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1酶联免疫吸附试验(ELISA)中用于与包被的抗原结合的抗体称为一抗。阴阳性血清和羊经免疫产气荚膜梭菌抗原3次后获得的血清,每次免疫间隔两周。抗体中和试验检测效价高于23用PBST洗涤酶标板5次。取1孔加入1:10倍稀释羊抗产气荚膜梭菌α毒素高免血备方法见附录B),取1孔加入1:10倍稀释的羊阴性血清作为阴性对照(制备方法见附录B);其它用PBST洗涤酶标板5次。加入1:500045A.1.2将增菌液以5%的比例接种到产毒培养基(配制方法见附录A)中,43℃厌氧培养5h-6h进行A.1.5溶解完成后,向管内加入过饱和硫酸铵溶液使其终浓度为40%,再次离心方法同上,最后取3.A.2羊产气荚膜梭菌α毒素蛋白含量b)最后各试管中分别加入5.0mL考马斯亮兰G);当样品中蛋白质浓度较稀时(10mg/m),准曲线,测定595nm的光吸收值。0.0A.3羊产气荚膜梭菌α毒素聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSA.4.1将甲醛缓慢的加入到含有“毒素的溶液中使甲醛终浓度达到0.3%,混匀后,在37℃条件下将外7称取9.0g氯化钠(NaCl)溶于水,):),8
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