力。2、新鲜取出的肠管宜立刻浸泡至营养液B中。3、肠管剪取2～3cm长，具体长度应依据浴桶高度取舍。4、剪取后立即使其在营养中平衡一段时间，并在20分钟内开始给予组胺。5、离体肠管可以保存于B液中，至2-8℃冰箱中冷藏，通入氧气，24h内可以使用。冰箱中保存的离体肠管使用时宜挂在浴桶内1h左右后再开始试验。肠管处置附组胺检查法-本卷须知二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl对于准确记录组胺引起的回肠收缩值十分重要，调零后应预加负荷1g左右，调节使其对收缩的反响最为灵敏。在肠管平衡的过程中，因肠管松弛，预加的负荷值会降低，必要时应调整使其对收缩的反响最为灵敏。但在确定了dSH、dSL后，那么不应调整，否那么可能引起dSH、dSL的收缩高度改变，失去意义。预负荷附组胺检查法-本卷须知二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl干扰的判断是试验过程的重要影响因素。试验中有时灵敏度的下降与样品干扰引起的回肠收缩降低难以区分，应静置或冲洗浴筒使灵敏度恢复后重新试验。建议先取一段肠管，以组胺对照液10-9、10-8、10-7、10-6g/ml…依次给予，观察肠管收缩，以确定所用动物的最正确剂量范围；要注意的是如果组胺对照液的浓度过高，有可能使肠管收缩难以恢复，应更换肠管。干扰的判断附组胺检查法-本卷须知二、注射剂平安性检查法应用指导原那么-化药

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl平安性检查法和检查限值确定中异常毒性检查、细菌内毒素、热原检查、降压物质检查、过敏反响检查两者一致。2.化学平安性检查工程设定原那么中增加了特殊途径的注射剂、注射剂辅料及其它。3.化学注射剂增加了组胺类物质检查项,而中药注射剂增加了溶血与凝聚检查。化药与中药注射剂平安性检查法应用指导原那么的异同点三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl生物活性测定法是以药物的生物效应为根底，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，测定药物有效性的一种方法，从而到达控制药品质量的作用。其测定方法包括生物效价测定法和生物活性限值测定法。三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl控制中药有效性的一种方法；方法根底：生物效应；方法工具：统计学；目的：控制质量；分类：定量法—生物效价测定法定性法—生物活性限值测定法概念三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl中药的药材来源广泛、多变，制备工艺复杂，使得中药制剂的质量控制相对困难中药往往含有多种活性成分和具有多种药理作用，仅仅控制少数成分不能完全控制其质量和反映临床疗效为了使中药的质量标准能更好地保证每批药品的临床使用平安有效，有必要在现有含量测定的根底上增加生物活性测定，以综合评价其质量。背景三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl背景-中药质量控制模式历史现状大致分为三个阶段：外观形态鉴别为主和内在成分监测为主。第一阶段1985年前，包括传统的外观形态鉴别〔即经典的看、嗅、尝、试、量五法〕和显微鉴别，没有确切的定量指标，缺乏专属性鉴别工程。第二阶段1985年后，中药质量控制向微观内在成分监测的方向开展，开始使用化学和仪器分析的方法来对中药成分进行鉴别和含量测定。薄层色谱法的应用，实现了中药的专属性鉴别；现代仪器分析方法来测定中药活性成分和指标成分的含量，结束了中药质量标准中没有定量指标的历史。第三阶段近年来，欧共体在草药质量指南中称：草药及其制剂是以整体为活性物质，单靠测定其中的某种有效成分来考查质量的稳定性是不够的。因此，具有“整体”特征的指纹图谱检测方法得到推广，中药质量控制由单一指标成分定性定量向活性有效成分及生物测定的综合检测的方向开展，是中药质量控制的里程碑。三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl背景-必要性中药成分的复杂多变不确定性导致生物活性的变化中药质量标准的局限性现行的中药质量标准主要是参照化学合成药模式，通过某一个或几个指标有效成分的定性检测与含量测定来对中药的质量加以控制。由于该指标成分不一定是药品的药效成分或专属性成分，即使为主要药效成分，且其卑微的含量限度与临床有效剂量间缺乏相关性，其量效关系、毒效关系目前尚不清楚。质量控制的需要三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl符合药理学研究根本原那么应符合药理学研究随机、对照、重复的根本原那么；具备简单、精确特点；判断标准应明确。表达中医药特点建立的方法，其测定指标应与该中药的“功能与主治”相一致。品种选择合理研究的中药材或中成药应功能主治明确，优先考虑适应症明确，成分单一的中药注射剂品种，对急重症用药、保护品种应重点进行研究。方法科学可靠优先选用生物效价测定法，不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法基本原那么三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl基

本

原

那么品种选择合理表达中医药特色方法科学可靠难度大；判定指标和中医的“功能主治”如何衔接？多功能主治中药指标的选择。功能主治明确；适应症单一；中药注射剂；急重症用药；保护品种；新药？生物效价法生物活性限值测定法三、中药生物活性测定指导原那么山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl基本内容--实验条件试验系选择供试品选择标准品或对照品选择应与试验原理和测定指标密切相关；背景资料清楚、影响因素少、检测指标灵敏、成本低廉；实验动物的要求。尽可能使用小鼠和大鼠，应遵循“优化、减少、替代”的“3R”原则。工艺稳定、质量合格（目前的标准要求）；饮片应基源清楚；使用三批供试品（方法学研究时）。首选中药标准品；可考虑化学药作为对照品；生物效价测定法必须要有标准品测定相对效价；生物活性限值测定法用对照品作为验证。三、中药生物活性测定指导原那么

山东省药品检验所ShandongInstituteforDrugControl基本内容--实验设计设计原理设计类型剂量设计给药途径给药次数指标选择所选实验方法的原理应明确；所选择的检测指标应客观、专属性强；能够体现供试品的功能与主治或药理作用；如果选择机理研究也应考虑指标的专属性采用生物效价测定法，应按CP二部“生物检定统计法”要求进行设计研究；采用生物活性限值测定法，