艾滋病抗体检测

艾滋病抗体检测艾滋病抗体检测第1页2规范性引用文件《艾滋病和艾滋病病毒感染诊疗标准》（中华人民共和国卫生行业标准，WS293-）GuidanceforHIVtestingintheWesternPacificRegion.WHODraft19July.Statement

fromtheSurveillanceandSurveyWorkingGroupandtheLaboratoryWorkingGrouptotheOfficeoftheGlobalAIDSCoordinator.26Nov..GuidelinesfortheuseoftheBEDassayforincidenceestimationandsurveillanceinresource-limitedcountries.Atlanta,5June.RevisedGuidelinesforHIVCounseling,Testing,andReferral.U.S.CDC.CurrentHIV-2diagnosticstrategyoverestimatesHIV-2prevalenceinChina.JournalofMedicalVirology,,81:790-797.艾滋病抗体检测第2页3HIV抗体检测试验室要求应符合《全国艾滋病检测工作管理方法（）》中对试验室人员、建筑设施和设备等条件要求。试验室质量确保和试验室安全防护按本规范相关章节要求执行。艾滋病抗体检测第3页4.1HIV抗体检测目标4.1.1HIV抗体检测可用于诊疗、血液筛查、监测等。4.1.2以诊疗为目标检测是为了确定个体HIV感染情况，包含临床检测、自愿咨询检测、依据特殊需要进行体检等。4.1.3以血液筛查为目标检测是为了预防输血传输HIV，包含献血员筛查和原料血浆筛查。4.1.4以监测为目标检测是为了解不一样人群HIV感染率及其改变趋势，包含各类高危人群、重点人群和普通人群。艾滋病抗体检测第4页4.2HIV抗体检测关键点4.2.1依据目标选择检测方法及检测策略。4.2.2严格恪守试验室SOP。4.2.3筛查试验阳性，须作确证试验。4.2.4筛查试验阴性，不应做确证试验。4.2.5筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。艾滋病抗体检测第5页检测策略5.以诊疗为目标检测策略

6.以监测为目标检测策略7.以血液筛查为目标检测策略艾滋病抗体检测第6页5.以诊疗为目标检测策略5.1常规HIV抗体检测方法和程序HIV抗体检测分为筛查试验（包含初筛和复检）和确证试验。5.1.1筛查试验5.1.1.1筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册同意、在使用期内试剂，其中酶联免疫试剂应批批检合格。推荐使用临床质量评定敏感性和特异性高试剂。5.1.1.2筛查样品HIV抗体筛查可采取血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。艾滋病抗体检测第7页5.1.1.3筛查方法（1）酶联免疫吸附试验（ELISA）可使用血液、唾液、尿液样品包含单纯检测HIV抗体第三代和可同时检测血液中HIV-1p24抗原和HIV-1/2抗体第四代试剂有效试验阴性和阳性对照必须符合试剂盒要求。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第8页（2）化学发光或免疫荧光试验采取发光或荧光底物既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体用发光或荧光仪测定结果有效试验阴性和阳性对照必须符合试剂盒要求。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第9页（3）快速检测（RT）及其它检测试验这类试验简便快速，适合用于应急检测、门诊急诊检测。普通可在10～30分钟内得出结果明胶颗粒凝集试验（PA）免疫渗滤试验，免疫层析试验有效试验质控带必须显色5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第10页5.1.1.4筛查程序（1）初筛试验依据检测目标选取符合要求筛查试剂对样品进行初筛检测，对呈阴性反应样品，可出具HIV抗体阴性（-）汇报；对呈阳性反应样品，需要深入做复检试验5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第11页（2）复检试验对初筛呈阳性反应样品，应使用原有试剂和另外一个不一样原理（或厂家）试剂，或另外两种不一样原理或不一样厂家试剂进行复检试验。假如初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包含一个抗原抗体联合试剂。如两种试剂复检均呈阴性反应，则汇报HIV抗体阴性（-）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确证试验室进行确证试验（图1）。假如抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1p24抗原或核酸检测，必要时进行随访。艾滋病检测筛查试验室复检判定为阳性反应样品，确证试验室能够直接进行确证试验。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第12页HIV抗体筛查检测流程样本阳性反应一阴一阳阴性反应初筛试验均阳性反应复检试验均阴性反应送确证试验室进行确认检测汇报阴性筛查试剂原有试剂和另一个不一样原理（或厂家）试剂或另外两种不一样原理（或厂家）试剂

艾滋病抗体检测第13页（4）筛查试验结果汇报HIV抗体筛查试验用附表1进行汇报，阴性反应汇报为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应汇报为“HIV抗体待复检”。（5）筛查试验呈阳性反应样品转送如需送上级试验室进行复检或确证检测，需要详细填写“HIV抗体复检检测单”和“高致病性病原微生物菌(毒)种或样本准运证书5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第14页5.1.2确证试验5.1.2.1确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册同意、在使用期内试剂。5.1.2.2确证样品可采取血清、血浆、滤纸干血斑样品。5.1.2.3确证方法包含免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第15页5.1.2.4确证流程使用HIV-1/2混合型试剂进行检测假如呈阳性反应，则汇报HIV-1抗体阳性（＋）假如呈阴性反应，则汇报HIV抗体阴性（－）假如不是阴性反应，但又不满足阳性判断标准，则汇报HIV抗体不确定（±）5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第16页对HIV抗体不确定（±）结果处理4周后随访检测如带型没有进展或呈阴性反应，则汇报阴性如出现阳性反应，则汇报阳性如带型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到8周8周后随访检测如带型没有进展或呈阴性反应则汇报阴性随访期间可依据需要，检测病毒核酸或p24抗原作为辅助诊疗假如出现HIV-2型特异性指示条带，依据实际情况需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2抗体确证试验或HIV-2核酸检测态疑难样品送国家艾滋病参比试验室深入分析5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第17页5.1.2.6HIV抗体确证试验结果汇报HIV抗体确证试验结果用附表3汇报符合HIV-1抗体阳性判断标准，汇报“HIV-1抗体阳性（＋）”，符合HIV-2抗体阳性判断标准，汇报“HIV-2抗体阳性（＋）”。符合HIV抗体阴性判断标准，汇报“HIV抗体阴性（－）”。如怀疑“窗口期”感染，提议深入做HIV核酸检测，尽早明确诊疗。符合HIV抗体不确定判断标准，汇报“HIV抗体不确定（±）”，在备注中应注明“4周后复检”。5.1.2.7发出确证汇报同时要做好检测后咨询5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第18页5.1.2.8HIV抗体确证汇报由检测者，复核人员和签发人员签字后，按原送检程序反馈一式三份（确证试验室一份、送检单位一份、患者一份）。如确证对象户口不属于本辖区，确证汇报应同时抄送感染者户口所在地省艾滋病确证中心试验室。其它系统确证地方人员，也应及时向当地卫生行政部门和省艾滋病确证中心试验室汇报。5.1.2.9省艾滋病确证中心试验室难以确证样品，送国家艾滋病参比试验室确证。同一受检对象样品在不一样试验室得到不一致确实证结果时，由国家艾滋病参比试验室给予仲裁。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第19页5.2其它HIV抗体检测方法和程序5.2.1VCT替换检测策略除上述常规检测程序以外，对HIV高流行地域高危人群VCT检测，可采取替换策略。5.2.1.1使用要求使用替换策略，应在确证中心试验室和确证试验室或以上试验室指定筛查试验室进行，用临床试剂质量评定敏感性和特异性高筛查试剂检测。使用该策略判断结果，阳性汇报须由确证中心试验室和确证试验室或以上试验室认可筛查试验室出具。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第20页5.2.2HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程5.2.2.1适用范围HIV感染产妇所生婴幼儿已满18个月婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染儿童。5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第21页5.2.3HIV-1新近感染检测HIV常规抗体检测方法能够判定感染和未感染状态，新近感染检测方法则用于识别近期感染与既往感染5.以诊疗为目标检测策略艾滋病抗体检测第22页检测策略5.以诊疗为目标检测策略6.以监测为目标检测策略

7.以血液筛查为目标检测策略

艾滋病抗体检测第23页各级艾滋病检测试验室所在机构每个月应填写《HIV抗体检测数及阳性人数统计报表》（附表6），并于每个月10日前完成网络直报。未开展网络直报单位，由县级疾病预防控制机构搜集信息后统一上报。8.艾滋病检测试验室检测信息上报艾滋病抗体检测第24页9.质量控制

抗体检测统计学室内质量控制试剂盒内部对照为试剂盒内提供阳性和阴性对照血清,用于判断每次试验有效性，但不能作为室内质控品使用每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部对照，而且只能在同批号试剂盒中使用。内部对照结果无效，必须重新试验艾滋病抗体检测第25页室内质控品(外部对照，外部质控品)非试剂盒组份外部质控品，包含强阳性、弱阳性和阴性质控血清，能够监控检测重复性日常检测中能够只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）2～3倍为宜(S/Co值=2～3）外部质控品作用是，判断该批临床样品检测有效性，所以，每次试验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验室内质控品能够是商品或试验室自行制备质量控制

艾滋病抗体检测第26页室内质控品使用和质量要求每一次试验必须使用室内质控品，方便监控试验重复性同时能够了解各批试剂盒批间或孔间差异室内质控品管间或瓶间变异必须小于监测系统预期变异（cv＜20%）质控品应稳定、无菌，且不含有影响试剂反应防腐剂普通采取在不一样批次检测取得最少20个数据后进行统计绘图质量控制

艾滋病抗体检测第27页=1.74±1s=1.49-1.99±2s=1.24-2.24±3s=0.99-2.49质控图艾滋病抗体检测第28页外部对照S/CO值超出±2s，系统处于告警状态，应予注意，是否能够继续检测需要深入观察质控图判定和分析-①告警艾滋病抗体检测第29页质控图判定和分析-②失控外部对照S/CO值超出±3s，系统处于失控状态，此次试验结果不能被接收，需查找原因，重新检测艾滋病抗体检测第30页质控图判定和分析-③位移，④趋势连续几个（3-5次）质控对照值都落在均值一侧称之为位移，提醒试验条件发生了较大改变，如使用新批号试剂盒、使用新质控品、试验员更换、孵育温度改变、仪器故障等当连续几个（5-7个）质控对照值几乎按一个方向分布时称之为趋势，通常由参数迟缓改变引发，如试剂失效和移液器逐步不准确等艾滋病抗体检测第31页艾滋病抗体检测第32页9.1.3.4质控图分析及失控处理试验室应建立质控图分析及失控情况处理程序。当质控已经有计划并恰当地执行时，要求可靠均值和标准差用于计算质控限，将假失控概率降到最低。当出现失控时，对原有外部质控品重复测定或更换新外部质控品进行测定不是最有效方法，必须找出问题发生原因，找出解除问题方法，并消除原因，预防未来出现一样问题。艾滋病抗体检测第33页出现一次2s范围改变时，系统处于告警状态，应予注意，是否能够继续检测需要深入观察。出现以下情况时，应暂停检测查找原因： （1）出现一次超出3s范围改变； （2）连续两次出现同一方向超出2s范围改变； （3）连续四次出现同一方向超出1s范围改变； （4）连续10次结果都在1s范围内，但落在均值线同一侧。9.1.3.4质控图分析及失控处理艾滋病抗体检测第34页绘制和分析质控图关键点（1）分析数据时，超出2s或3