气相色谱柱的选择方法 色谱柱是如何工作的

第第页气相色谱柱的选择方法色谱柱是如何工作的气相色谱柱的分别效果紧要取决于其固定相，柱长度，柱内径，液膜厚度这几个因素，从原理上讲，这几个因素相同的柱子，其分别效果是完全一样的。1）柱长度的选择分

气相色谱柱的分别效果紧要取决于其固定相，柱长度，柱内径，液膜厚度这几个因素，从原理上讲，这几个因素相同的柱子，其分别效果是完全一样的。1）柱长度的选择辨别率与柱长的平方根成正比。在其他条件不变的情况下,为取得加倍的辨别率需有4倍的柱长。较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分构成的样品。一般来说：15m的短柱用于快速分别较简单的样品，也适于扫描分析；30m的色谱柱是常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上完成；50m、60m或更长的色谱柱用于分别比较多而杂的样品。应当注意，柱长加添分析时间也加添。2）柱内径的选择柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。分别多而杂样品较好。0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色谱柱，但柱容量约高60%。0.53mm：具有仿佛于填充柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流进样，当柱容量是紧要考虑因素时（如痕量分析），选择大口径毛细管柱较为合适。3）液膜厚度的选择液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。厚度加添，保留也加添。0.1～0.2m：薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快，所需柱温度低，且高温下柱流失较小，适用高沸点的化合物的分析。0.25～0.5m：常用的液膜厚度。厚液膜：对分析低沸点的化合物较为有利。4）固定相的选择不同的固定相对不同的分析物的影响不同，依据相像相溶原理，性质越相近，固定相对其的流动阻力越大，其保留时间越长．色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的。

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聚合物基质色谱柱具有相当强的硬度，有无孔和有孔两种规格。该固定相中含有苯基官能团，可与待测物发生疏水相互作用。聚合物基质色谱柱广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的分别。Carbo—H可以用来分析有机酸及利巴韦林等物质，Carbo—Ca可以用来分别树胶醛糖、阿糖醇等糖类。聚合物基质色谱柱接受聚合物基质填料，色谱柱化学稳定性好，寿命长，分别效果随时间变化小。能用碱性溶液进行清洗再生。适用于蒸发光散射检测器、电雾化检测器以及LC/MS。

正确的使用聚合物基质色谱柱是极其紧要的，并且对液相分析特别有帮忙的。接下来的文章是一些使用、清洗和保存液相聚合物基质色谱柱的引导。这些引导依据两方面来分的，一方面是依据聚合物基质色谱柱的基质（硅胶，聚合物或者其他），另一方面是表面键和的化学固定相。

聚合物基质色谱柱接受纯聚合物基材，因此具有的耐缄性（PH范围2—13），适用于带有芳香环以及不饱和化合物的分别/纯化。此类柱供应了广范的溶剂的选择，pH范围可丛1—13、聚合物C18从亲水的甲基丙烯酸酯键合C18官能团，利用亲水的聚甲基丙烯酸酯载体键合ODS性能相像于硅胶键合ODS甲基丙烯酸酯在聚合前就用C18官能团化，因此有较大的重现性没有硅醇基和金属杂质，有用的颗粒度为6，10，50在pH1—13间稳定。和全部的标准的反相溶剂都相容。

聚合物基质色谱柱在pH2～12范围内呈现出较高的化学稳定性，使其可以在碱性条件下被使用。较宽的pH范围还可以使用多碱性化合物在非带电形式下得到分析，削减了二次相互作用发生进而改善分析峰形。由于二次相互作用的降低，聚合物基质色谱柱大大改善了对肽和蛋白质的回收。色谱柱的安装：

（1）拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

（2）拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

（3）按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接（如条件允许，建议在柱前使用保护柱）；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1—0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时确定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，再用扳手连续顺时针拧1／4—1／2圈，切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，请用扳手连续顺时针拧1／4圈，直至不漏液为止。

色谱柱的储存:

1．防止缓冲溶液和水溶液流动相产生微生物，做到流动相用多少配多少，或在水流动相中加200ppm的叠氮钠以抑制细菌成长（确定当心其毒性和潜在的爆炸性）；或在流动相中加20%的有机改性剂，也可抑制微生物生长，有机改性剂还有助于流动相脱气。

2．尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙晴比较好）中，避开在缓冲溶液