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文档简介

细菌的实验室诊断技术一、病料的采集、保存及运送（一）采集病料的原则无菌、适时、含病原多部位、适量（二）采集病料的方法液体材料的采集方法实质脏器的采集方法肠道及其内容物的采集方法皮肤及羽毛的采集方法胎儿（三）病料的保存与运送低温。有冰的保温瓶或4-10℃冰箱灭菌液体石蜡或30%甘油盐水缓冲保存液二、细菌的形态检查直接采集病料做细菌涂片分离培养后做细菌涂片三、细菌的分离培养分离出目的病原菌培养基的选择菌落形态的观察涂片四、细菌的生化试验指示剂PH敏感范围颜色变化酚红（P.R）6.8-8.4黄红溴麝香草酚兰（B.T.B）6.0-7.4黄兰甲基红（M.R）4.4-6.4红黄溴酚兰（B.P.B）3.0-4.6黄兰中性红（N.R）6.8-8.0红黄细菌学中常用的几种酸碱指示剂⊕+--+1、糖分解试验Eg：E.coli能发酵乳糖和葡萄糖，而沙门氏菌、伤寒杆菌只能发酵葡萄糖。糖类

丙酮酸酶(E.coli)

CO2和H2O

（产酸产气）⊕:产酸产气+:产酸不产气

-：不产酸不产气①糖发酵试验⊕+--+GE.coli

丙酮酸（pH≤4.5）(+)(红色)G产气杆菌

2丙酮酸

1乙酰甲基甲醇（pH＞5.4(-)(桔黄色)②甲基红试验(M.R.)+－G产气杆菌

丙酮酸

乙酰甲基甲醇+O2

二乙酰+胍基化合物

红色化合物

VP（+）

E.coli不生成乙酰甲基甲醇，故Vp（-）③VP试验：

（Voges和Proskauer）－+

产气杆菌分解枸橼酸盐（唯一碳源）生成碳酸盐，并分解培养基中的铵盐生成NH3，使培养基由酸性变为碱性，使培养基中的B.T.B.由淡绿色转为深蓝色，称为“+”。④枸橼酸盐利用试验+－大肠杆菌产气杆菌

有些细菌（E.coli）能分解色氨酸生成吲哚，再与二甲基氨基苯甲醛结合，生成玫瑰吲哚（红色），“+”。⑤吲哚试验（Indoletest）Indoletest（吲哚实验）MRtest（甲基红实验）VPtest(Vi)citrateutilizationtest（枸橼酸实验）IMViC试验－－鉴定肠道杆菌IMViC试验大肠杆菌

++--

产气杆菌

--++有些细菌（变形杆菌）能分解含硫氨基酸，生成H2S，若与醋酸铅或硫酸亚铁反应，则生成硫化铅或硫化亚铁（黑色）。⑥硫化氢试验变形杆菌能分解尿素（尿素酶）产氨，使培养基碱性增加（酚红由黄色变为红色），“+”。而沙门氏菌为阴性。左：+右：-⑦尿素酶/脲酶试验

氧化型细菌：必须有分子氧参加。发酵型细菌(兼性厌氧菌)：可以进行无氧降解，但在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖。

O/F试验一般多用葡萄糖进行。产碱型细菌：不分解葡萄糖。利用此试验可区别细菌代谢类型。⑧氧化—发酵试验（O/Ftest）⑧氧化—发酵试验（O/Ftest）高层斜面（0.1%葡萄糖、1%乳糖、1%蔗糖，酚红）

⑨三糖铁试验（TSItest）

反应TSIAIK/A(斜面红色/底黄色)仅发酵葡萄糖，利用蛋白胨A/A(黄/黄)发酵葡萄糖、乳糖+(或)蔗糖AIK/AIK(红/红)均不发酵

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