2019年临床医学检验技师考试《微生物检验》辅导讲义 弧菌科及检验

弧菌科及检验

•考点

＞弧菌属

＞气单胞菌属

＞邻单胞菌属

【内容讲解】

共同特点：

＞G,直或微弯的杆菌

＞氧化酶阳性

＞具有极端鞭毛、动力阳性

＞发酵葡萄糖

弧菌科细菌及其初步鉴定

弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光杆菌属

极端鞭毛+---

甘露醇++--

脂酶++-+/-

NaCl+--+

0129敏感+-十+

一、弧菌属

WTO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：

①01群霍乱弧菌；

②不典型01群霍乱弧菌；

③非01群霍乱弧菌；

④其他弧菌(副溶血性弧菌)。

(-)霍乱弧菌

霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。

1.生物学特性

(1)形态染色

＞弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。

＞取患者米上水样粪便作悬滴观察,可见该菌呈穿梭样或流星状运动。

＞液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。

(2)培养特性

＞需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。

A碱性蛋白陈水：形成菌膜.

＞碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

＞硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(续)：较大黄色菌落。

＞含亚硫酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。

＞庆大霉素琼脂：菌落中心呈嬴花丁

(3)生化反应

＞分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。

＞迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。

＞氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。

＞能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。

（4）抗原结构与分型

＞耐热的特异性0抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。

＞不耐热的非特异性H抗原：H抗原为弧菌属所共有。

分类-血清学：

厂稻叶型（AC）

01群霍乱弧菌一小川型（AB）

—彦岛型（ABC）

与01群抗血清瀚集4v

不典型01群霍乱弧菌

一非01群霍乱弧菌（02〜0138）

I

0139群霍乱取菌

分类-生物学:

性状古典生物型ElTor生物型

溶血（羊红细胞）-D

血凝（鸡红细胞）-+

V-P试验-+

多粘菌素B敏感+-

噬菌体IV组裂解+-

噬菌体V组裂解-+

（5）变异性

＞形态变异

＞菌落变异

＞溶血性变异

＞毒力变异

（6）抵抗力

＞对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。

2.微生物学检验

（1）标本采集

标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。一般米常水样便采取1〜3ml,成形便采取蚕豆大小。

注：采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。

（2）检验方法及鉴定

米潜水样便、肠拭子、呕吐物等

噌菌培养快速诊断直接涂片镜检、

(碱性蛋白冻水)

分离培养(戚性琼脂或TCBS、

庆大霉素琼脂)

血清、生化鉴定

确诊报告

3.临床意义

致病物质：

＞霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。

所致疾病：

＞霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克和死亡。

免疫性：

＞病后获得牢固免疫力，再感染者少见。小肠内有slgA形成。

(-)0139型霍乱弧菌

＞属非01群霍乱弧菌，可与0139抗血清凝集。

＞治疗原则：

输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。

(三)副溶血性弧菌

•-种嗜盐性弧菌。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。

1.生物学特性

(1)形态染色：

＞G,杆菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态;

两极浓染。

＞单端单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。

(2)培养特性：

＞需氧，营养要求不高；NaCl最适浓度为35要L,在无盐培养基中不生长。所需pH为7.0〜9.5,最

适pH为7.7。

＞不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。

＞液体培养基：形成菌膜。

＞35g/LNaCl琼脂平板上：蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润,不透明。

＞副溶血性弧菌专用选择培养基：形成1〜2.5mm,稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落。

＞SS平板：不生长或长出1〜2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈黏丝状。

＞羊血琼脂平板：形成2〜3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成B溶血或a溶血。

＞TCBS琼脂：不发酵蔗糖，菌落绿色。

(3)生化反应：

＞在70g/LNaCl中生长，在无盐或100g/LNaCl中不生长。

＞能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醉、淀粉产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖,但分解阿拉伯糖。

＞靛基质、甲基红试验阳性，V-P,尿素酶试验阴性。

H2S＞

＞神奈川试验：致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。

2.微生物检验

(1)标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。

(2)检验方法及鉴定

1)增菌培养

2)分离培养：菌落湿润、混浊无黏性，呈绿色；

3)初步鉴定：

＞形态、染色、多形性、活泼动力等特点。

＞选择培养基上的菌落特征。

＞氧化酶试验阳性，在KIA上斜面不产酸，底层产酸不产气，不产生HzS。在MIU上有动力，靛基质阳

性，尿素酶阴性。

＞嗜盐试验和血清学分型。

4)最后鉴定：作进一步生化试验及毒力试验。

3.临床意义

致病因子：黏附因子(主要为菌毛)、毒素(如耐热性溶血素、TDH类毒素)。

所致疾病：食物中毒及急性胃肠炎。

4.治疗原则

选用合适的抗生素及其他抗菌药物，严重病例需输液及补充电解质。

二、气单胞菌属

广泛分布于自然界，可从水源、土壤以及人的粪便中分离。

本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。

1.生物学特性

(1)形态染色：

＞G,短杆菌，菌体两端钝圆。

＞单极鞭毛，运动极为活泼(除杀鲤气单胞菌外)。无芽胞，有窄的荚膜。

(2)培养特性：

＞需氧或兼性厌氧，最适生长温度30℃,但在。〜45℃皆可生长；

＞营养要求不高；

＞普通培养基：1〜3mm大小，微白色半透明的菌落；

＞血琼脂：灰白、光滑、湿润、凸起直径约2mm的菌落，多数菌株有B溶血环，3〜5天后菌落呈垣

绿色;

＞肠道选择培养基：大多数菌株形成乳糖不发酵菌落；

＞TCBS琼脂：生长不良；

＞液体培养基：呈均匀混浊。

(3)生化反应：

＞发酵葡萄糖产酸或产酸产气；

＞氧化酶和触酶试验阳性；

＞在65g/LNaCl中不生长。

2.微生物检验

（1）标本采集：

不同疾病采集粪便或肛拭子、血液、脓汁、脑脊液、尿液等标本。

（2）检验方法及鉴定

1）直接涂片：革兰阴性短杆菌；悬滴标本运动活泼。

2）分离培养：观察菌落。

3）鉴定：

①初步鉴定：

＞KIA：K/A、产气+/一、H2S-；

＞MIU：++-；氧化酶阳性；

②最后鉴定：

＞氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别。

＞发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别。

3.