临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件

临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件

一、检验科检测项目标准操作规程（见附录）

A、临检室

A1、血常规检验标准操作规程

A2、嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程

A3、红细胞沉降率测定标准操作规程

A4、血型鉴定标准操作规程

A5、尿常规标准操作规程

A6、一小时尿沉渣计数标准操作规程

A7、尿乳糜定性检查标准操作规程

A8、大便常规标准操作规程

A9、虫卵及包囊浓缩检查标准操作规程

A10、隐血试验标准操作规程

A1K脑脊液检验标准操作规程

A12、浆膜腔积液检查标准操作规程

A13、精液检查标准操作规程

A14、前列腺液检查标准操作规程

A15、阴道分泌物检查标准操作规程

A16、胃液检查标准操作规程

B、生化室

Bl、血氨测定标准操作规程

B2、17-KS测定标准操作规程

B3、17-0H测定标准操作规程

B4、VMA标准操作规程

B5、InsulinAutoantibadiesIAA胰岛素自身抗体标准操作规程

B6>IsletCellAutoantibodiesICA胰岛细胞自身抗体标准操作规程

B7、脯氨酸肽酶测定ProlidaseTestKit标准操作规程

B8、I型糖尿病检测(诊断酶联试剂盒)标准操作规程

B9、血清IV胶原蛋白(PANASSAYIV.C)标准操作规程

B10、血清蛋白电泳标准操作规程

BlkN-乙酰葡萄糖首酶NAG标准操作规程

B12、腺首脱氨酶ADA标准操作规程

B13、尿肌酸测定标准操作规程

B14、肌钙蛋白TNT测定标准操作规程

B15,肿瘤相关物质测定标准操作规程

C、免疫室、发光、放免室

Cl、HAVAblgM标准操作规程

C2、PreSl标准操作规程

C3、HBSAg标准操作规程

C4、HBSAb标准操作规程

C5、HBEAg标准操作规程

C6、HBcAb标准操作规程

C7、HBcAblgM标准操作规程

C8、HCVIgG标准操作规程

C9、HCVIgM标准操作规程

CIO、HDVAg标准操作规程

ClkHDVIgG标准操作规程

C12、HDVIgM标准操作规程

C13、HEVAblgG标准操作规程

C14、HEVAblgM标准操作规程

C15、HGVAb标准操作规程

C16、TTV-IgG标准操作规程

C17、寒冷凝集反应标准操作规程

C18、ENA多肽抗体谱标准操作规程

C19、ANA标准操作规程

C20、ds-DNA标准操作规程

C2R幽门螺杆菌抗体标准操作规程

C22、嗜异性凝集试验标准操作规程

C23、肥达氏反应标准操作规程

C24、胰岛素测定标准操作规程标准操作规程

C25、C肽测定标准操作规程标准操作规程

C26、胰高血糖素测定标准操作规程标准操作规程

C27、a1-微球蛋白测定标准操作规程

C28、B2-微球蛋白测定标准操作规程

C29、THP-蛋白测定标准操作规程

C30、抗TG,TM抗体测定标准操作规程

C3k抗INS-抗体测定标准操作规

C32、人HI型前胶原放射免疫测定标准操作规程

C33、逶明质酸放免测定标准操作规程

C34、IV型胶原放免测定标准操作规程

C35、内皮素放免测定标准操作规程

C36、肺肿瘤标记CY21T放免测定标准操作规程

C37、T3T4TSHFT3FT4测定标准操作程序（SOP）

C38、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、fPSA,Ca-125,Ca-199,Ca-153

测定标准操作程序（SOP）

C39、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P孕酮、T睾酮测定标准操作程序（SOP）

C40、铁蛋白、叶酸、VitB12测定标准操作程序（SOP）

C4KCKMB、cTnl、MYO测定标准操作程序（SOP）

C42、IgE测定标准操作程序（SOP）

C43、地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠，丙戊酸，

安定，环胞霉素标准操作程序

C44、DPD测定标准操作程序（SOP）

C45、过敏原测定标准操作程序

D、血液、骨髓室、FCM

DkD-二聚体标准操作规程

D2、3P试验标准操作规程

D3、骨髓细胞学检查标准操作规程

D4、过氧化物酶POX染色标准操作规程

D5、苏丹黑BSBB染色标准操作规程

D6、中性粒细胞碱性磷酸积分NAP染色改良GOmorl氏钙钻法标准操作规程

D7、中性粒细胞碱性磷酸酶NAP染色偶氮偶联法标准操作规程

D8、糖原PAS染色标准操作规程

D9、酯酶染色一-中性非特异性脂酶a-NAE染色标准操作规程

D10、铁染色标准操作规程

Dlk酸性磷酸酶ACP染色标准操作规程

D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程

D13、自体溶血试验标准操作规程

D14、血清酸化溶血试验Ham试验标准操作规程

D15、热溶血试验定性标准操作规程

D16、蔗糖溶血试验糖水试验标准操作规程

D17、变性珠蛋白小体检查Heinz小体染色标准操作规程

D18、血浆游离血红蛋白测定标准操作规程

D19、淋巴细胞亚群测定HLAB27/HLAB7测定细胞亚群测定活化血小板

测定

D23、APO2.7测定CD25/CD3测定

D25、MDRP-gP多药耐药基因）测定

D26、TdTMRD白血病残留病灶测定血小板糖蛋白测定

D28、CD23Ige低亲和力受体测定

D29、CD95/Fas测定

D30、FCM试剂配制

D3KBe1-2测定

D32、ANNEXINV?测定

D33、P53测定

D34、入链测定

D35、CD55测定

D36、血小板抗体测定（PAIgG,PAIgM,PAIgA）

D37、DNA测定

D38、干细胞CD34测定

D39、CD34+细胞绝对计数标准操作规程

D40、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）活性测定发色底物法标准操作规程

D41、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）活性测定（发色底物法）标准操作规

D42、血管性假血友病因子vWF含量测定（ELISA）标准操作规程

E、细菌室

E1、革兰氏阴性鉴定卡及药敏卡（GNI及GNS卡的操作步骤）标准操作规程

E2、革兰氏阳性鉴定卡及药敏卡（GPI及GPS卡的操作步骤）标准操作规程

E3、酵母菌鉴定卡YBC卡标准操作规程

二、检验科工作流程图

住院病人就诊检验流程

门诊病人就诊检验流程

三、检验科各项规章制度

生物安全制度

1、医务人员

1每1―2年做体检一次，并接受乙肝疫苗接种。

2每1—2年检查乙肝病毒抗原抗体水平，发现乙型肝炎者应进行隔离治疗。

3检验人员进入实验室应穿好工作服，不允许在实验室进食和吸烟。

4检验人员在工作前后和被污染后，应用肥皂和流水清洗，必要时由消毒液

浸泡双手，每季度抽查检验人员的手，并做细菌培养一次。

2、环境消毒隔离

1）实验室应分为清洁区和操作区，清洁区注意保护不受污染操作区的工作

台及地面每日用消毒擦拭一次，有污染时随时消毒，每周大扫除一次。

2）采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次，采血结束用消毒液擦拭操作

台、桌子和地面一次，紫外线每日照射消毒一次，每月空气细菌培养一次，紫外

线强度定期测定。3、各种检验标本的收集，送检必须用相应指定的容器留取，

不得外溢污染。

4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针一

筒一带一消毒，所用止血带及纸垫每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜绝交叉

污染。5、一次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红蛋白吸管，应严格

做好领发登记，注射器先浸泡消毒后由供应一对一调换，统一处理，其余一次性

器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。

6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术，操作前必须洗手

必须戴好帽子与口罩，操作台和手被污染时应用肥皂和流水认真洗手，必要时用

消毒液浸泡双手，酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。

7、凡是肝炎病人和透析病人的血液标本及疑有黄疸的血标本，都视为肝炎

的污染标本，应贴上红色危险标记，放在规定区域内，引起警惕和防止扩大污染

面。

8、溢出试管外的血液，应立即用碘酒擦拭干净，注意防止玻璃碎片刺伤手,

9、当针头和碎玻璃刺伤手时,，挤出血水,应立即用碘消毒局部。

、实验室操作时应戴上手套吸取标本，离心振荡等应严格操作规程，防止自

身和实验室受污染。

、已检查标本与容器分别浸泡于中两小时后，标本倾弃，一次性容器送焚烧,

重复使用的经清洗消毒和灭菌后再使用，

13、三级医院必须设置清洁区，污染区，操作有气溶胶可能的标本应配置生

物安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等。

14、非科室工作人员不准进入实验室，外来人员参观需经科主任同意方可进

入

质量管理制度

1、各专业实验室根据省临检的有关规定，开展实验室内的质量控制，并制

定有关措施。对室质控应每日有对失控情况有纠正方法，有预防性措施，对于目

前尚无完整的室内质控体系的实验室，应积极创造条件，建立室内质量控制体系。

2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动，对每次质控评价应

有记录。

3、计量仪器（包括分析天平，天平、分光光度计等）应定期校正，每年一

次。

4、大型分析仪器必须专人负责，有使用维修记录。

5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报，每月一次报科主任

审批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配试剂

须严格校正后方可使用。

6、各专业实验室必须建立完整的操作程序，并应严格按程序执行。

7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发

出。

8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时，应逐步建立全面质

量控制体系，对标本的采集，运送，保存等纳入严格的管理之中。每日送检的标

本应签收。

9、急诊检验应严格按照急诊制度执行八剧毒药品专人保管，由科室主任，

主管试剂的同志负责，放保险柜，领用时须有主管同志在场，作好领用登记。、

易燃物品专柜存放，普通试剂按常规分类存放，并由科室主任和主管试剂同志负

责，注意用电安全，特别是电炉子、大烤箱、火焰光度计，由各科使用同志负责

安全，严防火灾。注意安全，随手随时关门，下班时要做好水，电，门的安全保

卫工作，防火防盗防水。

科室安全保卫负责：1、各专业实验室应根据各自的工作需要，月申报所购

试剂，并应做到及时盘存清点，入库做到心中有数。

2、所有试剂的申请，进货一律由科室统一管理，3、各专业实验室应对试剂

库存定期检查，不使用过期变质的试剂。

4、自配试剂须以严格校正后方可使用。

5、试剂的保存应严格按照要求，以保证有效期内能有效地使用，杜绝浪费

现象。

6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。

7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，

使用时应有两人在场，并做好登记。8、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和

电源。

（五）实习生管理制度

1、科室实习大纲安排实习时间表，如遇特殊情况科室统一安排。

2、实习生必须服从实习单位和科室的直接管理，遵守实习单位的规章制度,

参加实习单位的政治、业务学习和有关活动、会议。

3、实习生必须加强医德医风修养，文明行医，礼貌待人，主动热情为病人

服务。

4、实习生应在指导老师指导下进行实习和工作，一切实验结果均须指导老

师签名后方能发出报告。不得擅自签名发出报告，指导老师应严格把关逐步培养

学生独立工作能力。

5、严格请假制度，学生一般情况下不得请事假，节假日按国家法定给与准

假，请假一律写报告，一天内经指导老师同意，科主任批准，报告交老师登记，

三天内经医教科批准，三天以上经学校批准。

6、实习生必须准时上班，不迟到早退，要有严格的实习作风，不得离岗，

为了培养学生的应急处理能力，实习生必须每天晚上班7、实习生必须严格保护

实验仪器和公物，科室贵重仪器必须在指导老具体指导下进行操作。.

七.外单位标本

外单位送检的样本，一律由同志登记后，再转交各实验室检

测实验室、多张检验单标本

凡有两张以上的检验申请单包括其他实验室或外送兄弟医院原则上要分

装各管，随检验申请单一起分别放置各样本盒，对采样困难者要主动跟踪样本,

并作详细记录以免漏检，分清责任。血常规检验

标本

用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,门诊病人在仪器上做三分类测定,住院病

人在COULTER仪器上做五类测定。

试剂及仪器

COULTER分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER4CPLUS全血质控品，

COULTER五分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER5c全血质控品。（血液细

胞自动化分析仪介绍）

操作门诊：收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混匀器上

混匀3分钟。

如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。

血标本在上检测，结果入库。

对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类，对于血小板等图形不好或结

果异常较大的应手工复查。

结果核对后，在半小时内报告。病房：采集血常规标本后，立即编号，试管

加盖后放于专用试管架上放入上自动混匀，

如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。

血标本在COULTERHMX上机检测，结果入库。

对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果图形不

好或结果异常较大的应手工复查。（复查条件）

结果核对后，签发报告单。如果急诊则电话报告，有血型的话，通知病房来

拿报告单。（血液项目）

项目

代号中文名单位WBC白细胞计数X109/LLY%LY淋

巴细胞分类%M0%单核细胞分类%NE%GR中性细胞分类%

LY#淋巴细胞计数X109/LM0#单核细胞计数X109/L

NE#中性细胞计数X109/LRBC红细胞计数X1012/LHGB血

红蛋白g/LHCT红细胞压积MCV平均红细胞体积flMCH平

均红细胞血红蛋白含量pgMCHC平均红细胞血红蛋白浓度g/L

RDW红细胞分布宽度PLT血小板计数X109/LMPV平均血

小板体积flPCT血小板比积%PDW血小板分布宽度

E0%嗜酸性细胞分类%B0%嗜碱性细胞分类%E0#嗜酸性

细胞计数X109/LB0#嗜碱性细胞计数X109/L特殊规定

在检验血常规时，科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,

务必作登记,复查和及时报告，以备查询。

1.血红蛋白低于100g/L.

2.白细胞低于3000/ul.

3.血小板低于8万/ul.

4.现白细胞分类异常图形时.

5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.

临床意义

WBC计数

参考范围

4-10X109/L

1、增加

1生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水

浴后及极度恐惧与疼痛等。

2病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性

单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、

白血病等。

2.减少

病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、

X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。

白细胞分类计数

染色液

1.瑞氏一姬姆萨复合染色液

I液取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉g,加甲醇分析纯振摇，ml,混匀即能

使用。液pH6.4-6.8磷酸盐缓冲液

磷酸二氢钾无水6.648

磷酸氢二钠无水2.56g

加少量蒸储水溶解，用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。

染色置玻片于染色架上，滴加染液3—5滴，使其迅速盖满血膜,

约Imin后，滴加缓冲液5—10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分

混和，5—lOmin后用水冲去染液，待干。2.快速染色液

I液：磷酸二氢钾6.648

磷酸氢二钠2.56g

水溶性伊红Y4g或伊红B2.5g

蒸储水1000ml

石炭酸40ml

煮沸，待冷备用。液亚甲蓝4g

蒸储水1000ml

高铳酸钾2.48g

煮沸，待冷备用。

色

把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s,水洗，再浸入液30s,水洗待干。

注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随着染液多

次使用，可适当延长染色时间或更换新液。

3.30s快速单一染色液

贮存液瑞氏染粉2.0g姬姆萨染粉0.68

天青E0.6g甘油10.0ml聚乙烯D比咯烷酮

PVP20.0g甲醇1000ml磷酸盐缓冲液pH6.2-6.8

磷酸二氢钾6.648磷酸氢二钠0.268石炭酸

4.0ml蒸储水加至1000ml应用液1液、2液按3：1比例

混合放置14天后备用。

染色将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。

注：加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天

青E可缩短染色时间。参考范围

LY:18.7%-47%LY#：1.0-3.3X109/LM0:3.5%-7.9%

M0#：0.2-0.7X109/LGR:46.0%—76.5%GR#：1.8-6.4

X109/L1.增多

1中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、

尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。

2嗜酸性粒细胞：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手术

后、烧伤等。

3嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及钿中毒等。

4淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻

疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。

5单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核

细胞白血病、急性传染病的恢复期等。

2.减少

1中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照

射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。

2嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。

3淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。

常见的异常白细胞形态的变化

在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的

异常变化。

中性粒细胞

1.核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞

出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：13。

1核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞

增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。

①伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于急性化脓性感染，

如大叶性肺炎等。

②白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，常见于严重感染、

机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。

2核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶正

常时多分3叶，这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼

细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示

预后不良。

毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症

时，中性粒细胞可出现形态变异。

1细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。

2毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不

等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。

3空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能

着色所致。

4Dohle体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核浆

发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。

5核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、

癌转移、严重放射损伤等有关。

退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、

破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。

淋巴细胞

淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为

常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。传

染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则

型和幼稚型。

血红蛋白

［参考值］

男：120-160g/L

女：110-150g/L

红细胞分布宽度

RDW为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异系

数CV%来表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。RDW

增大时有临床意义。

1用于缺铁性贫血IDA的诊断与疗效观察：

缺铁性贫血时RDW增大,尤其是MCV尚处于参考值范围时缺铁性贫血时MCV

应下降RDW增大更是早期缺铁的指征；MCV减小时，RDW增大更为显著，当给予

铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。产生这种现

象的原因，主要是因补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放人血与给

药前的小红细胞并存，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减

少，RDW便逐渐降至参考范围。

2用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断：

IDA和轻型地中海性贫血时，MCV均可减小。但IDA时RDW增大，而轻型地

中海性贫血时RDW正常。

3用于贫血的分类Bessman分类法：

MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性，

对红细胞体积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察，这种观察常受血

涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不能定量，RDW能较好地反映

红细胞体积的异质性，把MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善表1一

1-2o

表1-1-2BessmanMCV/RDW贫血分类

类别MCVRDW正常一一缺铁性贫血It巨幼细胞

性贫血tt溶血性贫血tt铁粒幼细胞贫血一t再

生障碍性贫血一一单纯小细胞性贫血I一注：一无变化；t增

大；I减少

平均血小板体积

MPV的临床意义要结合PLT变化才有价值。

1鉴别血小板减少的原因：

①当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；

②当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；

③血小板分布异常致血小板减少时，MPV正常。

2MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：

骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，功

能恢复时，MPV增大常先于PioT升高。MPV越小；当造血

3其他方面应用：

①MPV增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰ITP、血栓性疾

病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。

②MPV减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。

.血小板比积plateletcrit,PCT

参考范围

男0.108%-0.272%

女0.114%—0.282%

PCT与PLT和MPV正相关，所以PLT、MPV的增减均可使PCT发生变化。

增高：见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。

减低：见于再障、化疗后、血小板减少症等。

血小板体积分布宽度plateletvolumedistributionwidth,PDW

参考范围

0.155-0.18115.5%-18.1%

以血小板体积变异系数CV%表示PDW是反映血小板体积大小的异质性参

数。

增大：

急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓

性疾病等。

血细胞体积分布直方图的应用

1红细胞体积分布直方图：

将MCV和RDW配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。

①只现一个峰：见于正常人、缺铁性贫血峰左移、巨幼细胞性贫血峰右

移。

②可现两个峰：缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰

和另一个正红细胞或网织红细胞峰。巨幼红细胞性贫血给予叶酸、维生素

B12治疗有效时亦可见两个峰。

2白细胞体积分布直方图：

静脉血比毛细管血白细胞数量略低。中档的血细胞分析仪一般为三分群，它

是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱缩，不同类型的白细胞皱缩

后体积有明显差别，每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号

经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。

淋巴细胞群为35-90fl大小

中间细胞群为90—160fl大小

粒细胞群为160—450fl大小

三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数

正常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群淋

巴细胞，右峰为大细胞群粒细胞，两峰之间为中间细胞群的分布。

急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞明显增高，

这时直方图上见一个峰，峰值常在90—160fl之间。这时必须推片染色镜检。

3血小板体积分布直方图:

正常人血小板体积主要分布在2—20fl之间，21-30fl之间有少量大血

小板，一般仪器以30fl为最大的分析界标。

血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。有小红细胞或红细胞碎片

干扰时，直方图尾部会抬高。

三种红细胞参数平均值的计算

1、原理

根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、红细胞平

均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形态学分类。

2、计算方法

(1)平均红细胞体积meancorpuscularvolume,MCV：是指每个红细胞

的平均体积，以飞升fl为单位。

每L血液中红细胞体积LX1015MCV=----------------

-----------=XXfl每L血液红细胞数个(2)平均

红细胞血红蛋白含量meanCorpuscularhemoglobin,MCH：是指每个红细胞内

所含血红蛋白的平均量，以皮克pg为单位。

每L血液中血红蛋白浓度gX1012MCH=----------------

-----------=XXpg每L血液红细胞数个(3)平均

红细胞血红蛋白浓度meanCorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC：

是指平均每L红细胞中所含血红蛋白浓度g/Lo

每L血液中血红蛋白g数g/LMCHC=--------------------

-------=XXg/L每L血液红细胞比积L/L3、临床意

义

正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表

平均值MCHpgMCVflMCHCg/L正常27-3182-95

320-360大细胞性贫血tt-正常细胞性贫血

单纯小细胞性贫血II-小细胞低色素性贫血II

I注：-正常；t增大；I减少

红细胞参数

1、红细胞redbloodcell,RBC

男4.0-5.5X1012/L

女3.5-5.0X1012/L

2、血红蛋白hemoglobin,HGB

男120—160g/L

女110-150g/L

3、红细胞比积hematocrit,HCT

男0.40-0.5040%—50%

女0.35-0.4535%—45%

嗜酸性粒细胞直接计数

［标本］

EDTA-K210ul抗凝静脉血1ml

［原理］

手工法

血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他

白细胞破裂或溶解。

仪器法（VCS原理）

［试剂］

手工法

嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家继

续实验，找出最佳配方。下列3种稀释液供参考。

1.Hinkelmann液

伊红0.2g

95%石炭酸0.5ml

40%甲醛0.5ml

蒸储水加到100ml

2.乙醇一伊红稀释液

90%乙醇30ml

甘油10ml

碳酸钾1g

枸檬酸钠0.5g

20g几伊红液10ml

蒸储水加至100ml

本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10%甘油，比较粘稠,

细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。

3.伊红一丙酮稀释液

20g/L伊红液5ml

丙酮5ml

蒸储水90ml

新鲜配制效果好，每周配1次。

仪器法

COULTERHMX五分类血细胞仪及专用试剂

［操作］

手工法

1.小试管中加稀释液0.38mlo

2.常法取末梢血20口1,加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。

3.静置3—5min,用低倍镜必要时用高倍镜镜下计数10个大方格内嗜酸

性粒细胞数。

仪器法

操作同血常规

［计算］

10个大方格内嗜酸性粒细胞数X20X10=嗜酸性粒细胞/L

［参考值］

50-300X106/L50-300/u1

［附注］

1.血液稀释后应于lh内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结

果偏低或不易辨认。

2.充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要

适当延长混匀时间。

3.注意与中性粒细胞区别，以免误认，中性粒细胞一般不着色，但也有着浅

红色的，其颗粒较小。

4.住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。

5.用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。

［临床意义］

1.直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上

腺皮质功能。

2.其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。

红细胞沉降率测定

［标本］

200ul枸椽酸钠抗凝静脉血1.1ml,颠倒混匀。

［原理］

离体抗凝血液置于特制刻度测定管魏氏法血沉管内，垂直立于室温中，一

定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。

［仪器及试剂］

MONITORJI血沉仪、专用血沉管

109mmol/L32g/L枸檬酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸椽酸钠分子量

294.123.28,用蒸储水溶解，稀释至100ml。此液在室温保存不得超过2周。

［操作］

1.专用血沉管1支，加抗凝剂0.2mlo

2.静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混匀。

3.用血沉管300mmX2.5mm吸取上述混匀血液至“0”刻度处，拭去管外

附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。（MONITORJI操作）

4.记时，室温中静置lh,读出血沉仪上的读数即是血沉值。

［参考值］

男:<15mm/60min

女：V20nlm/60min

［附注］

1.红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量

和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置

位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。

2.要求

1标本采集时避免脂肪血。

2血液和抗凝剂比例要准确。

3血沉管内径要标准2.5mm,放置要垂直。

4做血沉的标本要在采集后3h内测定，并充分混匀。

3.室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量放在18-

25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉

减慢，无法校正。

［临床意义］

增快：

1生理性：

年幼小儿、经期、妊娠3个月至产后1个月。

2病理性：

急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织严重破坏、贫血、

恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒等。

血型鉴定

ABO血型鉴定

根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及

0型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正

定型，是用已知抗一A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/

和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一

A或/和抗一B。

［试剂和材料］

1.抗一AB型血、抗一BA型血及抗一A十B0型血分型血清，制备方

法见本节附注；

2.5%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；

3.受检者血清；

4.受检者5%红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。

［方法］

1.试管法

1取洁净小试管内径1OmmX60mm3支，分别标明抗一A、抗一B和抗一A

十B,用滴管分别加抗一A、抗一B和抗一A十B。分型血清各1滴于试管底部，

再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混和。

2另取洁净小试管内径10mmX60mm3支，分别标明A、B和0细胞。用滴

管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和0型5%试

剂红细胞悬液1滴，混和。

3立即以1000r/min离心Imin。

4将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集或

溶血现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

5观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、

类B或cisAB的发现。

6凝集强度判断标准

4十红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3十红细胞凝集成

数小块，血清尚清晰。2十红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细

胞。1十肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞土镜下可

见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观

mixedfield是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。

一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。2.玻片法

1取清洁玻片1张或白瓷板1块，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和

抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清1滴于标明的方格

内，再各加受检者2%红细胞悬液1滴，混和。

2另取洁净玻片一张或白瓷板1块，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B

细胞和0细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和0型试

剂红细胞悬液1滴。

3将玻片或白瓷板不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约

15min,以肉眼观察有无凝集或溶血反应。如以玻片作试验时，也可用低倍镜

观察结果。

［结果判定］

ABO血型正反定型结果

分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞抗

-A抗-B抗-A十BA细胞B细胞0细胞十一十A—十

一十十B十一一———0十十一十

十十AB--------注：十为凝集；一为一不凝集。

［附注］

1.分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。

2.试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤1次，

以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。

3.试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

4.操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易

核实是否漏加血清。

5.按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防

止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温20-24℃内进行试验，37℃可使反应减弱。

6.离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性

结果。

7.观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。

8.判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。

［正反定型结果不一致的原因］

有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种：

1.分型血清效价太低、亲和力不强。如抗一A血清效价不高，可将A亚型

误定为。型，AB型误定为B型。

2.红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，误判为

阴性反应。

3.受检者红细胞上抗原位点过少如亚型或抗原性减弱见于白血病或恶性

肿瘤:以及类B或cisAB等。

4.受检者血清中蛋白紊乱高球蛋白血症，或实验时温度过高，常引起红

细胞呈缗钱状排列。

5.受检者血清中缺乏应有的抗-A及或抗一B抗体，如丙种球蛋白缺乏症。

6.各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型

物质中和了相应的抗体.

7.由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

8.血清中有意外抗体，如自身抗一1,常引起干扰。

9.老年人血清中抗体水平大幅度下降正反定型结果不一致的解决办法如发

现ABO正反定型结果不一致，先要重复作试验1次。严格执行操作规程，使用质

量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可解决明显的问题，对一些疑难

问题月必须进一步研究。

［检查步骤］

1.另从受检者采取1份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本造成

的不符合。

2.将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗一A、抗一B、抗一A1,

抗一A十B及抗H做试验可以得到其它有用的信息。

3.对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗

体致敏。

4.用Al、Az、B、0红细胞及自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗一1,

用。型或ABO相合的脐血红细胞检查。

5.如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置

30min,用显微镜检查核实。

6.如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗一A或抗一B血清作

吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB

分泌型的人有用。

7.如试验结果红细胞呈绢钱状排列，加等渗盐水1滴，混和，往往可使绢

钱现象消失。应注意不应先加盐水1滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以

免使血清中抗体被稀释。

8.如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：

1观察细胞与抗一A及抗一B的凝集强度，与抗一A的反应要比与抗一B的

反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。

2用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗一B不凝集自身红细胞

上的类B抗原。

3检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。

4核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌感

染有关。

9.如发现多凝集现象，应考虑由遗传产生的Cad抗原活性；被细菌酶激活

的T或丁K受体；或产生机制不太明了的丁n受体所引起。多凝集红细胞具有以

下特点：

1能被人和许多家兔的血清凝集。

2能与大多数成年人的血清凝集，不管有无相应的同种抗体。

3不被脐带血清凝集。

4通常不与自身的血清凝集。

尿常规

尿液标本处理

［收集］

1.应留取新鲜尿，以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对照。

急诊患者可随时留取。

2.使用清洁有盖容器一次性容器为好。

3.容器上应贴上检验。

4.尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。止匕外，还应注意避免烟

灰、糖纸等异物混入。

5.标本留取后，应及时送验，以免细菌繁殖、细胞溶解等。

6.尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。

［防腐与保存］

1.冷藏：防腐剂随检验目的而定，一般放4℃冰箱可保存6h。

2.甲醛：用于管型、细胞的防腐，按400g儿甲醛0.5ml/100ml尿加入。

由于甲醛具有还原性，不适于尿糖等化学成分检查。

3.甲苯或二甲苯：用于尿糖、尿蛋白的防腐，按甲苯0.5ml/100ml尿

加入。

4.麝香草酚:用于检查尿中化学成分及细菌的防腐剂，每100ml加入V0.18。

［标本处理］

收到门诊标本后，核对检验项目后，倒入普通试管内液面距管中约

收到病房标本后，核对检验项目后，倒入普通试管内液面距管中约1cm,

放于UFTOO专用试管架上。［检验后处理］

标本检验后，必须经过消毒处理后才能排放入下水道内。所用盛尿容器及试

管等须经30-50g儿漂白粉澄清液或10g/L次氯酸钠液中浸泡2h,也可用5g/L

过氧乙酸浸泡30—60min,再用清水冲洗干净。

常规检查

一、尿量

随气候、出汗量、饮水量等不同而异，一般健康成人约为1.0-1.5L/24h,

即1ml/h/kg体重；小儿按k8体重计算尿量较成人多3-4倍。

二、颜色

根据尿的颜色进行报告：淡黄色、深黄色、褐黄色、红色、乳白色、深红如

浓茶、红茶色、乳白色

三）、透明度

分为透明、微浑、浑浊、明显浑浊、乳糜状等。

生化检查

［仪器及试剂］仪器试剂［操作］

把试纸条全部浸没于尿液中约3-5秒后，取出放于的试纸条架上测定。

尿沉渣检查

）非染色尿沉渣镜检（门诊）

1.取刻度离心管，倒入混合后的新鲜尿液10ml,1500r/min离心5min。

2.待离心停止后，取出离心管，弃去上层清液，留下0.2ml沉渣，轻摇离

心管，使尿沉渣有形成分充分混匀。

3.取尿沉渣0.02ml,滴在载玻片上，用18mmX18mm的盖玻片覆盖。

4、结果判断

尿沉渣镜检观察，用10X10镜头，观察其中有形成分的全貌及管型。用10

X40镜头观察鉴定细胞成分和计算数量，应观察10个视野所见最低和最高值，

记录结果。管型用倍镜鉴定，但计数数量低倍镜观察20个视野，算出一个视野

的平均值，记录结果。

）UF-100尿沉渣分析（病房）

在尿生化检查完成后，立即把试管架放于UFT00的进架仪上，进行尿沉渣

分析。如果结果发现以下情况者应手工镜检。（镜检条件）

）特殊规定

在检验尿常规时,所有工作人员及进修实习同志,如发现以下情况者，当用显

微镜进行复检,登记备查.

1.UFT00尿沉渣分析所有样本必须做镜检.

2.尿常规如发现尿干化学和尿沉渣结果发生偏差.

3.尿UF-100正常,但尿蛋白为阳性或尿NIT为阳性时.

4.尿干化学和尿UF-100均正常,病人肾科或泌尿科时.

5.其他临床指定必须镜检的.

临床意义

1、颜色

正常尿液因含尿色素可呈淡黄色，尿液浓缩时，颜色可呈深黄色，并受某些

食物及药物的影响。病理性尿色可呈褐黄色、红色、乳白色等，均应报告。尿色

深红如浓茶样见于胆红素尿；红茶色见于血尿、血红蛋白尿；乳白色可能为乳糜

尿、脓尿。

2、尿量

增多见于：

1.生理性：饮水过多，饮浓茶、咖啡及酒精类或精神紧张等。

2.病理性：常见于糖尿病、尿崩症、慢性肾炎及神经性多尿等。

减少见于：

1.生理性：饮水少、出汗多等。

2.病理性：常见于休克、脱水、严重烧伤、急慢性肾炎、心功能不全、肝

硬变腹水等。流行性出血热少尿期、尿毒症、急慢性肾功能衰竭等。

3、非染色尿沉渣镜检

1.尿内白细胞增加，表示泌尿系统有化脓性炎症。红细胞增加，常见于

肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。

2.透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾或循环

功能改变时，尿内可有少量透明管型；在肾实质性病变如肾小球肾炎时，可见较

多的颗粒管型。

3.红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。颗粒管型的出现，提示

肾单位有淤滞的现象。脂肪管型的出现，见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。

4.在慢性肾功能不全时，尿内出现肾衰竭管型，提示预后不良。

5.蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变，见于慢性肾小球肾炎

的晚期和肾淀粉样变时。

一小时尿沉渣计数［标本收集］

患者先排尿弃去，准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检标本留取时间5：

30-8：30o

［操作］

手工法

准确测量3h尿量，充分混合。取混匀尿液10ml,置刻度离心管中，1500r

/min离心5min,用吸管吸弃上层尿液9ml,留下1ml,充分混匀。吸取混匀尿

液1滴，注于血细胞计数板内。细胞共数10个大方格，管型计数20个大方格。

仪器法（UFT00操作）

准确测量3h尿量，充分混合。取混匀尿液10ml,倒入UFT00专用的试管

内，直接上机测定，读出定量的尿液细胞数。乘以100