洗涤用品中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的测定 高效液相色谱法

涤用品中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的测定高效液相色谱法本标准规定了洗涤用品中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的高效液相色谱测定方法。本标准适用于洗涤用品中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理样品经水提取、络合剂络合衍生后，必要时采用阴离子交换固相萃取柱净化，采用高效液相色谱/二极管阵列检测器检测，以保留时间和紫外吸收光谱定性，外标法定量。4试剂4.1除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，实验用水均为GB/T6682中规定的一级水。4.2乙二胺四乙酸二钠对照品：（CAS号：6381-92-6），纯度≥98%。4.3氮川三乙酸三钠对照品：（CAS号：18662-53-8），纯度≥98%。4.4二乙烯三胺五乙酸五钠对照品：（CAS号：140-01-2），纯度≥98%。4.5甲醇：色谱纯。4.6醋酸钠。4.7冰醋酸。4.8四丁基溴化铵。4.9九水合硝酸铁。4.10浓盐酸。4.11甲酸。4.12硝酸铁溶液（0.1mol/L）：称取4.04g九水合硝酸铁（4.9）至100mL容量瓶，加水溶解，并加入0.85mL浓盐酸（4.10），用水定容至刻度，摇匀。4.13流动相：称取1.6118g四丁基溴化铵（4.85mmol/L）和6.804g醋酸钠（4.6）(50mmol/L)，加水900mL，溶解后用冰醋酸（4.7）调节pH=4.0±0.1，将溶液转移到1000mL容量瓶中，再加入50mL甲醇，用水稀释至刻度，混匀，0.45µm薄膜过滤器过滤，临用前脱气。4.14洗脱液：分别移取50mL甲醇（4.5）、10mL甲酸（4.11）和40mL水至100mL烧杯中，混匀。4.15乙二胺四乙酸标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取乙二胺四乙酸二钠（4.2）对照品适量（精确至0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。4.16氮川三乙酸标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取氮川三乙酸三钠（4.3）对照品适量（精确至0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。4.17二乙烯三胺五乙酸标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取二乙烯三胺五乙酸五钠（4.4）对照品适量（精确至0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。5.2分析天平：感量为0.1mg。5.3氮吹仪。5.4固相萃取装置。5.5涡旋振荡器。5.6超声波清洗器5.7OasisMAX固相萃取小柱1）或相当者（500mg/6mL）：使用前依次用5mL甲醇（4.5），10mL水活化。5.8微孔滤膜：0.45μm，水相。6分析步骤6.1试液的制备6.1.1样品提取准确称取1.0g样品（精确至0.001g）至50mL的比色管中，加入40mL水溶解，涡旋1min，待衍生化。6.1.2衍生化6.1.2.1混合标准工作溶液的衍生化分别准确移取适量的乙二胺四乙酸、氮川三乙酸和二乙烯三胺五乙酸标准溶液至50mL比色管中，加入40mL超纯水和1.0mL硝酸铁溶液（4.12涡旋混匀，超声20min，冷却至室温后，加水定容至刻度，溶液过0.45µm滤膜，待测或必要时按6.1.3净化。6.1.2.2试样提取溶液的衍生化向所得样品提取液（6.1.1）中加入1.0mL硝酸铁溶液（4.12涡旋混匀，超声20min，冷却至室温后，加水定容至刻度，溶液过0.45µm滤膜，待测或必要时按6.1.3净化。6.1.3净化准确移取5mL衍生化溶液（6.1.2）经阴离子交换柱（5.7）处理，控制流速1~2mL/min，依次用5mL水、5mL甲醇（4.5）淋洗，待淋洗液流尽，最后用5mL洗脱液（4.14）进行洗脱，收集洗脱液。将洗脱液经80℃氮吹干，冷却至室温，加水溶解定容至5mL，过0.45µm滤膜，待测。1)OasisMAX固相萃取小柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者。如果其他6.2空白样液试验除不加试样外，均按上述步骤操作。6.3测定6.3.1液相色谱参考条件a)色谱柱：C18柱，（250mm×4.6mm，5µm），或等效色谱柱；b)流动相：5mmol/L四丁基溴化铵+50mmol/L醋酸钠+5%甲醇（醋酸pH至4.0）（4.13）；c)柱温：30℃d)流量：1.0mL/min；e)进样量：20μL。f)紫外检测器波长：260nm。6.3.2标准曲线的绘制将混合标准工作溶液依次注入高效液相色谱仪按照6.3.1测试条件进行测定。分别以标准工作溶液中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，分别绘制标准工作曲线。6.3.3试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中按照6.3.1测试条件进行测定，分别得到乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的峰面积，根据各自标准曲线得到待测液中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的浓度。7分析结果的表述试样中乙二胺四乙酸、氮川三乙酸及二乙烯三胺五乙酸的含量分别按式（1）计算：ic0 式中：Xi——试样中目标物含量，mg/kg；ci——试样中目标物峰面积对应的质量浓度，mg/L；c0——空白试样中目标物的质量浓度，mg/L；V——试样定容体积，mL；K——稀释倍数，不稀释时为1；m——试样质量，g。8检出限和定量限乙二胺四乙酸的检出限为10mg/kg，定量限为25mg/kg；氮川三乙酸的检出限为20mg/kg，定量限为50mg/kg；二乙烯三胺五乙酸的检出限为20mg/kg，定量限为50mg/kg。9精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10%。FeDTPA-200150100500FeNTA-FeDTPA-200150100500FeNTA-（资料性附录）标准溶液衍生物高效液相色谱图及紫外吸收光谱图mAuFeEDTA-250FeEDTA-024681012Time(min)图A.1乙二胺四乙酸、氮川三乙酸和二乙烯三胺五乙酸衍生物的标准高效液相色谱图25020050FeEDTA