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第第页土壤全铁试剂盒说明书土壤全铁试剂盒说明书微量法100T/96S注意：正式测定之前选择23个预期差别大的样本做猜测定。测定意义：铁元素是一种十分紧要的植物营养元素，土壤中铁含量直接影响着植物汲取利用以及生长代谢。测定原理：在pH29范围内，盐酸羟胺将三价铁转化为二价铁，与邻菲罗琳反应生成橙红色搭配物，在510nm有特征汲取峰。自备试验用品及仪器：天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。试剂构成和配制：提取剂：粉剂×1瓶，4℃保管。提取液：液体100mL×4瓶，4℃保管。试剂一：液体2mL×1瓶，4℃避光保管。试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保管。试剂三：液体4mL×1瓶，4℃避光保管。样本处理：新鲜土样风干，过100目筛，依照土壤质量（g）：提取剂质量（g）为1：4的比例（建议称取约0.1g土样，加入0.4g提取剂）缓慢加入提取剂于坩埚中，边加边搅拌均匀，然后在马弗炉中550℃熔融10min，然后在920℃熔融30min，趁热取出坩埚，将熔融物转入烧杯，边搅拌边加4mL提取液，必需时加盖，从烧杯口加入，防止溶液溅出，溶解30min后，5000g，25℃离心10min，取上清液待测。测定操作表：空白管测定管样本（μL）20试剂一（μL）2020试剂二（μL）6060试剂三（μL）4040H2O（μL）8060充分混匀，25℃静置20min于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定510nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管A空白管计算公式a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=0.1569x0.0173，R2=0.9992全铁含量（mg/kg）=（△A+0.0173）÷0.1569×V反总÷（W×V样÷V样总）=254.94×（△A+0.0173）÷WV反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，4mL，W：样本质量，gb.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y=0.0785x0.0173，R2=0.9992全铁含量（mg/kg）=（△A+0.0173）÷0.0785×V反总÷（W×V样÷V样总）=509.55×（△A+0.0173）÷WV反总：反应总体积，0.

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