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北京DB市地方标准DB11/T507—2007玉米品种纯度及真实性SSR分子检测方法SSR-basedMethodtoAssayPurityandGenuinenessinZeamaysL.2007-11-22发布2008-02-01实施北京市质量技术监督局发布I1存条件为-20℃;TaqDNA聚合酶(5U/µL保存条件为-20℃;SSR引物,保存条件为-20℃;矿物油;2Silane剥离硅烷(RepelSilane无水乙醇;四甲基乙二胺;过硫酸铵;冰醋酸;硝酸银;甲醛将玻璃板洗净,用无水乙醇擦洗两遍,干燥。在长玻璃板上涂0.5%亲和硅烷(Bin3送检样品与标准样品有一对以上(包括一对)引物检测出差异,判定送检样品与标准样品不属于4aOH溶液,加热至完全溶解后,冷却至室温,用10mol/L氢氧化钠溶液调pH值至8.0,加水定容至1000A.2.2SSR引物:用超纯水分别配制左引物(L)和右引物(R)终浓度均为40μmol/L的储存液,等体A.3.5亲和硅烷(BindingSilane)缓A.3.60.5%亲和硅烷(BindA.4.1固定液:取冰醋酸100mA.4.2染色液:取硝酸银2gA.4.3显影液:取氢氧化钠30g和甲醛5mL,加去离子水定容至100051bnlg4392bnlg1613bnlg125左引物(L):GGGACAAAAGAAG4bnlg1985bnlg2386bnlg2407bnlg1078phi0349phi053phi056右引物(R):CGCACACCACTphi065phi072phi080phi085phi96100左引物(L):AGGAGGACCCCAACumc1061bnlg233umc2084bnlg1450bnlg194061bnlg1252bnlg4393phi0724bnlg1625bnlg1616bnlg19878phi1239phi065umc1040umc1944phi077bnlg240bnlg238phi085bnlg1006bnlg1621phi295450phi0537umc1904phi048phi080phi099phi015phi037bnlg1306bnlg1505bnlg1884umc2105p
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