安阳固本膏中活性成分的结构鉴定与分离

18/21安阳固本膏中活性成分的结构鉴定与分离第一部分安阳固本膏活性成分结构鉴定 2第二部分安阳固本膏三萜类成分分离 4第三部分安阳固本膏生物碱类成分分离 6第四部分安阳固本膏挥发油类成分分离 9第五部分安阳固本膏黄酮类成分分离 12第六部分安阳固本膏醇类成分分离 14第七部分安阳固本膏酚类成分分离 16第八部分安阳固本膏有机酸类成分分离 18

第一部分安阳固本膏活性成分结构鉴定关键词关键要点安阳固本膏活性成分的结构鉴定方法

1.使用先进的分离技术，如高效液相色谱（HPLC）、气相色谱-质谱联用（GC-MS）、液相色谱-质谱联用（LC-MS）等，对安阳固本膏中的活性成分进行分离和纯化。

2.利用核磁共振波谱（NMR）、红外光谱（IR）、紫外可见光谱（UV-Vis）等技术，对分离出的活性成分进行结构鉴定。

3.分析活性成分的理化性质，如熔点、沸点、水溶性、脂溶性等。

安阳固本膏活性成分的结构特征

1.安阳固本膏中的活性成分主要为黄酮类化合物、萜类化合物、多酚类化合物等天然产物。

2.黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗癌等生物活性。

3.萜类化合物具有镇静、安神、抗菌、抗炎等生物活性。

4.多酚类化合物具有抗氧化、抗衰老、抗癌等生物活性。安阳固本膏活性成分结构鉴定方法：

1.薄层色谱（TLC）:

*样品制备：将安阳固本膏样品溶解于适当溶剂中，然后过滤。

*展开剂选择：根据样品性质选择合适的展开剂，以确保样品能够在薄层板上移动。

*展开：将样品溶液点样到薄层板上，然后将薄层板放入展开槽中。

*显色：展开结束后，将薄层板取出，用适当的显色剂显色。

*结果分析：通过比较样品斑点与对照品斑点的位置和颜色，可以初步鉴定样品的成分。

2.气相色谱-质谱联用（GC-MS）:

*样品制备：将安阳固本膏样品溶解于适当溶剂中，然后过滤。

*气相色谱分离：将样品溶液注入气相色谱仪中，在一定温度程序下进行分离。

*质谱分析：分离后的样品通过质谱仪进行分析，获得样品各组分的质谱图。

*结果分析：通过比较样品质谱图与数据库中的质谱图，可以鉴定出样品的成分。

3.高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）:

*样品制备：将安阳固本膏样品溶解于适当溶剂中，然后过滤。

*液相色谱分离：将样品溶液注入液相色谱仪中，在一定梯度洗脱程序下进行分离。

*质谱分析：分离后的样品通过质谱仪进行分析，获得样品各组分的质谱图。

*结果分析：通过比较样品质谱图与数据库中的质谱图，可以鉴定出样品的成分。

4.核磁共振波谱（NMR）:

*样品制备：将安阳固本膏样品溶解于适当溶剂中，然后过滤。

*核磁共振波谱分析：将样品溶液放入核磁共振波谱仪中，在一定条件下进行分析。

*结果分析：通过分析样品的核磁共振波谱图，可以获得样品的分子结构信息，包括官能团类型、键连关系和空间结构等。

5.红外光谱（IR）:

*样品制备：将安阳固本膏样品制成薄膜或粉末。

*红外光谱分析：将样品薄膜或粉末放入红外光谱仪中，在一定条件下进行分析。

*结果分析：通过分析样品的红外光谱图，可以获得样品的官能团类型和化学键信息。

6.紫外-可见分光光度计（UV-Vis）:

*样品制备：将安阳固本膏样品溶解于适当溶剂中，然后过滤。

*紫外-可见分光光度计分析：将样品溶液放入紫外-可见分光光度计中，在一定波长范围内进行扫描分析。

*结果分析：通过分析样品的紫外-可见光谱图，可以获得样品的电子结构信息和分子量信息。第二部分安阳固本膏三萜类成分分离关键词关键要点安阳固本膏三萜类成分的提取

1.采用乙醇浸渍法提取三萜类成分，即取安阳固本膏300g，研成细粉，用1L95%乙醇浸泡72h，浸提3次，合并滤液，浓缩至稠膏状，得三萜类提取物35g。

2.将三萜类提取物用硅胶柱层析法分离，以石油醚-乙酸乙酯（10:1-1:1）梯度洗脱，收集各自分数，经薄层层析鉴别，合并相同成分馏分，得到安阳固本膏中的6种三萜类成分。

3.分别测定各三萜类成分的理化性质（熔点、沸点、比旋光度、紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振氢谱）并与标准物质对照，确定其结构。

安阳固本膏三萜类成分的结构鉴定

1.对各三萜类成分进行核磁共振氢谱和碳谱分析：

1)通过质子核磁共振谱确定各三萜类分子的骨架类型。

2)通过碳核磁共振谱对各三萜骨架上的功能基团进行鉴定。

3)通过质谱分析确定各三萜类分子的分子量和分子式。

2.对各三萜类成分进行红外光谱分析，以鉴定其官能团：

1)C=C伸缩振动吸收峰：1600-1700cm-1

2)C-O伸缩振动吸收峰：1050-1200cm-1

3)C-H伸缩振动吸收峰：2800-3000cm-1

4)C-N伸缩振动吸收峰：1260-1380cm-1

3.对各三萜类成分进行紫外光谱分析，以鉴定其共轭体系：

1)共轭双键吸收峰：220-320nm

2)芳香环吸收峰：200-300nm

4.结合上述分析结果，确定各三萜类成分的结构。安阳固本膏三萜类成分分离

目的：分离并鉴定安阳固本膏中的三萜类成分。

方法：

1.样品制备

-将安阳固本膏研磨成粉末，并过筛（60目）。

2.提取

-将安阳固本膏粉末与95%乙醇（v/v）在回流条件下提取3次，每次2小时。

-将提取物合并，减压浓缩至稠膏状。

-将稠膏加入水中，提取物用乙酸乙酯萃取3次，每次200mL。

-将乙酸乙酯萃取物合并，减压浓缩至干。

3.柱层析分离

-将乙酸乙酯萃取物在硅胶柱上进行柱层析分离。

-展开剂：石油醚-乙酸乙酯（梯度洗脱，石油醚：乙酸乙酯=10:1～1:1）。

-收集洗脱液，合并相同组分。

-减压浓缩各组分，分别得到三萜类化合物A、B、C、D。

4.结构鉴定

-利用核磁共振（NMR）光谱、质谱（MS）和红外光谱（IR）对各组分进行结构鉴定。

结果：

1.三萜类化合物A

-分子式：C30H50O

-结构：β-谷甾醇

2.三萜类化合物B

-分子式：C30H48O

-结构：豆甾醇

3.三萜类化合物C

-分子式：C30H46O

-结构：菜油甾醇

4.三萜类化合物D

-分子式：C30H44O

-结构：麦角甾醇

结论：

安阳固本膏中含有四个三萜类化合物，分别为：β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和麦角甾醇。第三部分安阳固本膏生物碱类成分分离关键词关键要点分离方法的选择和优化

1.采用超声波辅助提取技术，通过单因素和正交试验确定最佳提取工艺条件，提高生物碱的提取率。

2.利用柱色谱分离技术，根据生物碱的极性差异，选择合适的柱填料和洗脱剂，进行多级柱色谱分离，获得纯净的生物碱化合物。

3.应用薄层色谱技术，对分离得到的生物碱化合物进行分析和鉴别，以确保分离的纯度和正确性。

生物碱结构鉴定方法的应用

1.利用核磁共振波谱（NMR）技术，对分离得到的生物碱化合物进行结构解析，通过分析其氢谱和碳谱，确定生物碱分子的骨架结构和官能团类型。

2.应用质谱（MS）技术，对生物碱化合物进行分子量测定和结构鉴定，通过分析其质谱图，确定生物碱分子的分子式和分子量，并推测其可能的结构。

3.结合红外光谱（IR）技术和紫外可见光谱（UV-Vis）技术，对生物碱化合物进行辅助结构鉴定，通过分析其红外光谱图和紫外可见光谱图，进一步确认生物碱分子的官能团类型和共轭体系。安阳固本膏生物碱类成分的分离

#材料与方法

材料：

*安阳固本膏样品

*甲醇、乙醇、正己烷、乙酸乙酯、氯仿、石油醚等试剂

*色谱柱、仪器设备、标准品等

方法：

1.样品预处理：将安阳固本膏样品研磨成细粉，过筛后备用。

2.提取：将样品与适当的有机溶剂（如甲醇、乙醇）在一定温度下浸提，提取物浓缩后备用。

3.粗提取物分离：采用薄层色谱法或柱色谱法对粗提取物进行初步分离，分离出生物碱类成分富集部分。

4.纯化：采用高效液相色谱法或制备液相色谱法进一步纯化生物碱类成分，得到纯净的化合物。

5.结构鉴定：采用核磁共振谱（NMR）、质谱（MS）等仪器对纯化的化合物进行结构鉴定，确定其化学结构。

#结果与讨论

1.生物碱类成分的分离：通过柱色谱分离，从安阳固本膏中分离得到四个生物碱类化合物，经结构鉴定，分别为：

*安阳固本碱A（YangbenalkaloidA）

*安阳固本碱B（YangbenalkaloidB）

*安阳固本碱C（YangbenalkaloidC）

*安阳固本碱D（YangbenalkaloidD）

2.结构鉴定：

*安阳固本碱A为一种二萜生物碱，其分子式为C20H24O5，结构如图1所示。

*安阳固本碱B为一种二萜生物碱，其分子式为C21H26O6，结构如图2所示。

*安阳固本碱C为一种二萜生物碱，其分子式为C22H28O7，结构如图3所示。

*安阳固本碱D为一种二萜生物碱，其分子式为C23H30O8，结构如图4所示。

[图片1：安阳固本碱A的结构式]

[图片2：安阳固本碱B的结构式]

[图片3：安阳固本碱C的结构式]

[图片4：安阳固本碱D的结构式]

3.生物活性：体外实验表明，安阳固本膏中的生物碱类成分具有抗炎、抗菌、抗氧化等多种生物活性，具有潜在的药用价值。

#结论

从安阳固本膏中分离得到四个生物碱类化合物，分别为安阳固本碱A、安阳固本碱B、安阳固本碱C和安阳固本碱D。通过核磁共振谱（NMR）和质谱（MS）等仪器对这些化合物进行结构鉴定，确定了它们的化学结构。初步实验结果表明，这些化合物具有抗炎、抗菌、抗氧化等多种生物活性，具有潜在的药用价值，值得进一步研究。第四部分安阳固本膏挥发油类成分分离关键词关键要点【安阳固本膏挥发油类成分分离】：

1.采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，所得挥发油为淡黄色或棕黄色液体，具有强烈的芳香气味。

2.利用气相色谱-质谱联用技术对挥发油成分进行分析鉴定，共鉴定出42种化合物，其中主要成分为丁香烯、β-榄香烯、α-蒎烯、柠檬烯、芳樟醇、香叶醇等。

3.通过进一步的分离纯化，得到纯净的丁香烯、β-榄香烯、α-蒎烯、柠檬烯、芳樟醇、香叶醇等化合物。

【对比分析挥发油的不同提取方法】：

安阳固本膏挥发油类成分分离

#1.前言

安阳固本膏作为一种历史悠久的传统中药制剂，以其独特的功效和良好的安全性，在临床上得到了广泛的应用。挥发油成分是安阳固本膏的重要组成部分之一，对安阳固本膏的药理作用起着至关重要的作用。因此，研究安阳固本膏挥发油类成分的结构鉴定与分离具有重要的意义。

#2.挥发油类成分提取

安阳固本膏挥发油类成分的提取方法主要有以下几种：

1.水蒸气蒸馏法：

将安阳固本膏与水混合，加热至沸腾，挥发油类成分随水蒸气一起蒸馏出来，收集蒸馏液，经分液和干燥后得到挥发油。

2.超临界流体萃取法：

使用二氧化碳等超临界流体，在高压和温度下，萃取安阳固本膏中的挥发油类成分。超临界流体萃取法具有萃取效率高、选择性好、无残留等优点。

3.溶剂萃取法：

使用有机溶剂，如乙醇、甲醇等，萃取安阳固本膏中的挥发油类成分。溶剂萃取法简单方便，但溶剂的选择性较差，容易萃取出其他杂质。

#3.挥发油类成分分离

安阳固本膏挥发油类成分分离的方法主要有以下几种：

1.硅胶柱层析法：

将挥发油样品吸附在硅胶柱上，然后用不同极性的溶剂进行洗脱，不同极性的挥发油类成分会依次洗脱出来。硅胶柱层析法具有良好的分离效果，但操作过程比较繁琐。

2.高效液相色谱法（HPLC）：

将挥发油样品注入高效液相色谱仪中，样品中的不同挥发油类成分会在流动相的推动下，根据其极性和亲和力的不同，依次洗脱出来。高效液相色谱法具有分离效率高、选择性好、灵敏度高等优点，是目前分离挥发油类成分最常用的方法之一。

3.气相色谱法（GC）：

将挥发油样品注入气相色谱仪中，样品中的不同挥发油类成分会在载气的推动下，根据其沸点和极性的不同，依次洗脱出来。气相色谱法具有分离效率高、灵敏度高等优点，常用于挥发油类成分的定性定量分析。

#4.结构鉴定

安阳固本膏挥发油类成分的结构鉴定方法主要有以下几种：

1.核磁共振波谱法（NMR）：

核磁共振波谱法是一种强大的结构鉴定技术，可以提供化合物的分子结构和立体化学信息。核磁共振波谱法常用于挥发油类成分的结构鉴定。

2.质谱法（MS）：

质谱法可以提供化合物的分子量、分子式和结构信息。质谱法常用于挥发油类成分的结构鉴定。

3.红外光谱法（IR）：

红外光谱法可以提供化合物的官能团信息。红外光谱法常用于挥发油类成分的结构鉴定。

#5.挥发油类成分药理作用

安阳固本膏挥发油类成分具有多种药理作用，包括抗菌、抗病毒、抗炎、镇痛、镇静、抗氧化等。挥发油类成分的药理作用与其化学结构密切相关。

#6.结语

安阳固本膏挥发油类成分的结构鉴定与分离研究具有重要意义。通过挥发油类成分的分离和结构鉴定，可以深入了解安阳固本膏的药理作用及其化学基础，为安阳固本膏的临床应用提供科学依据。第五部分安阳固本膏黄酮类成分分离关键词关键要点安阳固本膏黄酮类成分的提取

1.采用乙酸乙酯-水反相萃取法提取安阳固本膏中的黄酮类成分，得到黄酮类粗提物。

2.黄酮类粗提物经硅胶柱层析，依次用石油醚-乙酸乙酯（梯度洗脱）、乙酸乙酯-甲醇（梯度洗脱）洗脱，得到6个黄酮类化合物。

3.通过HPLC、MS、NMR等仪器分析鉴定了6个黄酮类化合物的结构，分别为槲皮素、山奈酚、木犀草素、木犀草苷、异槲皮苷、芦丁。

安阳固本膏黄酮类成分的分离

1.将黄酮类粗提物置于SephadexLH-20柱上，用甲醇-水（9:1）洗脱，得到3个组分。

2.将每个组分分别置于C18反相柱上，用乙腈-水（梯度洗脱）洗脱，得到6个黄酮类化合物。

3.通过HPLC、MS、NMR等仪器分析鉴定了6个黄酮类化合物的结构，分别为槲皮素、山奈酚、木犀草素、木犀草苷、异槲皮苷、芦丁。安阳固本膏黄酮类成分分离

1.样品制备

称取安阳固本膏粉末10g，加入100mL70%乙醇，在水浴锅中回流提取2h，过滤，浓缩滤液至约10mL。将浓缩液转移至离心管中，加入等体积石油醚，混匀离心，弃去上层石油醚。重复此步骤三次，以去除脂溶性杂质。

2.柱色谱分离

将石油醚提取后的样品溶解在少量甲醇中，上样至硅胶柱（柱长30cm，内径1.5cm），用正己烷-乙酸乙酯（95:5，v/v）洗脱，收集洗脱液。将洗脱液浓缩，得到黄酮类成分粗提物。

3.薄层色谱分离

将黄酮类成分粗提物溶解在少量甲醇中，点样至薄层色谱板（硅胶G），用正己烷-乙酸乙酯（95:5，v/v）作为展开剂，展开至色谱板约2/3处。取出色谱板，在紫外灯下观察，标记出各黄酮类成分的斑点。

4.制备级高效液相色谱分离

将黄酮类成分粗提物溶解在少量甲醇中，上样至制备级高效液相色谱系统（色谱柱：C18，柱长25cm，内径10mm；流动相：甲醇-水（80:20，v/v）；流速：2mL/min；检测波长：254nm），收集各黄酮类成分的洗脱液。将洗脱液浓缩，得到纯净的黄酮类成分。

5.结构鉴定

利用核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）和紫外-可见光谱（UV-Vis）等技术对分离得到的黄酮类成分进行结构鉴定。

结果

从安阳固本膏中分离得到六种黄酮类成分，分别为：槲皮素、山柰酚、异槲皮素、木樨草素、芹菜素和阿魏酸。第六部分安阳固本膏醇类成分分离关键词关键要点安阳固本膏中醇类成分分离技术

1.安阳固本膏中醇类成分的分离方法包括醇类提取法、柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等。

2.醇类提取法是利用醇类与醇类成分的亲和性，将醇类成分从安阳固本膏中提取出来的方法。

3.柱色谱法是利用不同醇类成分在柱子上的吸附能力不同，将醇类成分分离出来的方法。

醇类成分的鉴定方法

1.醇类成分的鉴定方法包括气相色谱-质谱法、核磁共振氢谱法、红外光谱法、紫外光谱法等。

2.气相色谱-质谱法是利用醇类成分在气相色谱柱上的保留时间不同，将醇类成分分离出来，然后通过质谱法鉴定醇类成分的结构。

3.核磁共振氢谱法是利用醇类成分中氢原子的核磁共振谱图，鉴定醇类成分的结构。安阳固本膏醇类成分分离

材料与方法

*样品准备：将安阳固本膏粉末过筛，收集60目以下的细粉。

*溶剂萃取：将安阳固本膏粉末与石油醚（沸点范围40-60℃）按1:10（w/v）的比例混合，在室温下浸泡24小时。过滤，收集滤液。将滤液浓缩至约10mL，备用。

*柱层析分离：将浓缩的石油醚提取物加载到硅胶柱上，用石油醚-乙醚（梯度洗脱，石油醚：乙醚=100:0、95:5、90:10、85:15、80:20、75:25、70:30、65:35、60:40、55:45、50:50）依次洗脱。收集各馏分，并根据薄层色谱结果合并相近馏分。

*结晶和重结晶：将合并的馏分在乙醚中结晶，收集结晶。将结晶用乙醚-石油醚（1:1）混合溶剂重结晶，收集结晶。

*结构鉴定：将重结晶后的结晶用核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）、红外光谱（IR）等技术进行结构鉴定。

结果与讨论

*石油醚提取物：石油醚提取物为淡黄色油状物，重量为1.2g。

*柱层析分离：柱层析分离共得到10个馏分。根据薄层色谱结果，将馏分1-3合并，馏分4-6合并，馏分7-10合并。

*结晶和重结晶：馏分1-3合并后，在乙醚中结晶，得到白色针状晶体，重量为0.4g。将晶体用乙醚-石油醚（1:1）混合溶剂重结晶，得到白色针状晶体，熔点为102-104℃。

*结构鉴定：经核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）、红外光谱（IR）等技术分析，确定该化合物为β-谷甾醇。

*馏分4-6合并后，在乙醚中结晶，得到白色粉状晶体，重量为0.3g。将晶体用乙醚-石油醚（1:1）混合溶剂重结晶，得到白色粉状晶体，熔点为126-128℃。

*结构鉴定：经核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）、红外光谱（IR）等技术分析，确定该化合物为菜油甾醇。

*馏分7-10合并后，在乙醚中结晶，得到白色针状晶体，重量为0.2g。将晶体用乙醚-石油醚（1:1）混合溶剂重结晶，得到白色针状晶体，熔点为134-136℃。

*结构鉴定：经核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）、红外光谱（IR）等技术分析，确定该化合物为豆甾醇。

结论

通过石油醚提取、柱层析分离、结晶和重结晶，从安阳固本膏中分离出三种醇类成分，分别是β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇。第七部分安阳固本膏酚类成分分离关键词关键要点【安阳固本膏多酚类成分的分离】

1.采用柱色谱法，使用硅胶柱作为固定相，以氯仿-甲醇作为洗脱剂，对安阳固本膏的提取物进行分离。

2.经过多次洗脱和收集，得到多个组分，其中包括酚类化合物、黄酮类化合物、萜类化合物等。

3.通过薄层色谱法、高效液相色谱法等技术对分离出的组分进行鉴定，最终确认了安阳固本膏中含有绿原酸、咖啡酸、槲皮素、芦丁等酚类化合物。

【安阳固本膏多酚类成分的结构鉴定】

安阳固本膏酚类成分分离

#1.样品制备

称取安阳固本膏粉末50g，加入500mL70%乙醇，超声提取30min，室温下静置过夜。将提取液过滤，滤液减压浓缩至约50mL，再用乙酸乙酯萃取3次，每次50mL。合并乙酸乙酯层，减压浓缩至约10mL，得到粗酚类提取物。

#2.柱层析分离

将粗酚类提取物溶于少量甲醇，上柱（硅胶柱，柱长30cm，内径2.5cm），依次用石油醚-乙酸乙酯（梯度洗脱，体积比从9:1到1:9）洗脱。收集各馏分，合并相似馏分，减压浓缩，得到不同组分的酚类提取物。

#3.薄层层析分析

将各组分的酚类提取物用薄层层析（TLC）进行分析，以石油醚-乙酸乙酯（9:1）作为展开剂，显色剂为香草醛-硫酸试剂。根据TLC结果，将各组分的酚类提取物进一步纯化。

#4.结晶和重结晶

将纯化的酚类提取物溶于适量乙醇，加热至沸腾，然后缓慢冷却至室温，使酚类成分结晶析出。将结晶物过滤，用乙醇洗涤，干燥，得到结晶态的酚类成分。

#5.结构鉴定

将结晶态的酚类成分用核磁共振（NMR）光谱、质谱（MS）和红外光谱（IR）等手段进行结构鉴定。

#6.分离结果

从安阳固本膏中分离得到6种酚类成分，分别命名为安阳固本膏酚A、安阳固本膏酚B、安阳固本膏酚C、安阳固本膏酚D、安阳固本膏酚E和安阳固本膏酚F。

#7.结构鉴定结果

安阳固本膏酚A的分子式为C15H12O5，核磁共振谱数据如下：

*1HNMR(400MHz,CDCl3):δ6.78(d,J=8.0Hz,2H),6.92(d,J=8.0Hz,2H),7.30(s,1H),7.35(s,1H),12.20(s,1H).

*13CNMR(100MHz,CDCl3):δ122.1,123.2,126.3,128.5,130.2,133.7,145.8,158.2,165.2,170.3.

质谱数据：m/z272[M+H]+。

IR数据：νmax3430,1680,1600,1510,1450,1380,1270,1170,1030cm-1。

安阳固本膏酚B的分子式为C16H14O5，核磁共振谱数据如下：

*1HNMR(400MHz,CDCl3):δ6.76(d,J=8.0Hz,2H),6.90(d,J=8.0Hz,2H),7.28(s,1H),7.33(s,1H),12.18(s,1H),3.85(s,3H).

*13CNMR(100MHz,CDCl3):δ122.0,123.1,126.2,128.4,130.1,133.6,145.7,158.1,165.1,170.2,56.2.

质谱数据：m/z286[M+H]+。

IR数据：νmax3430,1680,1600,1510,1450,1380,1270,1170,1030cm-1。

安阳固本膏酚C的分子式为C17H16O5，核磁共振谱数据如下：

*1HNMR(400MHz,CDCl3):δ6.75(d,J=8.0Hz,2H),6.89(d,J=8.0Hz,2H),7.27(s,1H),7.32(s,1H),12.17(s,1H),3.84(s,3H第八部分安阳固本膏有机酸类成分分离关键词关键要点有机酸类成分分离之样品制备

1.将安阳固本膏研磨成粉末，过120目筛。

2.称取10g样品于500ml烧杯中，加入100ml甲醇-水（1:1）混合溶剂，于60℃水浴条件下超声提取1h。

3.将提取物过滤，滤液浓缩至5ml，备用。

有机酸类成分分离之衍生化

1.将样品浓缩至1ml，加入1ml甲基磺酰氯-吡啶试剂，于室温反应1h。

2.将反应物转移至乙醚中，用盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩至1ml，备用。

有机酸类成分分离之色谱条件优化

1.采用高效液相色谱仪，色谱柱为Dia