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文档简介
ICS65.020.01
B04
中华人民共和国国家标准
GB/TXXXXX—201X
植物品种鉴定MNP标记法
Protocolforidentificationofplantvarieties——MNPmarkermethod
(征求意见稿)
201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施
国家市场监督管理总局
中国国家标准化管理委员会发布
1
1
植物品种鉴定MNP标记法
1范围
本标准规定了植物品种鉴定多核苷酸多态性(MNP)标记法的原理、试剂或材料、仪
器设备、测定步骤、结果分析。
本标准适用于水稻、玉米、大豆、棉花、花生、谷子、西瓜、甜瓜、黄瓜、艾草、番茄、
辣椒、白菜、龙眼、荔枝、猕猴桃的原始品种鉴定、实质性派生品种鉴定和品种真实性鉴定。
其他植物品种鉴定可参考此标准。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本
适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改版)适用于本文件。
GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样
GB/T6882分析实验室用水规格和试验方法
NY/T2594植物品种鉴定DNA分子标记法
3术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
多核苷酸多态性multiplenucleotidepolymorphism,MNP
在基因组水平上由多个核苷酸引起的序列多态性。
3.2
实质性派生品种essentialderivedvariety,EDV
由原始品种派生或者由原始品种的实质性派生品种再次派生,且保留了原始品种的基因
型或基因型组合产生的基本特性,但与原始品种存在明显差别的品种。
3.3
变异度degreeofvariance
异型株(非典型植物)占总观测植株的百分率。
3.4
平均覆盖倍数averagecoverage
比对到标记位点上的测序片段数目与标记位点数目的比值。
3.5
检出的标记位点detectedmarkers
至少有一个等位基因型有20条及以上测序片段支持的标记位点。
2
4原理
利用多重PCR和二代高通量测序扩增并检测样品基因组上的MNP标记位点,分析测
序数据,获得标记位点的分型结果和鉴定结论。
5试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
5.1水:GB/T6682一级。
5.2多重PCR扩增与文库构建试剂盒。
5.3高通量测序试剂盒。
5.4MNP标记引物:见附录A。
6仪器设备
6.1样品粉碎仪或研磨机。
6.2恒温孵育器或水浴锅。
6.3涡旋振荡器。
6.4PCR扩增仪。
6.5离心机。
6.6电泳仪。
6.7凝胶成像仪。
6.8超微量分光光度计,最小样品进样量为1μL。
6.9实时定量PCR仪。
6.10微量移液器,2μL、10μL、20μL、100μL、200μL和1000μL。
6.11高通量测序仪。
7测定步骤
7.1操作要求
样品准备、DNA提取、多重PCR扩增与文库构建、高通量测序在规定的区域按单一方
向进行操作且保持实验室通风良好。不同区域的仪器设备应专用。
7.2取样
7.2.1样品应为从变异度不高于5%的植物品种群体中抽取的个体样本混合物。
7.2.2从植物品种群体中抽取的个体的数量宜满足NY/T2594要求。
7.2.3样品中个体的类型宜为幼嫩且新鲜的叶、根、茎、胚等器官或组织,也可为种子。
3
7.2.4应注意从植物品种群体抽样的代表性。农作物种子扦样应符合GB/T3543.2要求。
7.3DNA提取
提取与纯化的DNA溶液在260nm与230nm处的吸光度值的比值大于2.0;在260nm与280
nm处的吸光度值的比值介于1.7与1.9之间;DNA电泳主带明显,无明显降解和RNA残留。
7.4多重PCR扩增与文库构建
按多重PCR扩增与文库构建试剂盒的说明书进行DNA质控、多重PCR扩增、文库构建与
纯化。其中,多重PCR的扩增循环数不高于20个。
7.5高通量测序
按高通量测序试剂盒和高通量测序仪的操作说明进行高通量测序。
高通量测序的平均覆盖倍数设置为700倍以上,测序长度大于标记引物在参考基因组上
的扩增长度。
7.6测序数据质量控制
利用品种鉴定软件将样品的测序数据比对到参考基因组的标记位点上,统计第一次检
测的标记位点的平均覆盖倍数C1。
当C1<500时,判定样品的测序数据量不足,从7.5或之前的步骤开始重新实验至第一
次检测的标记位点的平均覆盖倍数C1≥500。
当C1≥500时,进一步计算检出的标记位点的比例,其中,和T分别为样品的
�1
检出的标记位点的数目和检测的标记位点的数目。�1=��1
当R1≥95%时,判定测序数据合格。
当R1<95%时,判定文库构建可能失败,从7.3或之前的步骤开始重新实验至第二次检
测的标记位点的平均覆盖倍数C2≥500。
当C2≥500时,进一步计算第一次和第二次共同的检出的标记位点的比例,
2�12
其中,为第一次和第二次共同检出的标记位点的数目,和为第一次和第�二2=次�分1+别�2检
出的标记位点的数目。
�12�1�2
当R2≥95%时,判定测序数据合格。
8结果分析
8.1结果计算
遗传相似度按式(1)计算
……………(1)
n𝑖
�𝑖
式�中�=:×100%
——待测品种与对照品种的遗传相似度(%);
——待测品种与对照品种中均检出的但基因型无差异的标记位点的数目;
𝐺
——待测品种与对照品种中均检出的标记位点的数目。
�ij
8.2结果判定
�ij
8.2.1原始品种的鉴定
当对照品种为在待测品种植物新品种权申请日前的已知品种时,判定待测品种是否为
4
原始品种。
当待测品种与所有对照品种间的遗传相似度均小于a时,判定待测品种为原始品种。
其中,a为待测品种所在植物的实质性派生品𝐺种的判定阈值。
8.2.2实质性派生品种的鉴定
当对照品种为原始品种时,判定待测品种是否为对照品种的实质性派生品种。
当<时,判定待测品种不是对照品种的实质性派生品种;
当�G�S≥�a时,判定待测品种是对照品种的实质性派生品种。
其中,a为待测品种所在植物的实质性派生品种的判定阈值。
8.2.3品种真实性鉴定
8.2.3.1水稻、玉米、大豆、棉花、花生、谷子、西瓜、甜瓜、黄瓜、番茄、辣椒、白菜、猕
猴桃
当时,判定待测品种与对照品种为“不同品种”;
当时,判定待测品种与对照品种为“近似品种”;
GS<96%
当时,判定待测品种与对照品种为“极近似品种或相同品种”。
96%≤GS<99%
8.2.3.2G艾S草≥、99龙%眼、荔枝
当时,判定待测品种与对照品种为“不同品种”;
当,判定待测品种与对照品种为“近似品种”;
GS<91%
当时,判定待测品种与对照品种为“极近似品种或相同品种”。
91%≤GS<99%
8.2.3.3G对S“≥近99似%品种”或“极近似品种或相同品种”的样品,可按相关国家标准或行业标
准进一步进行田间种植鉴定。
5
附录A
(规范性附录)
MNP标记引物
A.1水稻MNP标记引物。
表A.1水稻MNP标记引物
位点
染色体正向引物反向引物
编号
CATCGGAGTTTGTGAAAATAGAGAGTATCAATTTTGAGCATGTAG
1chr1
GAATAACCCTAGACT
AATATGTTCTCTCTGTTTCACAAGGGATCATGAGGTCGATCATGT
2chr1
TCTTGGATG
AAAAACTCCAATCTTGTCAAAGTGTTCTCCTGGTCTTTACTAACC
3chr1
CGATG
TTTTCCCGGTTTTATTTTTCTATA
4chr1TTCATGCTAACCACGTGCACTA
GGGACA
CCAGTGTGAGAGGCGAAAATAC
5chr1GGCTTTCTCCCATGCTTATACCT
C
TATAAGTTGAGGTGTTGTTGAGTACTAAACGGAATCTTTTTAATAG
6chr1
GCACTCACCA
TTCTTATGGCATCACGATTTAGAACAACTGAATGAGACTTATGCT
7chr1
GGTAACACCAAG
ACTCCAGTAAAAGCATCAAAACTGACCATGACAGAGGTGAATAA
8chr1
CTGGAG
ATGAGGTTAATAATCTGGACATGGAGGTAGTAGTAAGCAATCCC
9chr1
GGCAAATTG
GTACGTTTATGTGCCATTTGTTTAAAATTTCAGGCCTCTTCCCTTT
10chr1
GGTT
GTGGTTTCGTTGATCACCAAAGT
11chr1GCGCTTGAGACAGTGGAGATTC
G
GCTAGGTTTTCGACGGTGAGGTT
12chr1AATTGCCATTGCTCTTCGCTT
A
GCCTTCAAGGGAGGGAAAGCTAGTACTGATTTTCATAGAGCACAC
13chr1
CTTTTGTG
CATGCAAGGATAAAGTGAGGCAAGATACAGTGCATGCATCAGCT
14chr1
GTAT
TACTACTGTTGAGGCATCCTATCGCTAAGGAGTTGGAATCAATGG
15chr1
ATTATGACT
GAGGGAGAGGGAGAAGAGAAA
16chr1ATAGCGAGATTGGAGAGGGAAC
AAG
TCATGATCACTTGGCAACAATAGAACATGAATGTGCATGCGAAG
17chr1
GCTA
6
TGTTGGCCTACATCATGATGCTACATGTCGAACTTGAACCCCAAT
18chr1
TAG
CAGTGTGCTATAACGTATGCACGGGATAGCCTACAAGCAGTACC
19chr1
AGTAT
20chr1CGCCTCCTCCTACACCTACTGTTCGTCGTCGTAGAGGAGATCGAA
GATGTATGGTCAAACGTATCTCACAAACTGTGTGCAGTCGCAATA
21chr1
GAAAAG
GCCAGACACGTCAGAGATTCAA
22chr1CCGTGGAACTGGGACAACAATT
C
CGACCGACAAATTAATCTATCC
23chr1TCACTGTCTTGTGGTTGCAGTTT
ACGA
CGATCGATGAGCACTTGCAAAGTGGAGTTGGAGAGACGTATATA
24chr1
TTGAGAAGTA
TCAGGTATGCACCCATTACGAAGCAAGCATATCACATTTGGAAC
25chr1
GAAT
CGCTTCTCTTAGGATCAATTAGA
26chr1TCAGACACGCTGCATCAATGTA
TAGAGGT
TTTCAAGGTATCATGGTACTACGGGCTAAAGGTCAACTGTGATGT
27chr1
ATGTAGTGTAG
28chr1GGGACTTTGGGAGTTTTGGGATCATCCTGGTTCTCTCGACCAA
29chr1GCTTGCTGAGCTGTTGTTTCATGCGTTCCAGGAGCACTAAGATG
AATCCATTAGCTGGGCTCTAGGTTCTCGTAGTTTGTACAGGCGGAA
30chr1
TT
TGCAATATATAGTTGCACTCACT
31chr1TCGAGGAAGGAGGGAGGAGTT
CCTCA
CCCACAAACCCTAGGAATTTTGT
32chr1CCCAAACTCCACCTCCTCTGAGT
TT
ACAGGAAATATGTGTTCAATGATTAGCAAAATAGTAAGGACACT
33chr1
TTGCACTGGTCA
GACTTTTGATCTCTTCAGGCATT
34chr1CGTAAGCCCGTAACAACCGTAA
CA
CACTACTGCGGTTCTAAAGGATGAACGAATTAGGTATATTATTGT
35chr1
ATTCGGGCCTT
ACACGGGGATGATAAGGTTTAACCACATCCTCTCAAACAATCACA
36chr1
TCTAA
GGGACATGTTCTACCTCATGATC
37chr1CAGTGGGAAGCCACATAAACCA
ATG
AACTCAACCCTTTGATGCAATCTTGATTAAAATAGGAATTCAAAT
38chr1
GTGGTGCA
TGGATTAGCTTGATTTGAACAAA
39chr1CGACGGCTGATCTTGAGGATTT
TGC
AACGAAAATGTGCATCTGTTTAGCTAAAATGAGGAATGAGGCCA
40chr1
GTTTCTTAGA
7
CCATTCATATTGGTTCTACATGGTTAAGTTACCTGACGGTCATTTC
41chr1
TACATGATTAAG
AACCCGTCAACATTTAACTTCATACTAAGTTCTAACTGGTAAGCA
42chr1
CCCGA
CTAGTGTTATCAAAGATATACTGAGACTCGGCTACAGTAGGAATA
43chr1
CTGCTTG
GGTTTAAAAGATTTGTCGCGCAACTCCAAACTGTACTGTATAAGC
44chr1
ATTCT
AATTTGGTTGTACTGCGTTCTGC
45chr1CATAATCACGCCGTGAGAGAGA
TA
TGAGGATGAACCCAATACTGAATGAAGAATTTTAATTGGCTTTTG
46chr1
AAAGTC
GGATTCAAGTCATGGCAGATTGCAAAACTCAAGACTGAGCAATT
47chr1
ACG
GGGACTAAACTGGACTTAGGCGATAGCCTATTCGGTTTGATCAAT
48chr1
AATGT
TCTCCACTGTAAGGTGTTCAATGTGTTTTTCCTGTACGTTCTGACA
49chr1
TAAG
CCGTTCCTAGGCAGATCTTTTATTTCTGGTGTTTGGTGTGTGTTTTT
50chr1
CTA
TGCTTCTTCATTTGTTCAATCTTGCAAACATAAGACAGATGAGCGC
51chr1
TTAG
ATACCTGGGATTAAGTGATCAACTAATCCCCTCACCCTGATTATC
52chr1
GCCAC
TGTCAATGTCAGGTCGGGTACATTATTACTGCTGCCTTCTAATCTC
53chr1
ACATAGA
TGGAGCAAATAATCAATTTCAATGTTAGGCTGTAGTAATTCACAT
54chr1
AGTTCAGCGATGTG
ATCCTCAATGACCACTAGTCAA
55chr1TCATGCTCATGCATGTGCACT
GACTC
TGGACCACGATATGTGTAAATC
56chr1TCACCATGTTGGCCAAAACTG
ATG
AGGTGTACAATGGGACGAGATTGATTTTATTTAGGACCACCAACT
57chr1
AAAGGCTATT
TTATTCCTGGTCTCATGTGTTCTTCACTGAGTAGAAGGCAACTACA
58chr1
GAAGAGGTAG
TTCGGTTTATAACATACTAAGTC
59chr1CGTGTAGTCCCTCTCTGAAACG
GTGCAT
GTATACGCTACGTAGAACAAAATCGATTCAAAGTACCCTGCCAA
60chr1
CCGAA
CCAAACAAATCCTATGCCTAAAGTTCGTCATTGCCTTAATTTCTTT
61chr1
CTCGTCCT
GCAGATTTACAATACAGATGGGCCTCTAACTATTGAAAGTGGTCC
62chr1
GTGCT
8
AGATTGATCTGGACAAAATGGCGCTATTTACGCCAAGTTTAGTTC
63chr1
TAATTAGTCAAAA
TTTTTGAAGATACACGAGCCATATTAGCAGTGACTAAACATTTTTC
64chr1
GAACACA
ACTAAACAAGCCCACAGTCGTACAATGAGTACGATGGTGTAATT
65chr1
ATGAGATTCA
TGAAAAGTGCACACTTCCACATAGGCTCCACTTCATGTTGTTTAA
66chr1
GATC
TGCAAAACGAAGAAAATTCTCT
67chr1AGCTTCGTGCTCCAGCTCAT
CAC
GCATCCATACATCAAGAAACCGAAAAAGACCAGTCAAATGATGC
68chr1
AATCAA
TGTTAAAATGAAGGGACAATGGTCCCAAAATACGTAAAATAAGC
69chr1
ACGGAAA
ACAGTTTATGCGTCCTTGCACAT
70chr1CCCACACAACTACGACTGTGTT
A
CAGCCTCTCCATCCACTCTCTCT
71chr1CCACGAGCTCCATATCCAGTTG
AC
72chr1GCAAGCAATCAAACACCTGCATCGTTTGGAGGTGCCATTTCCT
TATATATTGGGCTTTGCTCGGTGGGCCTATCTGTTGATCCTACGAT
73chr1
ATAG
CAAGTATTTCTGGTATGTATCTGCAACAACCATGCATGCAATGGA
74chr1
GACAAGAT
AATCCTTCTTTATCTCCTCCTCGT
75chr1ACGCCATCCATCCGATCAT
GTA
GTCTTAAATTAGGCAGCCGTAC
76chr1CTGGTGTTTAGTGTGGCTTCAAG
GAT
GGATCCCTTAACTTACAATACCG
77chr1GTCGCTCGTTTGCACTTGAG
GTT
CTTAATTTCATCCTTGGGCTTATGCACATACACATCACTGTACAC
78chr1
ACTCAGAGT
GACAAGGTGGCCTATAAATAAGCCTCTCACAAACCATGGTATGCA
79chr1
CAGAT
TCTAGCTCGGCGAATTAAGAAT
80chr1GGCTCCTATTTGCCGCTGATTA
ACAAG
GCATAAGGGAAGCCTTCATCTTTAAATCAGCATAGAAAACTGGCC
81chr1
ACAAA
82chr1GTCAGGTGCACCATCCTCACTGGAAGAACCTGCGAACGTC
AGAAATTCAGGAAGATGGCATTCTACGGTAGTTGCAATGTCCTAA
83chr1
TGGAA
GGATGGAGAGAGCATGATGAAA
84chr1GCAGATTTGCTGCTGCTACAGTT
AA
85chr1CGTCTTTTCGTTGTCGTATTGAGGCTAGGCACAATAATTCCCTCG
9
GAT
GATTATTCGGTCACTTGTTAAGGGTTTTTCTTCTACTGCCACATAA
86chr1
GAGTGCATC
TCTACTCAGGACTTTTACCATTTATACCATCGGACGTCCTATTTGT
87chr1
GTTAG
GAATGGGTAAATTGGAATCATGGACATTACGACGAGTAATGAAC
88chr1
CCAAGGTAAA
ATGATACGAGTAAATATTATTA
89chr1GACAACAGAAATTGCCGGTGT
GGCCGTGTTTT
GAGGGAGTAGTATGGTTGTTTTGCTCTTGCTAGGAGTACGTGTGAT
90chr1
TGTTAGGTC
CCATATGGCCATCTATAGTCACTTCCCATCAAGAAAGGGTACAAT
91chr1
TTGCAT
GCAAGTTGTCCAGGGCAAAATATGGAAGTGAAGGAAAAACAGGA
92chr1
TATAGATA
TTCCAGTTTCTCCCTTTTTAAACTTGAAGTGTGTTGTTTCTGTGTGA
93chr1
CAAACTA
94chr1ATATGCCGCTTGCTTGACTCTGCATGATGCTCAGCATCCCTT
TCTAGAAAACTCAATACGGAGTAAAGGTGTTCTAAATTTTGTTTA
95chr1
ATTGCCAAGAGCTACA
TTCATTAACACGCGCATTACACTTCGTTCGTAACTTAGCTAGGCAA
96chr1
TATA
TGCAACGTAGTCCCACATACCAGCACTTGGAGAACGGTAGTGGT
97chr1
AATT
CCAATTTATACACACACTACGTCAAATTCTAGATGCACTCACAGC
98chr1
TTGGAATTACT
99chr1GGTCACGCCTTCTCCACTTGCGAAGACTCACCACCATGAGT
CGTATTGTTTAGTAGTTTAGAAACAGTATTATATTCGCGTTCCTGG
100chr1
ATGTGCCGGATT
GGATTTGACATTGCCTTGTACTAGCATATCATTTTCAGAGCTTACA
101chr1
ACACTTACAAAGT
TGTTTCCATTAATTAGTAGCCCTTCATTTAGATTTTCGTTAGCAGC
102chr1
CCACC
GTCTTATAACCTGAAACGGAGGGAATTATGACGACTCTCTCCAAG
103chr1
GAAGA
GACTATTCATCTTTCTGAAAAAT
104chr1CGCCACTACCTCGCTTGT
GTTTTCACAA
TTGCGGTGCAATTAAATAAGTG
105chr1CTCCCTCTTTCTGCCTTCCTATG
C
CGACGCTCGGGTTTAAAAATATTCCACATCCAGAAGTTAATCGTC
106chr1
GTATT
107chr1GCTCGGCAACGACTACGTACTTATGTTGCGTGCGAAGACA
108chr1TCATCTAGTCTGAATCCAGTTCCAACTTCTTGTTACTGAGGCTTCT
10
ACTAGATCTA
CACATGGATTCACCTCTGTTATG
109chr1GATCGGTGTAGCCCAGAAAATG
ATTT
110chr1CCAACTCCAACTCCACCCTTTCGGAGTTGGCGGTGACAAAGT
111chr1ACCGAGGGTTTTCTGTTAAGCACTTGACGCATCTTCTTCCCTTCT
CACTCCAAACAGTAGTGAGTAGGGGCCTGTTTATCCTAATTTTGT
112chr1
TGTTTTCTT
GATGGCTAGTGTTTGGTGCAAA
113chr1GCGGACAACTTGTGTAACCCTT
G
GAGGTGCATATGACCCAAATTTTTGTACTCAAGAACTGTCTTCAT
114chr1
GGCTTCG
TTTTTGGGTTAATTTTAGCATCATACCGTGTTAAAATATTGGCAA
115chr1
CCAGAGGTCTAAA
CTGAATCAAATTGATGTCGCTGA
116chr2TTAGGCATGGGATGCAAGGAT
A
CCTAAGAGCGGTACAATAAAAG
117chr2CAAAGAGGGTAAGCTGAGGCTT
GCTATAAA
AGAAGCAATCACCCATAGCTACCCTTTAGGAACACATGAATTGA
118chr2
TTTCCC
CATTGCATGAAATTTAATGTTTATCTGGCACAGCTAACAGAATCA
119chr2
CTGCCAAG
TCCTTCTAGATGAAGGACCTGAGCACGGGTATGGAATCTATACA
120chr2
AGATTTGG
TTTTAGCAGAACCGAGCTGTCATTCCAATGTTGACATCCTCTTGC
121chr2
AT
GGATGTACTTTCAAATTAGGTCG
122chr2GGTCGCCCTCATGGTAGAACTG
AGTGT
CACAATCCAATTTTGCTAGCTAA
123chr2TGTACATGCGGGACGATGAAG
GATG
TTTTTACATGTGGAGCTGCGGAT
124chr2CATCACACCAACCTCAAGTCCT
A
GAGATGTCTCATCATGGAACTCCATCAAGGTTTCCAAGACCCTTA
125chr2
GATAC
CAAATTCACTACCAGTACAGAA
126chr2ACATGGCACATCCTCACATCAA
TGTCAATC
CAAAGATTGTTAATGTTGAGTAC
127chr2GGGAGTGAAATGCCCTGAAAA
CTGTGAT
CCCTACATTCATCCATGTATTAA
128chr2CAACACATAAGCTGTGTGCACTT
AACATCC
TCACCACTATCATTTAACCGGACAAATCCCTAATTAAAACCGCGG
129chr2
TTTAC
AAGTTCGTTCGCTTTTGAAATTGGTCTGACTTTCATCTCAAGTTAA
130chr2
AAGACATTCG
11
TGGCACAATTATATTTCCATTGCGACCACCTCATTACACTAATCCC
131chr2
ATTATT
GACCTTGCATATTTACGAAGTGA
132chr2GGCTACTTTCCTTGCTTTGGTCA
TCA
CCACCCTTTTATCGTTGAAGTTTTCCCTTATATTCACGGATAGAGG
133chr2
CAGA
134chr2CCCAAGGCTAAAGCTCGTTGTAGCACTCGACGAGGATAAGGTAG
AAGAGGGCATCATTCTTGTACTCAATCTTTCTAATTTAATGCGGCC
135chr2
TTGT
CATGTCAGCAACACCAGACTTCCACTTACTGGTGCATGTGTCGTT
136chr2
AG
TTTCCATGTTAAGGGATCAAATG
137chr2CCATCCTACTCATTCGAACACCA
ACCA
TTCTATAGCTAAAAAGTTCTTAAACCAGTTCATCCAGTTTATCCGT
138chr2
AATCTGGATA
GTGTAAATGACTCACAGATGGTCAACACGTGACACACACACATA
139chr2
TTGGCATT
GACCTTCTGTTTCTACCAGAAAAGCTCTCTTCCTTCTGTTCAATGG
140chr2
ACACATG
AAGAGGGATCGATCTACCCAGCTGGTGATCAGGTAGTTGTTGTTG
141chr2
TAC
TGGAGGAAGTATCTCATGGGTACCACATCATCAAACAAATATTA
142chr2
TTGACCCTTC
TAAATCAAGCTTTGCAGCAGCT
143chr2CCAATCTCACTTGCACGAGGTT
AAAG
GGATTTTGCCGGAAAACTCTTCTCAATGGAATCCCTAATCTATATG
144chr2
AAAAACACATCT
TGATAATATGCATATGGCATACTCCACTATCGCCAATACACTTCTC
145chr2
GTGGAAAC
CATCATCGTGAAAGGTGTAGTA
146chr2CCCTATTCCGGTCGATCGAT
GCTCT
TGATCAATCAACTTGCTGTATACGGGAAAAATCCAAATAAGAACC
147chr2
CACAAAA
TGGAATTAAGAGGAAAGAGAGG
148chr2TTCCACGCGGATTGCTTTT
AATCAC
GACTTCTGCTTCCTTTTGGATTC
149chr2GACTTGGTGGCCACAACATCTA
G
CAAGTAATCGCTCGACAGCTTC
150chr2TGCATCCGCTGATTGTATCTCC
ATC
ACCACACACAATCTGATCTTTTGATAATTCACTGTGGTGTGTTTTC
151chr2
AGCC
CAAATATATCTCTGGCGCTTGGA
152chr2CCTGCTGTTCTTTCTTCAGTTCGT
A
12
TGACTGACTTATTGCATACTGAA
153chr2CGGTACCAAGCTTTAGAGGGAA
GTTGAG
GCTCATCTGATCCGTATACTCCGGAAAGACCGAAAGAAGAGGAG
154chr2
AGAT
155chr2GGGATCTCAATTGCT
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