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文档简介
临床血液学
1.胚胎造血期特点:中胚叶造血期:2~9周,卵黄囊壁上的血岛是人类最初的造
血中心;肝脏造血期即胚胎发育的第6周到第7个月;骨髓造血期从胚胎3个月
开始,到8个月时骨髓成为造血中心。
2.造血干细胞在体内可长期地重建造血,而早期造血祖细胞只能短期重建造血,
晚期造血祖细胞则完全丧失重新造血的能力。
3.在造血正调控因子中,属于早期造血因子的是多系集落刺激因子。
4.T细胞可产生IL-2-IL-5因子,不能产生IL-1因子。
5.正常人无效造血可占总造血的1%。
6.区分造血干细胞和早期造血祖细胞的依据是细胞表面标志。
7.肿瘤坏死因子a对祖细胞具有抑制和激活两种效应。
8.造血干细胞只进行不对称有丝分裂。
9.转化生长因子B参与造血的负向调控,阻止细胞进入S期,维持造血干、祖
细胞处于非增殖状态。
10.从出生到4岁,全身骨髓的髓腔内均为红骨髓。5岁后,红骨髓脂肪化由远
心端向近心端发展。健康成人红骨髓约占骨髓总量的50%o
11.青春期后逐渐萎缩的里吧器官是胸腺。
12.骨髓穿刺的常用部位是骼骨、胸骨、胫骨,成人最理想的骨髓穿刺部位是骼
骨后上棘。
13.骨髓增生标准中,有核细胞与成熟红细胞的比值为1:20时,属于增生活跃。
14.对增生极度减低的骨髓片,可计数100个有核细胞。
15.正常骨髓中,粒细胞系统中比例最高的是中性杆状核粒细胞,大约20%。
16.正常骨髓分裂象中常见于早幼及中幼阶段,约占有核细胞的1%,增殖过高
的骨髓分裂象约占有核细胞的5%o
17.正常骨髓分裂象中幼红细胞约占有核细胞的20%,以中、晚幼红细胞为主,
平均各约10%O
18.细胞核形态异常改变的是Pelger-Huet异常,其它为胞质异常。浆细胞中有
Russel小体。
19.胞质丰富的原始阶段细胞是原始浆细胞。
20.核染色质呈粗大网状且排列紧密的是原始巨核细胞。
21.在正常骨髓象中,在1.5cmX3.0cm的片膜上,可见巨核细胞7~35个,数量
最少的是原始巨核细胞。
22.骨髓涂片中出现火焰细胞的是浆细胞系统。
23.粒细胞系统中,体积最大的阶段是早幼粒细胞,体积大于原始粒细胞是血细
胞发育成熟演变规律中的特例。
24.颗粒常覆盖在细胞核上的是嗜碱性粒细胞。
25.胞质中出现紫红色非特异性嗜天青颗粒的是早幼粒细胞;细小的、分散均匀
的灰尘样紫红色天青胺蓝颗粒的是单核细胞。
26.原发性染色体异常也称为标记染色体。
27.成熟中性粒细胞过氧化物酶活性增高:再生
障碍性贫血、感染、急淋和慢淋,其他降低。
28.可以被过碘酸氧化并形成双醛基的物质是含乙二醇的多糖类物质。
29.区别过碘酸-雪夫反应阳性结果+和++的红色颗粒数量是10个。
30,过碘酸-雪夫反应可辅助诊断红血病或红白血病,正常幼红细胞和红细胞均呈
阴性反应,而发病时可呈阳性反应。
31.过碘酸-雪夫反应阳性:缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血及骨髓增生异常
综合症;过碘酸-雪夫反应阴性:巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫
血和白血病等疾病。
32.血细胞内的碱性磷酸酶水解基质液中的a-磷酸蔡酚时,所需的PH值环境是
9.4~9.6。
33.急、慢性粒细胞白血病和急性单核细胞白血病时,碱性磷酸酶染色积分值减
低,但在类白血病时,NAP积分值明显增高,中性杆状核粒细胞碱性磷酸酶活性
增强,甚至中性晚幼粒细胞也呈阳性反应。
34.NAP试验中除成熟粒细胞外,呈阳性反应的细胞是巨噬细胞。
35.NAP可用于鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症,前者积分值升高,
后者无明显变化。
36.醋酸AS-D蔡酚酯酶染色中红细胞系统的反应特点是:早期幼红细胞可呈阳
性反应,随细胞的成熟阳性反应程度逐渐减弱,此反应不被氟化钠抑制。
37.酸性磷酸酶染色时,可被酒石酸抑制的是淋巴瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病
的
38.巨核细胞可呈阴性反应的化学染色是碱性a丁酸蔡酚酯酶染色。
39.能鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞的化学染色是碱性a丁酸蔡酚酯酶染色和酸
性磷酸酶染色。
40.恶性组织细胞病有时需与急性单核细胞白血病相区分,可采用碱性a丁酸蔡
酚酯酶染色,前者阳性,但反应不被氟化钠抑制;也可借助过氧化酶染色辅助鉴
别,前者阴性,后者弱阳性。
41.铁染色时,骨髓小粒中的铁术语细胞外铁。
42.区分遗传性和继发性铁粒幼性贫血的是发病年龄,前者多发于青少年,后者
多发于中老年;人体内铁主要经胆汁、尿液排出。
43.正常情况下,人体内铁的主要存在形式是铁蛋白;当体内铁负荷过重时,以
含铁血黄素形式贮存。
44.铁吸收率的正确范围是10%~35%o
45.骨髓细胞核质发育不平衡的是:①缺铁性贫血(核老质幼)②巨幼细胞性贫
血(核幼质老)。
46.氟化高铁血红蛋白吸收峰在540nm处。
47.成年男性贫血标准是Hb<120g/L,Hct<41%
48.根据Hb浓度确定贫血:重度为30~60g/L,极重度为小于等于30g/L,常合并
贫血性心脏病。
49.缺铁性贫血的细胞外铁阴性,细胞内铁明显减少,铁粒幼细胞小于15%,转
铁蛋白饱和度<15%,红细胞游离原口卜咻大于0.9Pmol/Lo
50.缺铁性贫血缺铁早期Hb、网织红细胞数量、铁吸收率、总铁结
合力及铁幼粒细胞均正常。
51.早期缺铁性贫血时,有贫血,血清铁减低,转铁蛋白饱和度降低,此时可见
正细胞正色素性贫血。
52.缺铁性贫血时骨髓象显示红系明显增生,以中幼红细胞和晚幼红细胞为主。
而铁粒幼红细胞骨髓象中中幼红细胞为主。
53.中幼和晚幼红细胞的胞质中出现铁颗粒成为铁粒幼红细胞,成熟红细胞中出
现铁颗粒称为铁粒红细胞。
54.由于造血原料利用障碍导致的贫血是铁粒幼细胞性贫血。
55.铁粒幼细胞性贫血可以出现转铁蛋白饱和度增高。
56.铁粒幼细胞性贫血时环形铁粒幼红细胞水平常占幼红细胞15%以上。
57.叶酸缺乏症血象中粒细胞出现巨型杆状核和核分页过多,5叶者大于5%或6
叶者大于1%。
58.叶酸经叶酸还原酶作用变为四氢叶酸,它具有转运“一碳团”如甲基、甲酰
基等作用。
59.血液透析可导致叶酸丢失过多。
60.急性再障贫血的骨髓增生程度多为增生减低,三系血细胞减少。
61.再障时,骨髓病理组织检验显示造血组织与脂肪组织容积比降低,小于0.34。
62.再生障碍危象表现为慢性溶血者突发全血细胞和网织红细胞减少。
63.B珠蛋白生成障碍性贫血又称B地中海贫血,临床分为轻型(杂合子型)、
微型、中间型、重型等。
64.珠蛋白生成障碍性贫血时常见靶形红细胞增多。
65.获得性物理因素所致溶血性贫血有微血管性溶血性贫血、心源性溶血性贫血、
行军性血红旦白尿症。
66.溶血性贫血外周血涂片中常见有核和嗜多色性红细胞。
67.溶血性贫血急性发作期,外周血网织红细胞计数一般是2%~4%。
68.红细胞寿命(51CrTl/2)在溶血存在时应<25天。
69.红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺陷症分五型:蚕豆病、药物致溶血性贫血、感
染诱发溶血、新生儿高胆红素血症、遗传性非球形红细胞溶血性贫血。
70.遗传性口形红细胞增多症分为水肿细胞型、干细胞型,其依据是红细胞内
Na、K离子浓度。
71.细胞镰变试验(HbS病)所用试剂是偏重亚硫酸(Na2s205)。
72.PHN的筛选/排除试验是Rous试验,确诊试验是Ham试验(酸化血清溶血试
验)。
73.筛选/排除试验选用PK荧光斑点试验,可能的溶血性贫血是啥咤-5'-核甘酸
缺乏症;用热变性试验的是血红蛋白病;Heinz小体生成试验用于丙酮酸激酶缺
乏症或血红蛋白症;Ret试验用于微血管病性溶血性贫血;Coombs试验用于急
发性溶血性输血反应。
74.冷凝集素综合症的抗体型别为IgM。
75.与M0型急性髓细胞性白血病在形态上类似的是ALL-L2,都为形态较小,也
可较大,胞质少,无颗粒和Auer等。
76.Phi。小体染色可辅助鉴别M2a与ALL。
77.M3有短而粗的Auer小体,数条或数十条呈束状交叉排列。
78.AML-M3最容易并发DIC。
79.M4EO嗜酸性粒细胞增多。
80.M5a骨髓原单核细胞280%;M5b原始单核细胞<80%,原始和幼稚单核细
胞>30%。
81.M6血涂片及骨髓中幼红细胞常见的形态学变异是巨幼样改变。
82.M7未成熟型主要增多的巨核细胞是原始巨核细胞。
83.特有的遗传学标记:M2:t(8,21)(q22,q22);M3:t(15,17)(q21,
ql2)及PML-RAPa融合蛋白;M4E0:Inv(16)(pl3,q22);慢粒:t(9,22)
(q34,qll)及Ph染色体。;B细胞慢性淋巴细胞白血病:t(11,14)(ql3,
q32);T细胞慢性淋巴细胞白血病:inv(14)(qll,q32);多毛细胞白血病:del
(14)(q22,q23)o
84.CML常出现的融合基因是BCR-ABL;AML-M3常出现的融合基因是PML-RAPa;
AML-M2b常出现的融合基因是AML-MTG8。
85.AML-M3敏感免疫学标志:CD33;AML-M5敏感免疫学标志:CD14;AML-M7
敏感免疫学标志:CD41o
86.AML-M1POX染色原始细胞阳性率正确的是>3%。
87.AML-M2原始粒细胞PAS染色结果应为阴性反应。
88.粒-单核细胞共有的标记是CDllb、CD31~CD36>CD64和CD68。
89.M6型白血病的红血病期以原始红细胞和早幼红细胞为主;红白血病期血象以
中幼红细胞和晚幼红细胞为主。
90.红白血病期骨髓增生极度活跃或明显活跃,红系和粒系(或单核系)细胞呈
恶性增生。
91.巨核细胞白血病时血片中可见小巨核细胞,形态类似于淋巴细胞。
92.慢性粒细胞白血病起源于克隆性增殖性疾患的造血干细胞,其白细胞总数显
著增高。
93.慢性粒细胞一一慢性期:原始细胞W10%;加速期原始细胞210%;急变期
外周血原始粒+早幼粒230%,骨髓中原始粒+早幼粒250%o
94.绝大多数的慢性淋巴细胞白血病是B细胞型(95%)。
95.慢性淋巴细胞白血病细胞化学染色特点:PAS染色阳性。
96.B细胞特异性抗原有CD19、CD20、CD2B、CD5、HLA-DR、Smlg等,而T细胞
慢性淋巴细胞性白血病主要表面标记是CD2、CD3、CD4、CD6、CD8,而CD5阴
性。
97.CD7为出现早、且贯穿表达整个T细胞分化发育过程中;CD19是鉴别全B细
胞敏感又特异的指标;CD10是诊断common-ALL必须标记;CyCD22检测早期B
细胞来源的急性白血病特异而有敏感;CD14是单核细胞所特有的。
98.浆细胞白血病时,外周血白细胞分类中的浆细胞应该大于20%,这是与多发
性骨髓瘤鉴别的主要区别。
99.关于MDS的FAB分类中,被WHO删除的类型是RAEB-T。
100.MDS时髓系细胞表面抗原及淋巴细胞亚群分布异常,CD3、CD4细胞减少,
CD4/CD8比值减低或倒置。
101.MDS骨髓活检显示,聚集成簇并位于骨髓中央的细胞是原始粒细胞和早幼
粒细胞。
102.有助于早期诊断MDS的巨核细胞类型是小巨核细胞。
103.骨髓异
常增生综合症其骨髓中铁粒幼红细胞常增多。
104.霍奇金病的骨髓组织活检可将R-S细胞阳性率提高至9%~22%o
105.非霍奇金淋巴瘤的主要诊断依据是病理学检查。
106.浆细胞病包括多发骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等,不包括浆细胞白血病。
原发性巨球蛋白血症大量增多的单克隆巨球蛋白是
107.lgMo
108.浆细胞白血病骨髓象:浆细胞成熟程度和形态极不一致,形态较小,核仁
明显,核染色质致密。
109.48%~60的患者骨髓穿刺呈“干抽”样见于多毛细胞白血病。
110.证实多毛细胞白血病最可靠和有效的手段是扫描电镜超微结构检查。
111.骨髓增生性疾病包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维
化等,不包括骨髓增生异常综合症。
112.真性红细胞增多症诊断时血红蛋白浓度应达到男性>180g/L,女性>170g/L。
113.骨髓纤维化外周血图片中常见的异形红细胞是泪滴状红细胞。
114.多发性骨髓瘤血象中,红细胞常见“缗线状”排列。
115.真性红细胞增多症的骨髓象特点:偶有“干抽”现象,有核细胞增生活跃,
巨核细胞增多,各系各阶段比值及形态大致正常,骨髓铁减少或消失。
116.恶性组织细胞病最为突出和首发的症状为发热。
117.粒细胞缺乏症的骨髓象表现为:成熟阶段中性粒细胞明显减低和缺乏,但
可见原始和早幼粒细胞,表明粒细胞系成熟障碍。
118.类白血病患者的骨髓象显示为增生活跃。
119.传染性单核细胞增多症血液中存在嗜异性抗体,属于IgM,2~3周滴度达到
最高。骨髓象有核细胞增生程度属于增生活跃。
120.血小板a颗粒中含有vWF;致密颗粒中含有ADP;溶酶体颗粒中含有胶原
酶。
121.血小板a颗粒特有的蛋白是血小板球蛋白(B-TG)和血小板第四因子
(PF4)o
122.属于血小板活化标志物的指标是5-羟色胺。
123.纤溶酶原活性增高表明纤溶系统活性减低,见于血栓前状态和血栓性疾病。
124.a2纤溶酶主要功能是与纤溶酶结合形成等分子复合物,从而灭活纤溶酶,
减少引起纤溶亢进,表现为出血倾向,呈导致DIC。
125.D-二聚体可鉴别原发性纤溶症和继发性纤溶症,它是后者的特有代谢物。
126.D-二聚体是交联纤维蛋白的特异性降解产物,只有在血栓形成后才会在血浆
中增高。D-二聚体增高多见于深静脉血栓形成、肺栓塞、DIC等继发纤溶亢进,
是诊断血栓形成的重要分子标志物。
127.血浆D-二聚体增高的病理条件是纤维蛋白形成和继发性纤溶亢进。
128.PAI-1的主要作用是t-PA和u-PA结合形成不稳定的复合物,使其失去活性。
129.血友病患者筛选试验中发生延长的凝血时间是APTTo
130.PT为外源凝血途径的筛选试
验;APTT是内源凝血途径的筛选试验;TT检测的是低(无)纤维蛋白原血症或
外周血中肝素及肝素样抗凝物质;BT反映的是毛细血管和血小板的相互作用;
诊断FVLeiden突变采用的试验是活化蛋白C抵抗(APCR)试验。
131.接触凝血因子通过接触反应启动内源凝血途径。
132.在体内,最不稳定的凝血因子是FV。
133.血管壁单层内皮细胞中含有各种细胞器,其中特有的细胞器是棒管状小体。
134.低分子量肝素抗凝机制特点:对FXa的抑制活性相对增强,而对口la的
抑制活性相对减弱。
135.FXa活性用于监测低相对分子量肝素,活性维持在0.5~4.0个抗因子Xa/ml。
136.外源凝血途径特点:组织因子(TF)进入血液,活化FVD;内源凝血途径:
所需凝血因子全部源自血液,主要涉及FXD、FXI、FIX、FVIIo
137.依赖维生素K的凝血因子:口I、FVD、FIX、FX;接触凝血因子:FXfl,F
XI;对凝血酶敏感的凝血因子:Fl、FV、FWI、FXIIIo
138.抗凝血酶可与FXa、FXIIa、FXIa、FlXa结合而这些酶失去活性。
139.蛋白C系统包括蛋白C、蛋白S、血栓调节蛋白(TM)及活化蛋白C抑制
物。
140.血浆总蛋白S包括游离蛋白S以及C4Bp-PSo
141.纤溶酶原抑制剂(PAI)可t-PA以1:1比例结合,使其失活;a2-AP与PL
以1:1结合抑制PL活性。
142.采用凝血酶作用于待测血浆中的纤维蛋白原的方法是Clauss法(凝固法)。
143.凝血酶时间观察的是加入“标准化”凝血酶溶液后形成纤维蛋白丝所需时
间。
144.一期止血缺陷筛查试验包括出血时间和束臂试验;二期止血缺陷筛查试验
包括凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间;血管壁检查包括血管性血友病因子
和血浆6-酮-前列腺素Fla;抗凝物质测定包括抗凝血酶、蛋白C、蛋白S等。
145.抗凝血酶缺乏可导致静脉血栓;继发性纤溶亢进发生于血栓形成之后;继
发性低凝状态多发生于DIC后期;血管性血友病的发病原因是由VWF缺陷所致。
146.狼疮样抗凝物质增多会导致血栓形成。
147.如血浆中存在狼疮抗凝物质,则应延长的血浆凝固时间是APTT。
148.抗凝治疗中,如怀疑肝素抵抗,可测定抗凝血酶。
149.原发性纤溶亢进症是指纤溶酶活性增强,降解纤维蛋白原。
150.纤维蛋白原减低见于肝硬化,因其由肝细胞合成。
151.采用发色底物法测定血浆纤维酶原活性时,需向受检血浆中加入链激酶和
发色底物,生成对硝基苯胺(PNA)。
152.血清纤维蛋白降解产物胶乳凝集法中,血清FDP和乳胶颗粒上的抗体结合
所需浓度为25Pg/ml。
153.DIC诊断中最为敏感的指标是血清FDP测定。
154.抗凝治疗中,监测普通肝素的首选试验指标是APTT。
155.PT是检测口服抗凝药的首选指标,应用口服抗凝药时使PT维持在正常对照
值的1.5~2.0倍,或国际标准化比值(INR)在2.0~3.0为宜。
156.血浆鱼精蛋白副凝固试验阴性见于DIC晚期。
157.临床上有出血而APTT和PT正常时,应首先怀疑遗传性因子VIII缺乏症。
158.在使用大剂量肝素时,既可获得最佳抗凝疗效又无严重的出血风险的APTT
测定值范围应是较正常对照值延长1.5~2.5倍。
159.血友病A、B均为性连锁隐性遗传病;而血管性血友病除UN亚型和III为常
染色体隐形遗传病外,其余均为常染色体显性遗传。
160.血友病患者筛选试验中发生延长的凝血时间是APTTo
161.抗栓酶治疗的监测指标是纤维蛋白原和血小板。
162.红色血栓又称静脉血栓;白色血栓(灰色血栓)又称动脉血栓。
临床血液学和血液学检验知识点
(一)粒细胞系统
1.原始粒细胞(myeloblast):10~18um,胞体圆或类圆形,核占细胞的2/3以
上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀,核仁2~5个、较小、清楚;
胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。
2.早幼粒细胞(promyelocyte):12~20um,较原粒细胞大,核染色质较原粒细
胞粗糙,染色质颗粒开始有聚集,核仁可见或消失;胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝
色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。
3.中幼粒细胞(myelocyte)
①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):10~18um,胞核椭圆形或一侧
开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占细胞的2/3~1/2,核染色质聚集呈索块状,
核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色
颗粒、即特异性颗粒(致少有一个区域)。
②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15~20um:核与中性中幼粒相似;胞浆内
充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。
③嗜碱性中幼粒(basphilic):10~15um,核圆形或椭圆形、但常常轮廓不
清,核染色质较模糊;胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色
嗜碱性颗粒。
4、晚幼粒细胞(metamyelocyte)
①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):10~16um,核明显凹陷呈肾形,
马蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超过假设直径的一半,核染色质粗糙,排列
更紧密,无核仁;胞浆量多,浅红色,充满中性特异性颗粒。
②嗜酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):10~16um,核形及结构
与中性晚幼粒相似;胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。
③嗜碱性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):10~14um,核固缩呈肾形,
轮廓模糊;胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。
5.杆状核粒细胞(stabgranulocyte)
①中性杆状核粒细胞(neutrophilicstabgranulocyte):10~15um,核凹
陷程度超过假设直径的一半,核径最窄处大于最宽处1/3以上,呈带状弯曲,核
染色质粗糙呈块状;胞浆充满中性颗粒。
②嗜酸性杆状核粒细胞(eosinophilicstabgranulocyte):11~16um,
核与中性杆状相似;浆内充满嗜酸性颗粒。
③嗜碱性杆状核粒细胞(basophilicstabgranulocyte):10~12um,核
呈模糊杆状;胞浆内及核上分布有少量嗜碱性颗粒。
6.分叶核粒细胞(segmentedgranulocyte)
①中性分叶核粒细胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):10~14u
m,核呈分叶状,叶与叶之间有细丝相连或全断开,常分2~5叶,核染色质已浓
集呈粗的小块状,染深紫红色;胞浆丰富,内含淡红色均匀细小颗粒。
②嗜酸性分叶核粒细胞((eosinophHicsegmentedgranulocyte):11~16
um,核多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似;胞浆内充满粗大均匀一致
的橘红色嗜酸性颗粒。
③嗜碱性分叶核粒细胞(basophilicsegmentedgranulocyte):10~12u
m,核可分3~4叶或分叶不明显;胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。
(二)红细胞系统
①原始红细胞(pronormoblast):15~20um,呈圆形或椭圆形,边缘常呈钝
角状或瘤状突起,核呈圆形,居中或偏位,约占细胞体的4/5左右,核染色质呈
颗粒状较原粒细胞粗而密集,核仁厂3个不等,且大小不一,形状不规则,呈浅
蓝色或暗蓝色;胞浆量少,染深蓝色、不透明,有油画蓝感,无颗粒。
②早幼红细胞(eariynormoblast):10~18um,核圆形或椭圆形,约占细胞
的2/3以上,核染色质颗粒有浓集现象,较原红细胞粗糙,核仁模糊或消失;胞
浆量增多,染不透明蓝色或深蓝色,边缘可见瘤状突起。
③中幼红细胞(polychromaticnormoblast):8~15um,核圆形,约占细
胞的1/2,核染色质凝聚呈条索状或块状,中间有明显空隙,如压碎饼干样或打
碎墨砚感,无核仁;胞浆量相对较多,浆内由于已合成不等量的血红蛋白,可染
呈不同程度的嗜多色性。
④晚幼红细胞(orthochromaticnormoblast):7~10um,核圆形居中或
偏位,占细胞的1/2以下,核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状,无核
仁;胞浆量较多,因已合成大量血红蛋白,常染浅灰红色或浅红色。
⑤网织红细胞(reticulocyte):7.2~7.5um,为晚幼红细胞刚脱核而成,是尚
未完全成熟的红细胞,瑞氏染色为多嗜性红细胞,用煌焦油蓝活体染色后在细胞
内可见蓝色细颗粒或呈线状或网状结构。
⑥红细胞(erythrocyte):正常红细胞平均为7.2um,呈双面微凹之圆盘状,
中央较薄,染色浅,边缘较厚,染色深,呈粉红色,无核。
(三)单核细胞系统
①原始单核细胞(monoblast):15~20“m,胞体圆形或椭圆形,核较大圆
形或类圆形,核染色质纤细,呈疏松网状结构,核仁1~3个;胞浆量较其它原始
细胞丰富,灰蓝色,不透明,边缘不规则或有伪足状突起。
②幼稚单核细胞(promonocyte):15~25um,核圆形或不规则形,易见扭
曲、凹陷、切迹等改变,核染色质较原始单核细胞粗糙疏松,核仁可有可无;胞
浆浅灰蓝色,不透明,可见细小颗粒。
③单核细胞(monocyte):12~20um,核形态常不规则,有肾形,马蹄形,
“S”形,分叶状,笔架形等,核染色质疏松呈丝网状或条纹状结构,无核仁;
胞浆量较多,染不透明的灰蓝色,可见细小红色颗粒。
(四)淋巴细胞系统
1.原始淋巴细胞(lymphoblast):10~18um,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或
椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁1~2个;胞浆量少,呈淡蓝色,透明,无颗
粒。
2.幼稚淋巴细胞(prolymphocyte):10~16um,核圆形或椭圆形,核染色质仍
较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。
3.淋巴细胞(lymphocyte)
①大淋巴细胞:12~15um,核圆形稍偏于一侧,核染色质排列紧密均匀,
深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗
粒。
②小淋巴细胞:6~9um,核相对较小,呈圆形,核染色质紧密呈大块状,
结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗
粒。
(五)浆细胞系统
1.原始浆细胞(plasmablast):14~18um,胞体圆形或椭圆形,核圆形,占细
胞的2/3以上,居中或偏位,核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁2~5个;
胞浆量多,染深蓝色,不透明,无颗粒。
2.幼稚浆细胞(proplasmacyte):12~16um,胞体多呈椭圆形,核圆形或椭圆
形,占细胞的1/2,居中或偏位,核染色质较原浆细胞粗糙紧密,开始聚集,染
深紫红色,核仁模糊或消失;胞浆量多,深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状,不透
明,有时可有空泡及少数嗜天青颗粒。
3.浆细胞(plasmacyte):8-15um,核明显缩小,圆形,占细胞的1/3以下,
偏于一侧,核染色质浓集成块状,常排列呈车轮状,无核仁;胞浆量丰富,染蓝
色或紫蓝色,不透明,有时有泡沫感,浆内可含有小空泡及/或少量嗜天青颗粒,
偶见胞浆中有较大的红色或淡蓝色透明的球状物,称Russell小体,是球蛋白聚
集而成。
(六)巨核细胞系统
1.原始巨核细胞(megakaryoblast):15~30um,胞体圆形或不规则形,核大,
呈圆形或不规则形,核染色质较其他原始细胞粗,呈粗网状或细条索状结构,染
深紫红色,核仁2~3个,淡蓝色,不清晰,不规则;胞浆量较少,不均匀,不规
则,染深蓝色,无颗粒。
2.幼稚巨核细胞(promegkaryocyte):30~50um,外形不规则,核亦不规则,
有重叠,可扭转呈肾形或分叶状,核染色质呈粗颗粒或粗网状或局部浓集呈小块
状,排列紧密,核仁可有可无;胞浆量增多,常有伪足状突出,染蓝色或浅蓝色,
在近核处出现或多或少的很细小红色嗜天青颗粒。
3.巨核细胞(megakarycyte)
①颗粒型巨核细胞:40~70um,可达lOOum,外形不规则,核较大,形态
不规则,多呈分叶状,核染色质较粗糙,排列紧密呈团块状,紫红色,无核仁;
胞浆量丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,内含大量细小红色颗粒,常聚集呈簇,但
无血小板形成。
②产板型巨核细胞:40~70Pm,可达lOOum,形态大致与颗粒型巨核细胞
相似,唯有不同的一点是胞浆内充满细小的红色颗粒及数量不等的血小板。
③裸核型巨核细胞:是产板型巨核细胞的胞浆解体后,释放出大量血小板,
仅剩一个细胞核,称之为裸核。
4.血小板(platelet):胞体很小,2~4um,呈圆形、椭圆形,逗点状,不规则
形,中心部位有细小紫红色颗粒,无细胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出现。
(七)其他细胞
1.组织嗜细胞(tissuebasophiliccell):又称肥大细胞(mastcell),12~20
um,呈圆形,椭圆形,梭形,三角形等,核小,呈圆形或椭圆形,居中或偏位,
核染色质模糊,结构不清;胞浆充满圆形、大小一致的深紫色嗜碱性颗粒。
2.内皮细胞(endothelialcell):8~22um,形态极不规则,多呈梭形,核呈圆
形或椭圆形,核染色质呈网状,多无核仁;胞浆量少,染淡蓝色,边缘常模糊不
清,常沿核长轴的两侧或一端呈尾状伸出,可有细小紫红色颗粒。
3.纤维细胞(fibrocyte):胞体较大,不规则,多为长尾形,核圆形或椭圆形(1~
数个),核染色质呈或细或粗的网状结构,核仁1~2个,不清晰,成熟者无核仁;
胞浆丰富,多在细胞两端,染淡蓝色,边界模糊,内含纤维网状物及少许嗜天青
颗粒。
4.成骨细胞(osteoblast):胞体较大,20~40um,长椭圆形或不规则形,单个
或多个成群分布,核圆形或椭圆形,常偏于细胞一侧,核染色质排列呈粗网状,
染深紫红色,核仁可有1~3个;胞浆丰富,染深蓝色或灰蓝色,边缘常呈模糊云
雾状。
5.破骨细胞(osteoclast):胞体巨大,60~100um,形态不规则,颇象巨核细胞,
核小、数量较多,3~100个不等,圆形或椭圆形,大小大致相等,边缘清晰,彼
此独立,无核丝相连,随意排列,核染色质呈粗网状,几乎每个核都有一个蓝色
核仁;胞浆丰富,染淡蓝色或浅红色,含大小不等的紫红细小颗粒。
6.脂肪细胞(fattycell):30~50um,胞体圆形或椭圆形,核较小,形状不规
则,常被挤压在一边,核染色质呈细致密网状,无核仁;胞浆内充满大量空泡。
7.组织细胞(histiocyte):胞体较大,20~50um,形态多样,一般呈圆形或椭
圆形及不规则形,核可有圆形,椭圆形,肾形,核染色质呈疏松网状结构,核仁
2~4个不等;胞浆多少不一,染色也常不一致,有深蓝,淡蓝,灰蓝色等,边缘
多不规则或不清楚,无颗粒或含有少量或细或粗或粗细不一的嗜天青颗粒,可有
空泡或含异物等。
8.吞噬细胞(phagocyte):不是一种独立的细胞,而是胞浆内含有吞噬物质的
一组细胞的总称。具有吞噬功能的细胞有单核细胞、组织细胞、血管内皮细胞,
纤维细胞等。吞噬细胞的形态极不一致,由吞噬物的类型及吞噬物的多少而定。
其胞核圆形、椭圆形或不规则形,常一个核,有时为双核,核常被挤压至一侧,
核染色质较疏松,核仁可有可无。胞浆多少不一,淡蓝色或淡红色,常有空泡,
并有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、颗粒、有核细胞、红细胞、血小
板、碳核、细菌等。有时吞噬细胞成堆存在。
第二节异常血细胞形态学(4学时)
了解:初步认识各种异常血细胞形态,并画出每一台显微镜下的细胞图像。
血细胞形态在病理情况下,可在胞体、胞核、胞浆等方面发生异常改变。
(一)粒细胞系统形态异常
1.白血病时粒细胞改变
①胞体:大小不等、畸形。
②胞浆:Auer小体,颗粒粗大、增多。
Auer小体:是在细胞浆内出现结构均匀一致的红色细棒状小体。产生原因是嗜
天青颗粒融合而成。常见于急性非淋巴细胞性白血病细胞浆内。
③胞核:畸形、切迹、折叠、凹陷、扭曲、分叶等。如急淋时核易破碎,核分裂
象增多。
④核浆比:增大、发育不平衡(M2b)。
⑤核仁:大、数量增多、亦可不清楚。
2.巨大粒细胞:可见于中、晚、杆、分阶段。常见巨晚幼、巨杆状。
①形态特征:与同期相比,胞体大、核大、核染色质较同阶段细胞细致。
②形成原因:核酸代谢障碍。
③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗叶酸类药物治疗后。
3.中性粒细胞分叶过多:分5叶以上,常见于巨幼贫、严重感染恢复期。
4.粒细胞中毒变性改变
①中毒颗粒:胞浆颗粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫红色。见于严重感
染、大面积烧伤等。
②空泡:浆或核内空泡。见于严重感染。
③杜勒小体(Dohle):蓝斑,在细胞浆内直径约l~2um的蓝色区域。见于严重
感染,肝硬化等。
④核变性:核固缩、核肿胀、核碎裂、核溶解。见于严重感染。
(-)红细胞系形态异常
1.巨幼红细胞
①形态特征:与同期细胞相比,胞体大、核大、核染色质细致、排列疏松“幼核
老浆”。
②产生原因:核酸代谢障碍。
③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、抗叶酸治疗后等。
2.低色素性红细胞
①形态特征:与同期细胞相比,浆量少、嗜碱性、着色偏蓝,核染色质无明显异
常改变“幼浆老核”。成熟红细胞中心淡染区明显扩大。
②产生原因:Hb合成障碍(不能说缺铁)。
③常见疾病:IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。
3.红细胞大小不等、形态不整:见于各种增生性贫血。
4.球形红细胞:V6.4um,中心淡染区明显缩小或消失。见于遗传性球形红细
胞增多症。
5.椭圆形红细胞:横径/长径<0.78。见于遗传性椭圆形红细胞增多症。
6.靶形红细胞:见于低色素性贫血、地贫等。
7.嗜多色性红细胞:成熟红细胞染灰蓝色或浅灰色。多表示骨髓造血功能活跃,
多见于溶贫、失血性贫血等。
8.嗜碱性点彩红细胞:瑞氏染色后在红细胞浆中有蓝黑色细小颗粒存在。表示
骨髓再生加速。铅中毒时多见。
9.裂红细胞:即红细胞碎片。可见于微血管病性溶贫、DIC及损伤性。
10.红细胞中出现异常结构
①豪-周小体(Howoll-Jolly,s):属核残余物。可见于巨幼贫、溶贫、脾切除后、
铅中毒等。
②卡波环(Cabot,sring):可见于铅中毒、巨幼贫等。
(三)淋巴细胞形态异常
1.异型淋巴细胞:分浆细胞型、单核细胞、幼稚型。可见于出血热、传单及其
它病毒感染。
2.原、幼淋巴细胞:淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。
(四)单核-巨噬细胞系统形态异常
1.恶组:多形性、多核异组。
2.急单、类单核细胞白血病反应等。
3.戈谢细胞(Gaucher):戈谢病。
4.尼曼-皮克细胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。
(五)巨核细胞系统形态异常
1.幼巨产板:ITP。
2.小巨核:大小与成熟淋巴细胞相似,形态不规则,有伪足突起,核染色质浓
集,无明核仁。可见于白血病、MDS等。
3.巨大血小板:见于巨大血小板综合症。
第二章检验的基本方法
第一节制片方法(1学时)
掌握:制片及染色的基本方法。
了解:染液及缓冲液的配制方法。
一、骨髓制片
1.第一次骨髓穿刺患者,骨髓涂片8张以上或将所抽骨髓液全部涂完,同
时涂外周血
片4张。
2.复查病人,骨髓涂片4张,同时涂外周血片2张。
二、脱落细胞制片
1.一般包块穿刺,涂片1〜2张。
2.胸腹水及尿液标本,取50ml以上离心(3000r/分)10分钟,取沉淀物
涂片2张。
3.脑脊液标本,将全部送检物离心(3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1张。
4.痰液标本,取可疑部分涂片3〜5张。
第二节血细胞及脱落细胞瑞氏-姬姆萨染色(1学时)
一、试剂
1.瑞氏染色液:称1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析纯,约500ml)中混
匀,室温放
置3个月后应用或每天混匀1次,放置室温连续7天后应用o
2.姬姆萨染色液:称0.5克姬姆萨(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分
析纯)中混匀,放56℃水浴箱中3小时以上,中间混匀3〜
5次,取出冷确至室温,再加入33ml甲醇(分析纯)中,
混匀即可应用。
3.磷酸盐缓冲液(PH=6.4〜6.8):磷酸二氢钾(无水,分析纯)5克
磷酸氢二钠(含12.出0,分析纯)5克
蒸播水10000ml
溶解混匀备用
4.姬姆萨染色液一磷酸盐缓冲液混合比例:姬姆萨染色液约2〜3ml,加磷酸盐
缓冲液约30〜40ml混匀即可应用。每天上下午各新鲜配制1
次。
二、染色方法
1.血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定5〜8秒钟。
2.放入姬姆萨染色液一磷酸盐缓冲液混合液中染色15〜20分钟,慢性粒细胞
白血病患者
涂片染色30分钟,取出凉干或用滤纸吸干即作镜下观察。
第三、四节血象及骨髓象检验分析步骤(2学时)
掌握:血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值,正常骨髓象的正常形态特征。
熟悉:常见血液病的临床表现及血象、骨髓象的形态学改变特征。
了解:其他系细胞的正常形态及异常形态。
(一)血象检验
1.在做骨髓穿刺的同时须做血象检验
⑴BRC、RC、WBC、PLT计数。
⑵涂片染色观察。
①红细胞形态有无异常。
②白细胞形态有无异常。
③血小板形态及数量有无异常。
④有无寄生虫及其他异常细胞。
2、作用
⑴提供思路
①一系减少:HbI、WBC及PLT正常一单纯贫血。
WBCI、Hb及PLT正常一粒细胞减少或缺乏。
PLTIHb及WBC正常一ITP。
②二系减少:Hb及PLTlWBC正常一ITP、急白、MDS、巨幼贫。
③三系减少:Hb、PLT及WBC均I-AA、急白、巨幼贫。
⑵提供诊断依据
①骨髓象相似,血象有区别
如:球形RBCtiGFf骨髓红系t、血象有核红t、球形RBCt。
IDA------------»骨髓红系t、血象无有核红、RBC中心淡染区扩大。
②血象相似,骨髓象不同
如:AA------------血象三系I、骨髓巨核细胞I及无白血病细胞。
非白血病性白血病血象三系I、骨髓有白血病细胞。
MA--------------血象三系I,骨髓粒系、红系、巨核系均有巨幼变。
③血象有明显变化、骨髓无变化
如:传单>血象淋巴细胞t、异淋f(>10%)、骨髓无变化。
传淋----------血象淋巴细胞f、异淋I、骨髓无变化。
④骨髓有变化、血象无明显变化
如:戈谢病------骨髓有戈谢细胞、血象无明显变化。
尼曼-皮克病--------►骨髓有尼曼-皮克细胞、血象无明显变化。
(-)骨髓象检查
凡疑有血液系统或并发血液系统疾病均应作骨髓穿刺检查
1、适应症
①检查血常规有问题:血象增高、减少。
⑵临床体征有不明原因贫血、出血、发热、骨痛、肝脾淋巴结肿大。
2、禁忌症
①由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。
②晚期妊娠作骨穿检查要慎重。
③小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺术。
3、标本采集:一般由临床医生作。
⑴采集部位:胸骨、脊突、骸骨、胫骨粗隆(2岁以下小儿)。
⑵采集质量保证
①无菌、严防感染。
②死亡病例应在30分钟内完成。
③量不能多,一般不超过0.2ml,否则导致血稀(混血),影响判定诊断。
④对某些疾病采取多部位穿刺可提高诊断率。如转移癌、骨髓瘤等在病变或骨痛
部位穿刺其阳性率
较高;如AA多部位穿刺有利确诊。
⑶涂片质量保证
①推片时角度太大、太快都使涂片厚,反之则薄。
②先涂血片、后涂骨髓片。
③骨髓抽太多,制片人应将剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分
血液,再行涂片,底片不能丢。
④作好标识:姓名、血片(B)、骨髓(M)。
⑤涂片中前3张涂片,对估计PLT量较好。
⑷判定骨髓取材满意的几项指标
①抽吸骨髓时病人有特殊的痛感。
②骨髓液及涂片均可见骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。
③显微镜观察涂片可发现骨髓特有细胞。
④含有大量幼粒幼红细胞,粒细胞杆状核与分叶核的比值大于血片中的比值。
⑸干抽的概念:是指非技术错误或穿刺位置不当而抽不出骨髓液或只得到少量血
液。其常见疾病有:
①原发性或继发性骨髓纤维化。
②骨髓增生极度活跃,细胞过于浓集。如:白血病、真红。
③骨髓增生减低:AAo
④肿瘤骨髓浸润:恶淋、MM、转移癌等。
4、检验的方法及步骤
(1)低倍镜观察
①取材、涂片、染色情况:采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等标准进行评价。
②判定骨髓有核细胞增生程度:有核细胞与成熟红细胞之比,分五级:
增生极度活跃:平均约1:1
增生明显活跃:平均约1:10
增生活跃:平均约1:20
增生减低:平均约1:50
增生极度减低:平均约1:200
③观察涂片尾部及边缘有无大的或成群(团)的异常细胞,同时计数全片巨核细
胞。
(2)油镜观察
①选择部位:在涂片体、尾交界处,选择细胞分布比较均匀处。
②有核细胞分类计数:可根据增生程度确定分类总数
增生减低及极度减低:分100或200个细胞。
增生活跃:分200或500个细胞。
增生明显活跃及极度活跃:分500个细胞。
③观察细胞形态
粒系:中毒颗粒、空泡、有无巨幼变粒细胞、Aure小体等。
红系:幼红细胞及成熟红细胞有无异常变化。
巨核系:小巨核、幼巨产板、巨大血小板、估计血小板量。
④注意有无寄生虫。
⑤判定低倍镜下观察到的异常细胞性质。
(3)计算结果
①根据分类结果计算出各系统及各阶段细胞的百分率。
②计算粒红比值:粒细胞系总和/红细胞系总和。
(4)填写报告
①根据骨髓象分类结果,按报告单要求逐项进行填写。
②做好骨髓象所见的形态特征描述。
(5)骨髓报告分析及意见
①取材、涂片、染色情况:良好、尚可、欠佳。
②骨髓增生程度,粒:红=?:?。
③粒系:
④红系:
⑤淋巴系或单核系:
⑥全片巨核细胞数,根据血小板分布估计其量是多、正常、少。
⑦有无寄生虫。
⑧血片分类及所见进行描述。
⑨写出诊断意见:根据血象、骨髓象和细胞化学染色所见,结合临床资料,提出
具体诊断意见或供参考的意见。诊断意见分为以下几种:
肯定性诊断:骨髓有特异性变化,临床表现又典型者,如各种白血病、MA、MM、
转移癌、戈谢病、尼曼-皮克病等。
支持性诊断:血象、骨髓象有形态改变,可解释临床表现,如IDA、AA、溶贫等。
可疑性诊断:骨髓象有部分变化或出现少量异常细胞,临床表现又不典型,可能
为某种疾病的早期或前期或不典型病例者,如难治性贫血等,要结合临床、作相
应的检查,并动态观察
其变化。
排除性诊断:如临床上怀疑ITP的患者,其骨髓中血小板易见(不少),巨核细
胞无成熟障碍,即可排除ITP的可能性。
形态学描写:骨髓有些改变,但提不出上述性质诊断意见,可简述其形态学变化
的主要特点,并建议作动态观察,尽可能提出进一步检查的建议。
⑩填写报告日期并签名。
5、骨髓象检查的注意事项
①由于细胞形态变化多种多样,故观察细胞时不能根据某一、二个特点就轻易作
出肯定性诊断或否定性诊断,要全面观察细胞的形态变化,结合临床综合分析
作出判断。
②同一病人的骨髓涂片,可因制作涂片不佳(太厚、太薄)、染色不好、选择分
类或观察的部位不当均易导致判断错误。
③观察细胞形态要认识到血细胞的发育是一个连续不断的过程,对各系细胞划分
为若干阶段是人为划分的,在实际观察中常会遇到一些细胞既有上一阶段的某
些特征,又有下一阶段的某些特点,由于血细胞是向成熟方向发育,故一般遇
此情况归入下一阶段。
④对于个别介于两系统之间的细胞难以判断时,可采用大数归类法(即将此类难
以判断的细胞归入细胞多的细胞系)。如在红系较多的骨髓片中,将介于浆细
胞与幼红细胞之间的细胞归入红系细胞;介于原粒细胞与原淋巴细胞之间的细
胞,一般情况原粒细胞较原淋巴细胞易见,故应归入原粒;如为急性淋巴细胞
白血病的病人,应归入原淋巴细胞。切忌在急性白血病骨髓象中分出多种原始
细胞(如原粒、原单、原淋都有)的现象。
⑤急性白血病时,各系统原始细胞在理论上虽各有特征,但有时及为相似,很难
鉴别,这时应注意观察伴随出现的幼稚细胞、成熟细胞,并与其比较,同时要
结合细胞化学染色、血象细胞形态等综合考虑,推测原始细胞的归属。
⑥有时可见到难以识别的细胞,可参考涂片上其他细胞后作出判断,如仍不能确
定可归入“分类不明细胞”,但不宜太多,若有一定数量,则应通过细胞化学
染色、集体阅片或会诊等方法弄清类别。
⑦骨髓涂中巨核细胞减少或血小板减,而外周血象中血小板数正常时,则往往是
由穿刺凝固或涂片凝固所致。
⑧作骨髓细胞学检查时,应同时作血象细胞学检查,这有助于疾病的诊断及化疗
后疗效判断。
(三)判定骨髓计数值的高低
根据骨髓各系统各阶段细胞的计数值与其相应的X±SD的离散程度进行判
断。
计数值:在X±1SD以内视为正常
在X—1SD以下视为减低
在X+1SD~2SD之间视为增高
在X+2SD以上视为明显增高
从第五节起以下的实验课均让学生自己动手做,教师辅导。
第五节大致正常骨髓象(4学时)
掌握:血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值,骨髓各系统各阶段细胞的正常
形态特征,正常骨髓象报告的书写方法。
熟悉:其他系细胞的正常形态。
一般符合列情况者,可视为大致正常骨髓象。
1.骨髓有核细胞增生活跃。
2.粒红比值:2~4:lo
3.各系统各阶段细胞比值在正常范围,形态无明显异常。
①粒系:约占40~60%,其中原粒V2%,早幼粒V5%,中性中幼粒8%~12%,中
性晚幼粒10%~15%,中性杆状核15%~20%,中性分叶核12%~20%,且杆状〉
分叶,嗜酸<5%,嗜碱VI%。
②红系:约占20%~25%,原红VI%,早幼红<5%,以中、晚幼红细胞为主、各
约占10%,形态无异常。
③淋巴细胞系:约占15~25%,均为成熟淋巴细胞,原幼淋巴细胞小儿偶见。
④单核及浆细胞系:各<4%。无原幼单及原幼浆细胞。
⑤巨核系:通常在1.5义3cm的涂片膜上,可见7~35个巨核细胞。其中原巨0或
罕见,幼巨0~5%,颗粒巨10~27%,产板巨44%~60%,裸核0~30%。血小板
易见,呈堆存在。
⑥其它细胞:可见少量非造血细胞,如组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、破骨细
胞、成骨细胞、脂肪细胞等。
⑦核分裂象少。
⑧无异常细胞及寄生虫。
⑨各系细胞形态正常。
第六节临床血液生化和血细胞化学
一、细胞化学染色(4学时)
掌握:NAP染色、铁粒染色、POX染色方法、结果判定、正常值及临床意义。
熟悉:NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的试剂配制。
了解:NAP染色、铁粒染色、POX染色方法的。
(一)碱性磷酸酶染色(NAP)
------钙钻法
1.原理细胞内的碱性磷酸酶在PH9.2~9.8时,将底物B-甘油磷酸钠水解,产
生磷酸根,后者与其质液中的钙离子作用形成磷酸钙,再与硝酸钻起反应,形成
磷酸钻,最后与硫化钱作用形成硫化钻黑色沉淀定位于胞浆中。
2.试剂
(1)备用试剂:①95%乙醇②2%CaCl2③2%硝酸钻④1%硫化镂⑤B-甘油磷
酸钠⑥Tris-HCI缓冲液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHCI80ml,调
PH9.5,加水至500ml
孵育液(每次必须新鲜配制):缓冲液
(2)Tris20ml,2%CaCI2
20ml,B一甘油磷酸钠200mg。
3.方法
(1)新鲜血片用95%乙醇固定lOmin,取出,自然干燥。
(2)将孵育液放入45℃水浴箱中先预温5min后,再放入涂片孵育30min,取出
涂片(不冲洗)立即放入2%硝酸钻中5min,取出用自来水充分冲洗干净。
(3)放入1%硫化镂溶液(每次必须新鲜配制)中2min,用自来水冲洗干净,
用核固红复染30min。
4.结果
阳性:中性粒细胞胞浆内有棕黑色沉淀。
阴性:中性粒细胞胞浆内无棕黑色沉淀。
5.正常参考值
成人:积分80分左右。
儿童:因年龄而异。
6.临床意义
(1)细菌:积分球菌tt>GN杆菌,病毒减低或无变化。但NAP积分正常/1,
不能除外细菌感染。
(2)慢粒II,类白t〜tto
(3)ALLf,ANLLl。
(4)AAtt,PNH正常/l。
(5)恶组II,反应性组织细胞增多t-tto
(6)增性红细胞增多症t,继发性红细胞增多正常。
(7)激素治疗后NAPt»
(8)妊娠期NAPto
7.质量保证
(1)孵育液、1%硫化锭每次实验必须新鲜配制。
(2)Tris-HCI缓冲液的PH应控制在9.2~9.8之间。
(3)温度应严格控制在45℃左右(上下不超过1℃)。
(4)涂片在孵育液中准确温育30分钟。
(5)涂片从孵育液中取出时不能冲洗,应直接放入硝酸钻,否则实验失败。
(6)涂片从硝酸钻中取出时应用自来水冲洗3分钟,否则涂片太脏,结果不好
观察。
(7)每次染色必须作对照。
(二)铁染色
1.原理骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁,其中的三价铁与分子中的蛋白
质结合不牢固,经稀盐酸处理后而游离,并能在酸性亚铁氧化钾溶液中产生普鲁
士蓝反应。细胞内铁也可用此法显示。根据反应的强弱了解骨髓中铁的含量。
2.试剂
(1)酸性亚铁氧化钾溶液
200g/L亚铁氧化钾溶液5份
浓盐酸1份
取200g/L亚铁甄化钾溶液置于试管中,缓缓滴加浓盐酸,边滴边摇匀,至
出现白色沉淀,再滴加200g/L亚铁氟化钾溶液,亦边滴边摇匀,至白色沉
淀消失为止,备用。
(2)2g/L核固红一硫酸铝溶液
取硫酸铝2g溶于100ml蒸储水中,再加入核固红0.2g,置37℃水浴中1小
时,并随时振摇,使溶解,过滤后使用。
3.方法
(1)选髓粒丰富的骨髓片,用甲醇固定10分钟。
(2)髓片上滴满酸性亚铁氧化钾溶液,染色30分钟。
(3)用蒸储水冲洗后,用核固红复染20分钟。
4.结果判断
幼红细胞内出现蓝绿色颗粒为阳性。
5.正常参考值
正常:细胞内铁>20%,细胞外铁+~++。
IDA:细胞内铁<15%,细胞外铁阴性。
6.
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