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文档简介

④.37①.与单链结合，保持单链稳定、介导单链入侵(2分)②.磷酸二酯(4)①.5%CO2和95%空气②.抗原-抗体杂交③.能增殖，较长时间刺激免疫系统【解析】【分析】过程①为携带有CP530R和F317L基因的质粒经PCR获得带有重组酶识别序列的目的基因，②为同源重组后形成病毒载体2，病毒载体2上的基因位点保留有CmR，但没有AmpR、CcdB。【小问1详解】引物F除需与CMV启动子序列3′端部分配对外，还需在其5′端加上的TK1序列以便后面的同源重组。PCR最后72℃3min的目的是使子链充分延伸，补完合成不完全的片段，保证产物的完整性。【小问2详解】因大肠杆菌中的pSC101是一种温度敏感质粒(在30°C下能复制、在37C下不能复制)，其上的recET基因和ccdA基因的启动子分别受鼠李糖和阿拉伯糖诱导，故大肠杆菌先接种在含鼠李糖和阿拉伯糖的培养基中，在30°C下培养一段时间，加入目的基因并电激；同源重组后的质粒上还保留有CmR，但没有AmpR、CcdB了，故一段时间后将大肠杆菌接种在含氯霉素的培养基中，在37℃下培养以清除pSC101质粒，获得含病毒载体2的大肠杆菌。【小问3详解】据图可知，重组蛋白RecT的功能有与单链结合，保持单链稳定、介导单链入侵，重组过程涉及磷酸二酯键的水解和形成。【小问4详解】动物细胞培养需在含5%CO2和95%空气的气体条件的培养箱中培养。收获细胞及上清液，利用抗原-抗体杂交技术可鉴定重组病毒表面的蛋白质。重组病

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