酵母细胞的固定化市公开课一等奖省赛课获奖

酵母细胞的固定化第1页在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能举出一些吗？催化效率高、低能耗、低污染等。生产中直接使用酶存在哪些问题？你知道吗？第2页酶制剂存在缺点：

1、通常对等条件非常敏感，轻易失活；2、溶液中酶极难回收，不能被，提升了生产成本；3、反应后会混在产物中，可能。强酸、强碱、高温和有机溶剂影响产品质量再次利用第3页假如你是工程技术人员，领导要你处理这个问题，你怎么办？第4页

阅读P49独立思索3分钟后小组合作讨论：1、什么是高果糖浆？使用它有何好处？2、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？3、介绍一下反应柱及其优点4、了解高果糖浆生产过程。5、这种方法优点是什么？（一）、固定化酶应用实例一、基础知识第5页一、基础知识（一）固定化酶应用实例总结：固定化酶技术优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；固定在载体上酶能够被重复利用。第6页概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间技术。包埋法化学结正当物理吸附法（二）固定化酶技术和固定化细胞技术固定化酶或者固定化细胞分别适用哪些方法？原因？适合用于固定化酶适合用于固定化细胞包埋法是指将微生物细胞均匀包埋在不溶于水多孔性载体中化学结正当是指将酶分子或细胞相互结合或将其结合到载体上物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面第7页思索？

1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一个方法更轻易？哪一个方法对酶活性影响更小？2．固定化细胞固定是一个酶还是一系列酶？3．假如想将微生物发酵过程变成连续酶反应，应该选择哪种方法？4．假如反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？固定化细胞固定化细胞固定是一系列酶固定化细胞技术固定化酶技术固定化细胞第8页直接使用酶固定化酶固定化细胞酶种类营养物质催化反应反应底物优点缺点一个或各种一个不需要不需要需要一个或各种一个一系列酶一系列大分子、小分子大分子、小分子小分子催化效率高，低耗能、低污染等对环境条件敏感，易失活难回收，成本高酶混在产物中影响产品质量。成本低，操作更轻易。可重复利用，易与产物分离不利于催化一系列酶促反应.既能与反应物接触，又能与产物分离.能够重复利用反应物尤其是大分子不易与酶接触，反应效率下降等第9页二、试验操作——酵母细胞固定化用什么方法对酵母细胞固定化？包埋法惯用哪些载体？思索：包埋法明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等第10页三、试验操作（一）制备固定化酵母细胞（1）制备过程包含哪几个步骤？（2）你认为哪个步骤操作是最主要一环？（3）各步骤应该分别注意什么问题？第11页二、试验操作——酵母细胞固定化（1）酵母细胞活化：〖思索1〗活化是指什么？方法？为何要置于蒸馏水中？〖思索2〗在活化酵母过程中要注意？酵母细胞活化时体积会变大，所用容器要大一些，预防活化液溢出；干酵母需置于蒸馏水中活化，是因为干酵母细胞中自由水含量低、代谢慢第12页二、试验操作——酵母细胞固定化（1）酵母细胞活化：（2）配制CaCl2溶液CaCl2作用？与海藻酸钠反应形成凝胶珠，作为凝固剂。第13页二、试验操作——酵母细胞固定化（1）酵母细胞活化：（2）配制CaCl2溶液：

（3）配制海藻酸钠溶液：是最主要步骤：假如海藻酸钠浓度过高，将极难形成凝胶珠或形成凝胶珠不是圆形或椭圆形；假如浓度过低，形成凝胶珠包埋酵母细胞数目少，颜色过浅呈白色。注意事项：加热时要用小火，或者间断加热（不然？）（海藻酸钠作用？为何浓度要适宜？）作为包埋材料，包埋酵母细胞。第14页二、试验操作——酵母细胞固定化（1）酵母细胞活化：（2）配制CaCl2溶液：（3）配制海藻酸钠溶液：（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：必须将溶化海藻酸钠溶液冷却至室温才能与酵母细胞进行混合。为何？搅拌目标？高温会使酵母细胞死亡。搅拌目标：使海藻酸钠与酵母菌混合均匀。第15页（5）固定化酵母细胞1、将注射器中海藻酸钠与酵母细胞混合液滴到CaCl2溶液中要求？以恒定速度迟缓地滴加。（速度太快轻易形成尾巴。注意高度适宜。注射器太低，凝胶珠易出现尾巴；太高，溶液易溅出。）2、为何刚形成凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30分钟？使凝胶珠形成稳定结构。第16页怎样检验酵母细胞固定是否成功？观察凝胶珠颜色和形状理想凝胶珠应该是：圆形或椭圆形、富有弹性、不易破裂、内部无液体流出、稍带黄色。第17页第18页

检验凝胶珠质量是否合格，能够使用以下方法：一是用镊子夹起一个凝胶珠放在试验桌上用手挤压，假如凝胶珠不轻易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠制作成功。二是在试验桌上用力摔打凝胶珠，假如凝胶珠很轻易弹起，也能表明制备凝胶珠是成功。

小技巧第19页二、固定化酵母细胞发酵1、固定好酵母细胞用什么冲洗？目标是什么？蒸馏水。洗掉凝胶珠表面氯化钙溶液，是预防凝胶珠硬度过大，影响通透性。2、发酵时，温度为何控制在25摄氏度？该温度是酵母细胞发酵适宜温度。3、发酵时，凝胶珠在发酵液位置？在发酵液上方。第20页试验操作—用固定化酵母进行发酵〖思索〗发酵过程中锥形瓶为何要密封？〖思索〗锥形瓶中气泡和酒精是怎样形成？〖思索〗在利用固定化酶或固定化细胞进行工业生产过程中，需要无菌操作吗？酵母菌酒精发酵需要缺氧条件。酵母菌进行无氧呼吸产生。需要。第21页这一阶段成功是否呢？怎样评价？观察发酵葡萄糖溶液；利用固定酵母细胞发酵产生酒精，能够看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。还有其它方法吗？第22页失败原因分析：1、凝胶珠颜色过浅原因？海藻酸钠浓度过低，包埋细胞数量少

2、