生化分离分析技术与原理智慧树知到期末考试答案2024年

生化分离分析技术与原理智慧树知到期末考试答案2024年生化分离分析技术与原理请根据存在于层析基质上的交换容量从大到小排序（）

A:薄层层析＞柱层析＞纸层析B:柱层析＞纸层析＞薄层层析C:薄层层析＞纸层析＞柱层析D:柱层析＞薄层层析＞纸层析答案:柱层析＞薄层层析＞纸层析在层析技术中，分配系数是指（）

A:二种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的浓度比B:一种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的浓度比C:二种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的质量比D:一种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的质量比答案:一种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的浓度比关于凝胶层析加样的说法正确的是（）

A:测定样品含量的方法灵敏或床体积大时，加样量可少B:加样量多少与分离效果无关C:加样量与层析柱大小无关D:加样量与测定方法有关答案:加样量与测定方法有关下列哪项（）不是层析技术中的速率理论指出的影响柱效的因素

A:分子扩散B:理论塔板高度C:传质阻力D:涡流扩散答案:理论塔板高度以下不属于常用载气的气体是（）

A:氧气B:氢C:二氧化碳D:氮答案:氧气关于气液色谱，以下说法正确的是（）

A:各组分分配系数差异越大，越不利于分离B:各组分沿柱子移动速度取决于它们在液体固定相中的溶解程度C:利用惰性气体如氮气或氧气等通过柱子进行洗脱D:样品以液体形式从柱子前端引入答案:各组分沿柱子移动速度取决于它们在液体固定相中的溶解程度柱层析中的洗脱剂是（）

A:流动相B:固定相C:固体相D:气相答案:流动相一般来说，不是理想基质的要求的有（）

A:当配体固化和各种因素变化时，基质较易受影响B:极低的非特异吸附性C:高度亲水性D:具有适当的多孔性答案:当配体固化和各种因素变化时，基质较易受影响关于离子交换剂的处理，以下说法不正确的是（）

A:取适量的固体离子交换剂先用水浸泡，充分膨胀后即可处理B:加过量水悬浮除去细颗粒，用酸碱浸泡，除去杂质并使其带上需要的反离子C:每次用酸或碱处理后，均应先用水洗涤至近中性，再用碱或酸处理，再用水洗涤至中性后使用或装柱D:酸碱处理的次序决定了离子交换剂携带反离子的类型答案:每次用酸或碱处理后，均应先用水洗涤至近中性，再用碱或酸处理，再用水洗涤至中性后使用或装柱聚焦层析的原理之一蛋白质的行为说法不正确的是（）

A:蛋白质所带电荷取决于等电点pI与层析柱中pH的关系B:层析一开始柱中pH＜pI时，蛋白质带正电，不与阴离子交换剂结合C:随着洗脱液迁移，pH反复变化，蛋白质就在各自等电点被洗下来D:随着洗脱剂移动至环境pH＞pI时，蛋白质带正电，并从交换剂解吸附答案:随着洗脱剂移动至环境pH＞pI时，蛋白质带正电，并从交换剂解吸附高效液相色谱仪的检测系统常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器等；下列关于这三种检测器的说法中正确的是（）

A:检测器的选择主要取决于待检测组分的性质和实验对灵敏度的要求B:凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测C:荧光检测器的灵敏度是这三种检测器中最高的，常用于痕量分析和梯度洗脱样品D:紫外检测器对温度和流速变化不敏感答案:示差折光检测器抗原和抗体在体外进行的反应，又称血清学反应，可借助免疫学方法检测。对抗原或抗体进行适当的标记的方法有同位素标记法、酶标记法和荧光标记法等。下列关于这三种标记方法的说法中正确的有（）

A:与H标记相比，I标记的方法更简便且易获得高比放射性标记物B:酶标记法使用的酶类，其活性不受机体组织、血清及其提取物的影响C:用同位素标记法时，比活性（或比放射性强度）大小不会直接影响测定的灵敏度D:用荧光素标记时，被标抗体或抗原溶液一定要比较纯，效果才好答案:与H标记相比，I标记的方法更简便且易获得高比放射性标记物;酶标记法使用的酶类，其活性不受机体组织、血清及其提取物的影响;用荧光素标记时，被标抗体或抗原溶液一定要比较纯，效果才好下列关于亲和层析实质性描述中正确的有（）

A:当把固相载体装入小层析柱后，让欲分离的样品液通过该柱，无亲和力或非特异吸附的物质被缓冲液首先洗涤出来，形成第一个层析峰B:在亲和层析中，如果样品液中存在两个以上的物质与固相载体具有亲和力，它们不可能被分离开C:固化后的配体仍保持识别、束缚特异物质的能力D:把物质S从固相载体上解离下来的方法包括改变缓冲液的pH值、增加离子强度、加入抑制剂等答案:固化后的配体仍保持识别、束缚特异物质的能力;当把固相载体装入小层析柱后，让欲分离的样品液通过该柱，无亲和力或非特异吸附的物质被缓冲液首先洗涤出来，形成第一个层析峰;把物质S从固相载体上解离下来的方法包括改变缓冲液的pH值、增加离子强度、加入抑制剂等下列关于凝胶过滤时加样和洗脱的描述中正确的有（）

A:洗脱一般都以单一缓冲液（如磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液等）或者盐溶液作为洗脱液，必要的时候也可用蒸馏水作洗脱液B:所有的洗脱液均以能溶解被洗脱物质和不使其变性或失活为原则C:可以通过恒流泵或控制操作压严格控制洗脱时的流速，保证收集的每一部分洗脱体积恒定D:加样量与测定方法和层析柱大小有关，且加样量掌握得当可提高分离效果答案:加样量与测定方法和层析柱大小有关，且加样量掌握得当可提高分离效果;所有的洗脱液均以能溶解被洗脱物质和不使其变性或失活为原则;洗脱一般都以单一缓冲液（如磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液等）或者盐溶液作为洗脱液，必要的时候也可用蒸馏水作洗脱液;可以通过恒流泵或控制操作压严格控制洗脱时的流速，保证收集的每一部分洗脱体积恒定酶联免疫吸附测定法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）现在已成为分析化学领域中的前沿课题，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术（immunoenzymatictechniques）的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。下列关于酶联免疫吸附测定法的说法中正确的有（）

A:“用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，加底物显色”是双抗体夹心法的操作B:酶联免疫吸附测定法测定的对象可以是抗体也可以是抗原C:酶联免疫吸附测定法可大致分为包被、反应、洗涤、底物显色等四个步骤D:免疫吸附剂、标记物、和显色剂是ELISA中3种必要的试剂答案:酶联免疫吸附测定法测定的对象可以是抗体也可以是抗原;酶联免疫吸附测定法可大致分为包被、反应、洗涤、底物显色等四个步骤;免疫吸附剂、标记物、和显色剂是ELISA中3种必要的试剂;“用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，加底物显色”是双抗体夹心法的操作影响吸附剂操作容量的因素包括配体性质、配体在吸附剂中的含量、配体与吸附物结合时的位阻效应大小、基质的多孔性、操作条件。下列哪些操作可以有效提高吸附剂的操作容量？（）

A:在配体和基质之间引入“手臂”B:对解离常数较大的配体，增加配体在基质上的浓度C:选择合适的样品浓度、pH、离子强度及上样速度D:蛋白质和多肽作配体时，以最少的共价键连接到载体上答案:在配体和基质之间引入“手臂”;对解离常数较大的配体，增加配体在基质上的浓度;蛋白质和多肽作配体时，以最少的共价键连接到载体上;选择合适的样品浓度、p下列关于聚丙烯酰胺凝胶的说法中正确的有（）

A:一般聚丙烯酰胺凝胶均制成珠状颗粒，以干凝胶形式出售，使用前必须溶胀B:聚丙烯酰胺凝胶对芳香族的、酸性和碱性的化合物有吸附现象，并且这种吸附现象无法通过实验操作来避免C:聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺（单体）在甲叉双丙烯酰胺（双体）作交联剂，过硫酸胺作催化剂，N,N,N',N'-四甲基乙二胺（TEMED)作加速剂的条件下聚合而成D:聚丙烯酰胺凝胶要避免长期与强酸和强碱接触，否则，酰胺基将迅速发生分解（高温条件）答案:聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺（单体）在甲叉双丙烯酰胺（双体）作交联剂，过硫酸胺作催化剂，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺（TEME;作加速剂的条件下聚合而成;聚丙烯酰胺凝胶对芳香族的、酸性和碱性的化合物有吸附现象，并且这种吸附现象无法通过实验操作来避免下列关于薄层层析过程中操作及注意事项的说法中你认为正确的有（）

A:活化时应避免突然升温和降温操作,否则薄层在展层过程易于脱落B:用于柱层柱的吸附剂不能涂布薄层板C:选择展层剂的标准是分离物的极性和固定相的性质D:薄层均一性和厚度对样品的分离效果以及Rf值的重复性影响很大答案:用于柱层柱的吸附剂不能涂布薄层板;薄层均一性和厚度对样品的分离效果以及Rf值的重复性影响很大;活化时应避免突然升温和降温操作,否则薄层在展层过程易于脱落;选择展层剂的标准是分离物的极性和固定相的性质利用亲和层析可以分离酶和杂质，下面是一些关于这个实验中洗脱的描述，请选出你认为正确的选项（）

A:特异性洗脱再次利用生物学特异性，只洗脱和配基专一作用的酶B:非特异性洗脱的原理是改变缓冲液的pH、离子强度、介电常数或温度使物质构象改变C:当洗脱结束后，连续用大量的洗脱液或高浓度的盐溶液彻底洗涤柱子，再用平衡缓冲液使层析柱重新平衡；经过这样处理的柱子可再次上样，进行第二次亲和层析D:可能出现的洗脱结果只会是酶与杂质没有完全分离或酶与杂质完全分开两种答案:特异性洗脱再次利用生物学特异性，只洗脱和配基专一作用的酶;非特异性洗脱的原理是改变缓冲液的p;离子强度、介电常数或温度使物质构象改变下面是一些关于聚焦层析原理的说法，请选出你认为正确的选项（）

A:聚焦层析柱中的pH梯度溶液是在淋洗过程中自动形成的，但是随着淋洗的进行，pH梯度会逐渐向下迁移；从底部流出液的pH最后恒定于某值，这时层析柱的pH梯度消失B:不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动距离是不同的，洗脱出来的先后次序按等电点排列C:在聚焦层析中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，pH梯度溶液可以自动形成的原因是交换剂带具有有缓冲能力的电荷基团D:在聚焦层析过程中，一种样品分次加入时，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的时间进行聚焦，剩余样品再加到柱上，其聚焦过程能顺利完成答案:在聚焦层析中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，pH梯度溶液可以自动形成的原因是交换剂带具有有缓冲能力的电荷基团;聚焦层析柱中的pH梯度溶液是在淋洗过程中自动形成的，但是随着淋洗的进行，pH梯度会逐渐向下迁移；从底部流出液的pH最后恒定于某值，这时层析柱的pH梯度消失;不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动距离是不同的，洗脱出来的先后次序按等电点排列;在聚焦层析过程中，一种样品分次加入时，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的时间进行聚焦，剩余样品再加到柱上，其聚焦过程能顺利完成吸附柱层析是以固体吸附剂（极性和非极性）为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱状的一种层析方法。下面关于吸附柱层析的说法中你认为正确的有（）

A:在层析过程中推动固定相上的物质向一定方向移动的液体或气体称为流动相B:操作容量数值大表明基质对某种成分的结合力强C:固定相能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用D:外水体积、内水体积、基质体积都是随着床体积和基质性质变化而变化的答案:固定相能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用;在层析过程中推动固定相上的物质向一定方向移动的液体或气体称为流动相;操作容量数值大表明基质对某种成分的结合力强;外水体积、内水体积、基质体积都是随着床体积和基质性质变化而变化的下列关于有机溶剂沉淀法的描述中正确的有（）

A:有机溶剂加入水溶液时产生放热反应会引起蛋白质变性，所以有机溶剂需预冷至-10℃，并且在低温下进行操作B:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因与其脱水作用和介电常数有关C:用有机溶剂沉淀蛋白质时，宜在稀盐溶液或低浓度缓冲液中进行D:在某些蛋白质溶液中加入多价阳离子（如Zn2+和Cu2+等）可大大减少有机溶剂的用量答案:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因与其脱水作用和介电常数有关;有机溶剂加入水溶液时产生放热反应会引起蛋白质变性，所以有机溶剂需预冷至-10℃，并且在低温下进行操作;用有机溶剂沉淀蛋白质时，宜在稀盐溶液或低浓度缓冲液中进行;在某些蛋白质溶液中加入多价阳离子（如Zn2+和Cu2+等）可大大减少有机溶剂的用量高效液相色谱仪的分离系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。下列说法中正确的是（）

A:色谱柱的固定相由基质和固定液构成B:正相色谱适宜于分离极性化合物，反相色谱则适宜于分离非极性或弱极性化合物C:填充色谱柱的方法有干法和湿法两种，颗粒直径大于20μm的可用干法填充，颗粒直径10μm以下的采用湿法装柱D:固定相中的基质表面经过机械涂渍/化学法偶联各种基团/配体的有机化合物，对结构不同的物质有良好的选择性答案:色谱柱的固定相由基质和固定液构成;固定相中的基质表面经过机械涂渍/化学法偶联各种基团/配体的有机化合物，对结构不同的物质有良好的选择性;填充色谱柱的方法有干法和湿法两种，颗粒直径大于20μm的可用干法填充，颗粒直径10μm以下的采用湿法装柱;正相色谱适宜于分离极性化合物，反相色谱则适宜于分离非极性或弱极性化合物抽提溶液应选择对有效成分溶解度大，破坏作用小的溶液。（）

A:错误B:正确答案:正确碱性蛋白质应该选用低pH值得溶液抽提，酸性蛋白质则相反。（）

A:错B:对答案:错总交换容量受测定条件的影响。（）

A:错B:对答案:对带有强电荷基团的离子交换剂由于在任何pH值的溶液中部处于解离状态，所以交换容量基本与pH值变化有密切关系

A:正确B:错误答案:正确正相色谱是固定液的极性大于流动相的极性。（）

A:错误B:正确答案:正确当溶液中的离子强度增大时，交换剂的有效交换容量降低。（）

A:正确B:错误答案:正确有机溶剂与盐溶液一样具有脱水作用，而且介电系数比水大而导致溶剂的极性减小。（）

A:正确B:错误答案:错误当用同样直径的层析柱分离两种以上的物质时，长层析柱比短的分辨率低。（）

A:正确B:错误答案:错误凝集素在糖蛋白上的作用位点是糖蛋白中糖链的末端糖序列。()

A:错误B:正确答案:正确在聚焦层析中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团，故pH梯度溶液可以自动形成。（）

A:正确B:错误答案:正确为了提高分离效果，在一定范围内，加样体积越小越好。（）

A:正确B:错误答案:正确若用阳离子交换剂，梯度缓冲液的pH要从低到高。（）

A:对B:错答案:错双抗体夹心法是用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，加底物显色。（）

A:正确B:错误答案:正确聚酰胺薄膜层析法可用于酚类、醚类、硝基化合物、氨基酸及其衍生物等化合物的分析，因为聚酰胺能和被分离物之间形成氢键，氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。（）

A:正确B:错误答案:正确多缓冲交换剂和起始缓冲液的反离子只能是Cl。（）

A:正确B:错误答案:正确不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动之距离是不同的，洗脱出来的先后次序是按等电点排列的。（）

A:错误B:正确答案:正确不可以通过加入EDTA来减弱巯基与金属离子如铅、铁或铜等的相互作用。（）

A:正确B:错误答案:错误可将组成复杂的样品直接注入色谱柱内。（）

A:错误B