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文档简介

高效液相色法主讲人：陶程2高效液相色谱仪概述一高效液相色谱仪结构二高效液相色谱仪使用三高效液相色谱仪数据分析四3以气相色谱为基础，在经典液相色谱（LC）实验和技术基础上建立的一种液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）一离心与离心机的概念4HPLC的特点高压压力可达150～300kg/m2高效柱效高，在一根柱中同时分离成分可达100种高灵敏度紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg高速流速为0.1～10.0mL/min一离心与离心机的概念5通常15-30min一个样，某些样品5min可完成速度快可选择固定相和流动相达到最佳分离效果分辨率高用一根色谱柱可分离不同的化合物反复使用紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg灵敏度高样品经过色谱柱后不被破坏容易回收与经典LC相比HPLC的优点6HPLC的适用范围适合分析高沸点、热不稳定、离子型的样品应用范围广泛，适用于医药、环保、石化、生命科学、食品工业、农业等多个领域在已知的化合物中能用液相色谱分析的可占70～80%7一二高效液相色谱仪结构812345高压输液系统色谱柱系统（数据记录处理系统）工作站进样系统

检测系统工作流程9

高压输液系统

高压输液系统贮液器、过滤器、高压输液泵、梯度淋洗装置主要部件：工作系统10进样系统流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置色谱柱系统柱体为直型不锈钢管，内径1～6mm，柱长5～40cm检测器系统紫外检测器、荧光检测器、示差折光检测器、光电二极管阵列检测器色谱工作站可同时采集一到两个独立检测器信号工作系统11操作步骤冲洗柱子冲洗管路关主机关电脑关电源准备

清洗、关机开机、进样流动相标液样液柱子选择仪器检查开电脑、主机、工作站、参数设置，方法建立、进样三高效液相色谱仪使用12谱图判断对照与样品的主成分保留时间应大致一致保留时间0.95＜T＜1.05拖尾因子两次谱图的峰面积应相差不超过1%重复性一般应≥1.5分离度应≥规定的理论塔板数目理论塔板数四高效液相色谱仪数据分析131、定性方法

利用已知标准品定性利用检测器的选择性定性利用紫外检测器全波长扫描

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