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文档简介

第一章

中药鉴定基本知识与技能(二)

第五节中药鉴定的方法第一章中药鉴定基本知识与技能第五节中药鉴定的方法四大鉴别法适用范围来源鉴定--完整的植、动、矿物类药材性状鉴定--药材、饮片显微鉴定--破碎药材、粉末、中成药

理化鉴定(现代仪器分析)----有效成分、指标成分分析;浸出物测定;纯净程度、有害或有毒物质限量检查涵盖《中国药典》中的项目性状鉴别检查浸出物测定含量测定一、来源鉴定观察植物形态各器官(繁殖器官)热水浸泡软化展平借助放大镜或解剖镜借助显微镜核对文献将检品的特征与书籍中记载的内容相比较,并加以分析原始文献是指第一次发现该种(新种)植物的植物工作者,描述其特征,予以初次定名的文献核对标本模式标本(发表新种时所被描述的植物标本)第五节中药鉴定的方法唇形科植物地瓜儿苗Lycopuslucidus

Turcz

泽兰药材一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法人参一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法白术第五节中药鉴定的方法一、来源鉴定原动物鉴定(鹿茸)一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法鹿茸

为脊索动物门哺乳纲鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。前者习称“花鹿茸”(黄毛茸);后者习称“马鹿茸”(青毛茸)第五节中药鉴定的方法一、来源鉴定马鹿一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法第五节中药鉴定的方法一、来源鉴定

本品为节肢动物门蛛形纲钳蝎科动物东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的干燥体全蝎(东亚钳蝎)一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法桑螵蛸本品为节肢动物门螳螂科昆虫大刀螂TenoderasinensisSaussure、小刀螂Statiliamaculata(Thunberg)或巨斧螳螂Hierodulapatellifera(Serville)的干燥卵鞘第五节中药鉴定的方法一、来源鉴定雄黄:本品为硫化物类矿物雄黄族雄黄主含二硫化二砷(As2S2)一、来源鉴定第五节中药鉴定的方法朱砂:本品为硫化物类矿物辰砂族辰砂主含硫化汞(HgS)

第五节中药鉴定的方法一、来源鉴定二、性状鉴定一、含义

通过眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的方法,来鉴定中药的真伪优劣的方法黄连-味苦、色黄的小檗碱,传统认为黄连“以色黄、味苦者为佳”薄荷-挥发油,香气越浓,挥发油含量越高,传统认为薄荷“以香气浓者为佳”

性状鉴定技术是药学工作者必备的基本功经验鉴别:用简便易行的传统方法观察药材的颜色变化、浮沉情况、以及爆鸣、火焰等特征。经验鉴别术语形象而生动,易懂易记,值得继承和发展第五节中药鉴定的方法1.形状圆柱形(白芍)

羚羊角圆锥形弓形弯曲第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定泽泻(卵圆形)

天麻(椭圆形)二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法1.形状1.形状二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定1.形状1.形状二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法2.大小大小指药材的长短、粗细(直径)和厚度等观察并测量较多的样品允许有少量高于或低于规定的数值对细小的种子或果实类,每10粒排成1行,用毫米刻度尺测量其总长度,然后计算其平均值二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法3.色泽二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法4.表面特征第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定二、性状鉴定4.表面特征第五节中药鉴定的方法第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定4.表面特征5.质地质地系指用手折试药材所感知到的特征一般用坚韧、疏松(或松泡)、黏性、粉性、致密、油润、绵性、角质等术语加以描述粉性:指含有多量的淀粉,折断时常有粉尘散落油润:指其质地柔软,含油而润泽角质:指质地坚实,断面略呈半透明状或有光泽黏性:指含有黏液质,嚼之显黏性,如石斛

二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法6.断面第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定7.气指通过嗅闻药材的气识别药材药材的气不强烈时,可将其破碎、折断或揉搓后再闻;或置于有盖的杯子里,用热水湿润或浸泡后再闻(薄荷、丁香)二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法8.味

是指口尝药材后的味感药材性状中的“味”与性味中的“味”不同(真实味感,葛根味微甜;甘,辛,发散风热)舌各部位对味觉的敏感程度不同药材的部位不同,味道可能不同对有强烈刺激性和剧毒的药材,口尝时要谨慎药材的味感与其所含成分密切相关第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定药材的味感与其所含成分密切相关—

辛辣:常含挥发油—涩:常含鞣质—酸:常含有机酸—甜:常含多糖类成分—咸:常含无机盐—苦:常含生物碱及苷类—麻舌:常含生物碱等毒性成分二、性状鉴定8.味第五节中药鉴定的方法9.水试

是利用某些药材在清水中溶解度的不同及产生各种特殊的变化来鉴定药材的一种方法西红花加水浸泡后,水液染成金黄色苏木投入热水中,水液显鲜艳的桃红色红花入水,水液渐呈金黄色,红花本身颜色不变

玄参入水,水液渐变为黑色

沉香质地较密,比重较大,置入水中会出现下沉

炉甘石因其质地较疏,比重较小,置入水中漂浮

胖大海用热水浸泡,体积膨胀4~5倍二、性状鉴定第五节中药鉴定的方法10.火试是指以火烧或煅药材,根据所产生的现象以鉴定药材的方法。有些药材用火烧后,能产生特殊的气味、颜色、烟雾、闪光和响声等现象降香微有香气,点燃则香气浓烈,有油流出,烧后留有白灰血竭粉末置白纸上,用火隔纸烘烤即熔化,但无扩散的油迹,对光照视色泽鲜红如血;海金沙撒于火焰上可发出爆鸣声及闪光,而松花粉及蒲黄无此现象,可资区别第五节中药鉴定的方法二、性状鉴定磁石召铁——指磁石可吸引自然铜、赭石等含铁类药材;

琥珀拾芥——指琥珀经摩擦可产生静电引力,可吸引芥子;龙骨、龙齿、天竺黄以舌舔之有吸力等。矿物的硬度:指甲相当于2.5级;铜钥匙约3级;小刀约5.5级;钢锉7级染甲(挂甲)鉴别;对光照视法鉴定;熔化试验;条痕鉴别利用药材的某一突出特征进行鉴定第五节中药鉴定的方法性状描述形状大小色泽表面质地断面气味水试火试

①呈椭圆形或长条形,略扁,皱缩而稍弯曲,长3~15cm,直径1.5~6cm,厚0.5~2cm。②表面黄白色至淡黄棕色,有纵皱纹及由潜伏芽排列而成的多轮横环纹,习称“竹节环纹”;顶端有残留茎基(春麻)或红棕色至深棕色鹦嘴状的芽苞(冬麻),习称“鹦哥嘴”,另一端有圆脐形疤痕,习称“肚脐疤”。③质坚硬,不易折断,断面较平坦,黄白色至淡棕色,角质样。④气特异,味甘。第五节中药鉴定的方法三、显微鉴定1.含义

利用显微镜观察药材的组织构造、细胞形状以及内含物的特征,用以鉴定药材的真伪、品质和纯度。

2.适用范围(1)药材组织特征明显或特殊,可用以区别类似品或伪品者(2)药材外形相似,单凭性状不易鉴别时(3)粉末状或易破碎药材(4)含粉末药材的中成药第五节中药鉴定的方法3.主要内容(1)显微制片(2)显微化学鉴定(3)显微测量(4)显微摄影显微制片1.横切片或纵切片制片2.粉末制片3.解离组织制片4.表面制片5.花粉粒与孢子制片6.磨片制片

第五节中药鉴定的方法三、显微鉴定试液(1)水合氯醛试液为最常用的化学性透明剂,可以迅速溶解细胞内含物,使细胞膨胀复原、透明,便于观察。其制片方法有加热透化制片和冷装片2种,前者主要用于观察组织构造、细胞及各种结晶的形态特征;后者主要用于观察菊糖、橙皮苷结晶的形态等。水合氯醛试液透化装片时,易析出水合氯醛结晶,影响观察,可在加热透化后,加稀甘油或甘油乙醇试液1~2滴,以防止结晶析出。配制方法:取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解,即得。(2)稀甘油为物理性透明剂,可增强透光率,但不溶解细胞和细胞内含物。常用于观察细胞壁颜色,细胞内含有的淀粉粒、菊糖、糊粉粒、油滴、树脂等的形态。三、显微鉴定第五节中药鉴定的方法(3)甘油醋酸试液(斯氏液):为常用封藏液,专用于观察淀粉粒形态,可使淀粉粒保持原形,便于测量其大小。配制方法:取甘油、醋酸及水各等份,混匀,即得(4)甘油乙醇试液:为封藏液,也是软化剂,常用于保存植物性材料及临时切片,有软化组织的作用。配制方法:取甘油、稀乙醇各1份,混合,即得(5)乙醇:不同浓度的乙醇适用于观察不同的物质,如70%的乙醇用于固定和观察菊糖;95%乙醇用于观察黏液细胞。(6)5%KOH试液:可使菌类药材的菌丝团溶化露出菌丝,便于观察菌丝的形态此外,尚有苏丹Ⅲ试液、钌红试液、间苯三酚试液、碘试液、硝铬酸试液、α-萘酚试液等。以上试液,均应符合《中国药典》附录的规定其基本程序为:显微制片→显微观察→显微测量→显微化学鉴别→结果判断第五节中药鉴定的方法三、显微鉴定常用的解离组织制片法名称适用范围解离方法装片氢氧化钾法木化组织较少或分散存在的供试品将样品置试管中,加5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去碱液,加水洗涤。取少量置载玻片上,用解剖针撕开,以稀甘油装片观察硝铬酸法木化组织较多或集成较大群束的供试品将样品置试管中,加硝铬酸试液适量,使之浸没样品,放置约30~60min。坚硬的样品时间需要长些,也可在水浴上微温,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤。氯酸钾法将样品置试管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸钾少量,缓缓加热,待产生的气泡渐少时,再及时加入氯酸钾少量,以维持气泡稳定发生,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤三、显微鉴定第五节中药鉴定的方法显微化学鉴定(一)细胞壁性质的鉴别1.木质化细胞壁:间苯三酚+盐酸1滴红色或紫红色2.木栓化或角质化细胞壁:苏丹Ⅲ试液橘红色至红色(二)细胞内含物性质的鉴别1.淀粉粒——用甘油醋酸试液装片,置偏振光显微镜下观察,未糊化淀粉粒显偏光现象,已糊化淀粉粒无偏光现象。加碘或氯化锌碘试液,膨胀并变成蓝色或蓝紫色

2.糊粉粒——加碘试液,显棕色或黄棕色;加硝酸汞试液显砖红色

3.菊糖——加10%α-萘酚乙醇溶液1滴,再加浓硫酸2~3滴,显紫红色,并溶解

4.草酸钙结晶——加稀醋酸不溶解;加稀盐酸溶解而无气泡产生;加硫酸溶液(1→2)溶解,并生成硫酸钙针晶碳酸钙结晶(钟乳体)——加稀醋酸或稀盐酸溶解,并产生气泡;加硫酸溶液(1→2)溶解,产生气泡,并生成硫酸钙针晶

5.黏液6.脂肪油、挥发油或树脂

第五节中药鉴定的方法显微测量第五节中药鉴定的方法四、理化鉴定本法是利用物理、化学或仪器分析的方法,对中药含有的有效成分、指标成分或类别成分进行定性、定量分析,或对中药含有的可溶性物质进行测定,或对中药的纯净程度、有害或有毒物质进行限量检查,以鉴定中药的真伪、纯度和质量的方法本法涵盖《中国药典》中的“鉴别”(理化鉴别部分)、“检查”、“浸出物”和“含量测定”等内容根据使用目的不同,可分为定性和定量两大类。前者是对中药的真伪进行的鉴定;后者是对中药质量和纯度进行的鉴定第五节中药鉴定的方法(一)膨胀度测定法膨胀度是药品膨胀性能的指标,系指按干燥品计算,每1g药材在水或其他规定的溶剂中,在一定的时间与温度条件下膨胀后所占有的体积(ml)。主要用于含黏液质、胶质或半纤维素类中药的鉴定。如哈蟆油膨胀度不得低于55;北葶苈子膨胀度不得低于12;南葶苈子膨胀度不得低于3。S=V/W式中,S为膨胀度;V为药物膨胀后的体积(ml);W为供试品按干燥品计算的重量(g)。第五节中药鉴定的方法(二)化学定性鉴别法生物碱与碘化铋钾反应生成棕红色或橙红色沉淀;蒽醌类与碱液反应变红色;黄酮类与盐酸-镁粉的反应显红色;鞣质与三氯化铁反应,显蓝绿色或蓝黑色。有些化学反应有较好的专属性,如天麻乙醇提取液加硝酸汞试液,加热,溶液显玫瑰红色,并发生黄色沉淀;苍术乙醚提取物加对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸溶液,显玫瑰红色,100℃烘烤,显绿色;苦参、山豆根栓皮加碱试液,显橙红色,逐渐变为血红色;马钱子的胚乳切片滴加1%钒酸铵硫酸溶液,显紫色,滴加发烟硝酸,显橙红色。第五节中药鉴定的方法(三)微量升华鉴别法本法是利用中药中所含的某些化学成分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,根据升华物的理化性质进行鉴别的方法。如大黄微量升华得黄色针状(低温时)或羽状(高温时)结晶,在结晶上加碱液则呈红色(蒽醌类成分);斑蝥微量升华得白色柱状或小片状结晶(斑蝥素),熔点130~140℃,加碱溶解,加酸又析出结晶。微量升华装置1.载玻片2.金属圈3.石棉网4.酒精灯5.三角架第五节中药鉴定的方法(四)荧光鉴别法所用仪器为紫外光灯或紫外分析仪。将药材样品、粉末或浸出液置紫外光灯下观察荧光。必要时可在供试品中加酸、碱或其他试剂,再观察荧光及其变化。暗室观察;将供试品置于紫外光灯下约10cm处观察所产生的荧光。紫外光波长一般为365nm,如用254~265nm波长观察荧光,应加以说明。大黄与土大黄的显微特征和化学反应都很相似,但两者的醇提取液点在滤纸上,置紫外光灯下观察,前者显棕色至棕红色荧光,而后者显亮紫色荧光;秦皮水浸液日光下显碧蓝色荧光;芦荟水提液与硼砂共热,显绿色荧光,置紫外光灯(365nm)下观察,显亮黄色荧光。第五节中药鉴定的方法(五)薄层色谱鉴别法本法是将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,在同一块薄层板上点加供试品和对照品,在相同条件下展开并显色,检出色谱斑点,对比供试品与对照品的色谱图进行定性鉴别的方法。1.特点设备简单、操作简便、专属性强、展开剂灵活多变、色谱图直观和容易辨认等特点,是目前中药真伪鉴定的主要方法。(1)离线操作的灵活性:各单元操作既有关联,又相互独立,点样器材和方法、展开方式、显色试剂选择、直观比较或扫描比较可根据需要灵活变通。由于是离线操作,所以个人占机时间短,甚至不需要占机。简单的TLC操作组合

第五节中药鉴定的方法(五)薄层色谱鉴别法(2)正相色谱流动相(展开剂)的广泛适用性(3)同板多个样品平行比较季胺碱类生物碱薄层色谱图黄连薄层色谱图

第五节中药鉴定的方法黄芪薄层色谱图(硫酸加热显色)

(4)色谱后衍生的灵活性和专属性(5)分析结果的直观性(五)薄层色谱鉴别法第五节中药鉴定的方法(1)薄层板

(2)涂布器

(3)点样器材

点样设备1.手工点样器;2.半自动点样器;3.全自动点样器;4.平头50μl微量点样器(五)薄层色谱鉴别法第五节中药鉴定的方法展开箱1.双槽展开箱2.自动展开箱3.程序多次展开仪薄层色谱显色设备第五节中药鉴定的方法(五)薄层色谱鉴别法一般操作步骤为薄层板的制备(制板)→供试品溶液的制备→对照品溶液的制备→点样→展开→显色与检视→结果判断与记录。

图像处理-数码摄象设备

(五)薄层色谱鉴别法第五节中药鉴定的方法(六)杂质检查法取规定量的供试品,摊开,用肉眼或放大镜(5~10倍)观察,将杂质拣出;如其中有可以筛分的杂质,则可通过适当的筛,将杂质分出;检查蒲黄、海金沙时,可将其放入水中振摇,灰沙等杂质会沉在水底,将其分离。将各类杂质分别称重,计算其在供试品中的含量。国家药品标准对部分药材规定了可见杂质的限度,如薄荷的含叶量不能少于30%,桃仁(中的核壳等)不得过1%,酸枣仁(中的核壳等)不得过5%,草乌(中的残茎等)不得过5%,金钱草(中的杂草和泥沙等)不得过8%,乳香、没药(中的树皮、石块等)不得过10%。第五节中药鉴定的方法(七)有害物质检查法中药的有害物质涉及四个方面:①药物本身含有的毒性或潜在毒性因素:如有肾毒性的马兜铃酸②化学污染:如农药残留、重金属和有害元素、兽药残留(动物源性药物)③生物污染:如黄曲霉毒素污染④人为添加:如非法添加化学药品第五节中药鉴定的方法(八)水分测定法本法有烘干法、甲苯法、减压干燥法及气相色谱法4种。测定用的供试品,一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片。用减压干燥法测定水分时,供试品应过二号筛。甲苯法测定水分仪器装置A.圆底烧瓶;B.水分测定管;C.直形冷凝管第五节中药鉴定的方法(九)灰分检查法1.总灰分测定法将干净而无任何杂质的中药粉碎,加热,高温(500~600℃)炽灼至灰化,则细胞及其内含物成为灰烬而残留,由此所得的灰分称为“生理灰分”,其组成为不挥发性无机盐类。同一种药材,在无外来掺杂物时,一般都有一定的生理灰分含量范围,在此范围内的灰分不属于杂质,但如果总灰分超过正常限度范围,则说明掺有泥土、沙石等无机杂质,因此测定总灰分对于控制中药中无机杂质的有无及其含量,具有重要意义。2.酸不溶性灰分的测定有些中药的生理灰分差异较大,特别是组织中含草酸钙较多的中药,如大黄的生理灰分,由于生长条件不同可从8%到20%以上。在这种情况下,总灰分的测定则不能说明是否有外来无机杂质

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