黄病毒专题知识讲座

黄病毒专题知识讲座黄病毒专题知识讲座第1页大多数黄病毒共同特征1.病毒呈球形，衣壳呈20面体立体对称，外有类脂包膜，其表面有HA2.核酸大多为+ssRNA，病毒均在细胞内增殖3.病毒对酸、温度敏感，在室温即可个别失活。易被乙醚、氯仿、去氧胆酸钠灭活4.大多数虫媒病毒引发自然疫源性疾病，其中许多疾病是人畜共患黄病毒专题知识讲座第2页5.节肢动物(如蚊、蜱、白蛉等)节肢动物既是储存宿主又是传输媒。因为节肢动物受地理与气候影响，故虫媒病毒所致疾病有显著季节性和地域性黄病毒专题知识讲座第3页6.虫媒病毒感染临床表现各种多样，主要有以下5种类型：①脑炎或脑脊髓炎如流行性乙型脑炎、森林脑炎②无特殊部位全身性感染如登革热③主要表现为肝炎全身性感染如黄热病④主要表现为出血热全身性感染如新疆出血热⑤主要表现为关节炎全身性感染如罗斯河热黄病毒专题知识讲座第4页第一节流行性乙型脑炎病毒1934年在日本首先分离出此病毒。为了和甲型脑炎相区分，故命名为日本乙型脑炎病毒。我国将其定名为流行性乙型脑炎病毒。此病毒经过蚊子传输，引发流行性乙型脑炎。当前我国除西藏、青海、新疆3省(区)外，其它省、市、自治区(包含台湾省)都有流行性乙型脑炎流行黄病毒专题知识讲座第5页

一、生物学性状流行性乙型脑炎病毒，含有经典虫媒病毒特征。病毒呈球形，20面体对称，核酸为＋ssRNA，衣壳外有脂蛋白包膜。已知其结构蛋白有三种，即M、C和E。M位于病毒包膜内面，C在衣壳中，E是镶嵌在病毒包膜上糖蛋白，含有血凝活性，能凝集雏鸡、鸽和鹅红细胞，其对应抗体能抑制血凝并有中和病毒作用黄病毒专题知识讲座第6页病毒在动物、鸡胚及组织细胞内均能增殖。最敏感动物是小鼠、乳鼠。鼠龄越小，易感性越高。幼鼠脑内接种病毒后，经3-5d潜伏期，出现耸毛、蜷伏、神经系统兴奋性增高、肢体痉挛等症状，很快转入麻痹期而死亡。受感染鼠脑组织含有大量病毒。在地鼠及猪肾原代细胞中增殖引发显著CPE黄病毒专题知识讲座第7页流行性乙型脑炎病毒抵抗力弱，对热敏感，56℃30min可灭活。对乙醚、丙酮也较敏感，低温中能较长时间保留。该病毒抗原性稳定，抗原性单一，所以疫苗预防效果很好黄病毒专题知识讲座第8页二传输路径

（一）传输媒介在我国主要是3带喙库蚊、致乏库蚊和白伊蚊。在广东、福建等地蠛蠓也可能是传输媒介之一。流行性乙型脑炎在我国南方流行高峰是6-7月，华北为7-8月，东北为8-9月，均与各地蚊虫密度高峰相一致黄病毒专题知识讲座第9页（二）传染源与储存宿主流行步骤流行性乙型脑炎病毒在自然界中主要存在于蚊及家畜体内。蚊是传输媒介，蚊可携带病毒越冬及经卵传代，所以蚊又是乙脑病毒长久储存宿主。病毒在蚊肠与唾液腺内增殖至一定数量后，蚊(带毒期14d)叮咬猪(幼猪多见)、牛、羊、马等家畜使之感染。家畜感染普通仅有短暂(4d左右)病毒血症，不出现显著症状。在猪体内增殖病毒再经3节吻库蚊传给人黄病毒专题知识讲座第10页带度越冬蚊

猪等病毒血症4d

蚊带毒期14d长久储存宿主经卵传代蚊人终末宿主猪等扩增宿主

流行性乙型脑炎病毒在自然界循环黄病毒专题知识讲座第11页（三）、致病性与免疫性

乙性脑炎发病过程

叮咬

蚊子人血管内皮增殖入血局部淋巴结

绝大多数肝、脾单核Mφ入血钝挫感染

增殖少数人（0.1%）侵入脑组织脑炎黄病毒专题知识讲座第12页

第2次病毒血症期，引发一系列临床表现，发烧、寒战及全身不适等症状。若不再继续发展，则成为顿挫感染，数日后可自愈。但有少数(0.1%)患者体内病毒可越过血脑屏障而进入脑组织增殖，造成脑实质及脑膜病变，临床表现为突然高烧、头痛、呕吐或惊厥、昏迷等脑膜刺激症状及脑炎症状。死亡率很高，普通为10%-30%。个别患者恢复后可留下精神障碍、运动障碍等复杂后遗症

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(三)免疫性机体感染乙型脑炎病毒后，主要产生中和抗体，但完整血脑屏障和细胞免疫也有一定作用。首先出现IgM，随即产生IgG抗体，IgG在体内连续长，甚至终生,病后或隐性感染后均可取得持久免疫。以往流行性乙型脑炎患者多为儿童，多年因为儿童和青少年广泛接种乙脑疫苗，故成人和老年人发病率相对增高黄病毒专题知识讲座第14页

四、微生物学检验法(一)病毒分离因为病毒血症连续时间短暂，病毒滴度低，故从血液或CSF分离病毒极为困难。从尸体分离病毒较为轻易，即取脑脊液或死者脑组织制成悬液用C6/36、BHK-21等传代细胞分离或进行小鼠脑内接种分离病毒。有些人用脑穿刺针经鼻孔穿通颅底骨，取下丘脑黑质部进行病毒分离，(二)病毒抗原检测用免疫荧光和ELISA法检验发病早期患者血液或脑脊液中病毒特异抗原。有早期诊疗意义黄病毒专题知识讲座第15页

三血清学检验因为血凝抑制(HI)抗体、补体结合(CF)抗体及中和(NT)抗体出现和消失时间不一样，因而检出意义各异1.异性IgM检测用ELISA检测患者血清和脑脊液中特特异性IgM抗体，普通在病后4d就可出现，2-3w达高峰。所以HI试验可用于早期诊疗。大多数患者病后4-8d可查出特异性IgM，急性期患者约90%为阳性黄病毒专题知识讲座第16页

2.HI试验需采双份血清，抗体效价≥4倍有断断意义。单份血清效价1：320有诊疗意义

3.CF试验

CF抗体常于病后第2w出现，3-5w达高峰。所以CF试验在后期血清抗体滴度比早期升高≥4倍，即可诊疗。CF抗体普通只连续2-4个月，因而只有新近感染者才能测出CF抗体

4.NT试验本试验虽特异性和敏感性均高，但因为NT抗体产生后在体内连续时间较长，故不宜做临床诊疗用，常见于流行病学调查黄病毒专题知识讲座第17页五、防治标准防蚊、灭蚊和易感人群疫苗接种是预防本病关键。另外，因为该病流行是猪蚊循环，人是偶发感染宿主，所以在流行季节前，先给猪接种疫苗，中止其循环，就能有效降低人群发病率。当前我国使用地鼠肾灭活疫苗，人群保护率可达60%-90%。采取皮下注射2次，间隔7-10d。第2年加强注射1次。疫苗接种应在开始流行前1个月完成，重点对象10岁以下儿童和从非流行区进入流行区人员。治疗无特效药黄病毒专题知识讲座第18页第2节登革病毒登革病毒属于黄病毒科，是登革热病原体。登革热是一个由伊蚊传输急性传染病，多发生于热带和亚热带地域。在我国广东、广西和海南等地域曾经有过地方性暴发流行，但当前已基础上控制了疫情黄病毒专题知识讲座第19页

一生物学性状

病毒颗粒直径约55nm，呈哑铃形、棒形或球形。核酸为单股正链RNA，和蛋白质组成衣壳为20面体立体对称结构，外有糖蛋白包膜。依据包膜蛋白抗原性不一样分为1-4个血清型。各型病毒之间抗原性有交叉黄病毒专题知识讲座第20页二致病性与免疫性传输媒介为埃及伊蚊和白纹伊蚊。病毒在蚊→人→蚊间循环传输。常因RNA突变或外来毒株侵入而形成新毒株，从而引发登革热暴发流行病毒感染人体后可在毛细血管内皮细胞及单核细胞中增殖，然后释放入血形成病毒血症

黄病毒专题知识讲座第21页登革病毒感染多为隐性感染。发病患者临床表现主要有普通型登革热和登革热-休克综合征2种类型，主要表现有发烧、肌肉痛和关节酸痛、淋巴结肿胀、皮肤出血和休克等症状。前者病情较轻，后者病情较重黄病毒专题知识讲座第22页

致病机制可能是免疫病理损伤起主要作用，病毒包膜蛋白(E蛋白)刺激机体产生IgG抗体Fc段与单核细胞Fc受体结合后，能显著促进病毒对细胞感染，即病毒进入单核细胞后，病毒不但不被杀灭，反而大量增殖，并经过体内细胞因子致敏T细胞，造成严重免疫病理损伤。另外，大量登革病毒抗原与抗体在血循环中形成免疫复合物，可激活补体造成血管通透性增高，引发休克黄病毒专题知识讲座第23页三微生物学检验

登革病毒微生物学诊疗主要依靠病毒分离和血清学诊疗

1.病毒分离普通采患者发病早期血清接种白纹伊蚊C6／36株细胞分离病毒，亦可经胸内接种巨蚊成蚊，或脑内接种巨蚊幼虫进行分离黄病毒专题知识讲座第24页

2.血清学方法普通采集患者早期与恢复期血清测定HI抗体或CF抗体，如抗体滴度≥4倍则有诊疗意义应用ELISA法检测患者血清IgM抗体，有利于登革热早期诊疗。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)可快速检测病人血中病毒核酸

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四．防治标准当前尚无有效疫苗，预防该病主要主要办法是防蚊和灭蚊。无特效治疗方法黄病毒专题知识讲座第26页

第三节森林脑炎病毒森林脑炎病毒又名苏联春夏型脑炎病毒，是蜱媒脑炎病毒群组员之一。此病毒引发森林脑炎属于自然疫源性疾病，在疫区主要感染野外工作者。该病由蜱传输，主要发生在春夏季(5-7月份)，在我国东北和西北一些林区曾有流行。

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一、生物学性状森林脑炎病毒形态结构与乙型脑炎病毒相同,森林脑炎病毒动物感染范围较广，其中以小鼠易感染性最高。各种路径均能感染，脑内接种4-5d后即可发生脑炎。病毒在鸡胚、组织培养细胞内均可增殖。但只有用猪肾细胞培养时，出现显著CPE

黄病毒专题知识讲座第28页森林脑炎病毒对外界抵抗力不强，加热60℃经10min即被灭活，对乙醚及来苏儿等敏感森林脑炎病毒抗原性比较单一黄病毒专题知识讲座第29页二、致病性与流行步骤森林脑炎病毒主要传输媒介是蜱。病毒能在蜱体内增殖中，也能经卵传输。自然情况下，病毒由蜱传染给森林中一些动物，组成感染循环。蜱在春夏季大量繁殖，易感人群进入林区，被蜱叮咬而感染。另外，山羊被带病毒蜱叮咬之后，在2-10d排病毒于羊奶中。人如饮用此生奶，也会受感染黄病毒专题知识讲座第30页

临床表现及免疫力人受感染，潜伏期10-14d，起病急，突然出现高热，头痛、恶心、呕吐，继之出现昏睡、外周型弛缓性麻痹等症状。病死率普通为20%-30%，存活者中大约30%-60%留有后遗症病后免疫力持久黄病毒专题知识讲座第31页三、微生物学检验法分离判定病毒方法与乙型脑炎病毒大致相同，可从病死者脑组织分离判定病毒。试验室工作人员分离病毒时应尤其注意防护。黄病毒专题知识讲座第32页

四、防治标准森林脑炎预防应以灭蜱及防蜱叮咬为重点，尤其是林区工作者应该采取防护办法。接种灭活疫苗有预防效果。给患者早期注射高效价免疫血清可减轻病情黄病毒专题知识讲座第33页

第31章出血热病毒

病毒性出血热主要是指一些由节肢动物或啮齿类动物等传输、含有出血和发烧等症状、病毒感染所致疾病。其病原体统称为出血热病毒。我国当前已发觉有汉坦病毒、新疆出血热病毒和登革热病毒

黄病毒专题知识讲座第34页第一节

汉坦病毒汉坦病毒在分类上归属于布尼雅病毒科汉坦病毒属。1976年韩国学者李镐汪等首次成功地用间接免疫荧光法在黑线姬鼠肺组织中发觉了HFRS病毒抗原，随即又用A549和VeroE-6细胞分离到肾综合征出血热（HFRS）病毒毒株。这个毒株是在韩国汉坦河不远HFRS疫区分离到，因而命名为汉坦病毒，作为HFRS病毒原始毒株。当前最少有六个型黄病毒专题知识讲座第35页一生物学性状形态与结构汉坦病毒呈球形，直径122nm，有包膜，核衣壳为螺旋对称。核酸为-ssRNA，分大(L)、中(M)和小(S)3个节段，其中L编码多聚酶，M编码糖蛋白，S编码核蛋白。HA抗原决定簇。病毒于pH6.0-6.4能凝集鹅红细胞汉坦病毒黄病毒专题知识讲座第36页

(二)培养特征本病毒可在人肺癌细胞株(A549)、非洲绿猴肾细胞(VeroE-6)等各种细胞中增殖，增殖迟缓，普通不引发显著CPE。常见免疫荧光法测定感染细胞胞浆内病毒抗原作为病毒增殖指标黑线姬鼠为敏感动物，经皮下、腹腔、鼻、口接种均可感染。接种后10d左右可在鼠肺、肾、肝等脏器发觉大量病毒。亦可在大鼠、裸鼠体内生长黄病毒专题知识讲座第37页

(三)抗原性

现已查明汉坦病毒抗原与其它出血热病毒无关，也与布尼雅病毒科其它属病毒无关。但汉坦病毒各株抗原之间存在差异。汉坦病毒有14个不一样型别，我国流行主要是汉坦病毒和汉城病毒

(四)抵抗力

汉坦病毒对热、酸(pH＜3)、UV、γ射线等敏感，对各种脂溶剂亦敏感黄病毒专题知识讲座第38页

二、流行步骤我国汉坦病毒传染源主要是黑线姬鼠、褐家鼠和林区大林姬鼠。HFRS流行季节性与鼠类繁殖活动及其与人接触时间相关。普通认为病毒在鼠体内增殖，随唾液、尿、呼吸道分泌物及粪便长久大量排毒污染周围环境，经呼吸道、消化道或直接接触等路径传输给人。几个厉螨和小盾恙螨不但是传输媒介，亦是储存宿主

黄病毒专题知识讲座第39页三、致病性与免疫性人被病毒感染后，经1-3w潜伏期，出现发烧、出血及肾脏损害为主临床症状。经典临床经过可分5期，即发烧期、低血压(休克)期、少尿期、多尿期及恢复期，病死率为3%-20%不等，普通为5%左右。病死率高低除与病型不一样、病情轻重相关外，与治疗早晚、办法得当是否也有很大关系黄病毒专题知识讲座第40页关于本病发病机理可能除病毒直接在胞浆内增殖造成细胞脏器损伤和作用于血管引发血管舒缩功效障碍、微循环障碍以及血管通性增高外，还可能有免疫病理反应参加。最近报道，病毒侵犯骨髓前体细胞，从而妨碍免疫细胞正常发育，因而造成免疫功效失调及血小板严重降低。病后可获持久免疫力，再次感染发病者极少黄病毒专题知识讲座第41页

三、微生物学检验法非经典患者在疾病早期症状类似流感，不易做出确诊，故用微生物学检验方甚为主要

(一)病毒分离及判定取病人急性期血液、尸检材料或野鼠脏器等。用VeroE-6单层细胞培养法，也可采取2-4d龄乳鼠、黑线姬鼠等接种法分离病毒；再以免疫荧光法测定单层细胞内或鼠肺组织片内特异抗原，作为病毒增殖指标。最终经过形态学、血清学判定或PCR等方法确定是否为汉坦病毒黄病毒专题知识讲座第42页

(二)血清学诊疗

取病人早期及恢复期双份血清，常见IFA、ELISA、HI等方法检测特异性IgM或IgG抗体，如单份血清IgM抗体阳性或双份血清IgG抗体效价效价升高4倍以上即有诊疗意义。应用抗体捕捉ELISA检测特异IgM，其敏感性和特异性均高，适合用于早期诊疗黄病毒专题知识讲座第43页

四、预防标准1.毁灭传染源采取有效办法灭鼠，并注意处理鼠排泄物，加强试验动物管理。2.切断传输路径加强个人防护，防止呼吸道及接触感染。并确保食品和个人卫生。3.提升易感染人群免疫力，用灭活疫苗接种效果很好黄病毒专题知识讲座第44页

第三节新疆出血热病毒

1965年于我国新疆巴楚地域等曾发生一个出血热，最初称为“巴楚出血热”，后改称“塔里木出血热”，现在统一命名为新疆出血热(XHF)。病原体是于1966年首次从我国新疆塔里木盆地出血热病人血液、尸体脏器及硬蜱中分离到一个病毒。分类上归属于布尼雅病毒科内罗病毒属。黄病毒专题知识讲座第45页

一生物学性状病毒颗粒呈球形或椭圆形，基因组为单股负链RNA，核衣壳呈20面体对称，外有包膜乳鼠对XHF病毒最为敏感，常见于病毒分离及传代黄病毒专题知识讲座第46页

二致病性与免疫性新疆出血热是一个存在于荒漠、牧场自然疫源性疾病，有严格地域性和显著季节性。野生动物和家畜是自然宿主和传染源人被带毒蜱叮咬或与病畜直接接触(经过破损皮肤)病毒侵入人体，经5-7d潜伏期发病，临床以发烧和出血为主要特征人感染后产生NT抗体、CF抗体和HI抗体。NT抗体出现较早，维持较久。病后可取得持久免疫力黄病毒专题知识讲座第47页

三微生物学检验法主要是病毒分离判定和双份血清抗体检验

四防治标准当前我国已研制成功精制灭活乳鼠脑疫苗，该疫苗安全，但其预防效果尚待确定防治办法主要是防蜱叮咬和灭蜱；对病人要严格隔离治疗，病人血液、分泌物、排出物等要消毒处理，医务人员要加强防护，预防感染黄病毒专题知识讲座第48页第32章胞疹病毒疱疹病毒是一类中等大小、结构相同、有包膜DNA病毒。现已发觉110各种以上，依据生物学性状又分α、β、γ三个亚科。广泛分布于哺乳类、鸟类、两栖类、鱼类等动物中。与人类相关疱疹病毒称为人类疱疹病毒(HHV)黄病毒专题知识讲座第49页

疱疹病毒共同特征：1.病毒颗粒呈球形，关键为双股线形DNA组成蛋白衣壳为20面体立体对称，由162个壳粒组成，有包膜2.除EBV及HHV-6和HHV-7型外，均能在人2倍体细胞内复制，产生显著CPE，并有核内嗜酸包涵体。病毒可经过细胞间桥直接扩散，造成病变发展。感染细胞与邻近未感染细胞融合，形成多核巨细胞

黄病毒专题知识讲座第50页3.病毒感染宿主细胞后，可引发各种感染类型：①显性感染病毒大量增殖，并使细胞破坏，出现临床症状②潜伏感染病毒不增殖，也不破坏细胞，病毒与宿主细胞处于暂时平衡状态，病毒基因组表示受到抑制。一旦病毒被激活，可转为显性感染

黄病毒专题知识讲座第51页③整合感染病毒基因组一个别可整合于宿主细胞DNA中，造成细胞转化。这种作用与一些疱疹病毒致癌机理有亲密关系④先天性感染病毒经胎盘感染胎儿，可引发先天畸形

黄病毒专题知识讲座第52页第一节单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒(HSV)是疱疹病毒经典代表，因为在感染急性期发生水疱性皮疹即所谓单纯疱疹而得名。本病毒以引发各种类型感染和疾病而日益受到重视黄病毒专题知识讲座第53页疱疹病毒(共同特征）

1.病毒颗粒呈球形，关键为双股线形DNA组成，蛋白衣壳为20面体立体对称，由162个壳粒组成，有包膜。疱疹病毒结构模式图黄病毒专题知识讲座第54页2.除EBV及HHV-6和HHV-7型外，均能在人2倍体细胞内复制，产生显著CPE，并有核内嗜酸包涵体。病毒可经过细胞间桥直接扩散，造成病变发展。感染细胞与邻近未感染细胞融合，形成多核巨细胞黄病毒专题知识讲座第55页3.病毒感染宿主细胞后，可引发各种感染类型①显性感染病毒大量增殖，并使细胞破坏，出现临床症状②潜伏感染病毒不增殖，也不破坏细胞，病毒与宿主细胞处于暂时平衡状态，病毒基因组表示受到抑制。一旦病毒被激活，可转为显性感染黄病毒专题知识讲座第56页③整合感染病毒基因组一个别可整合于宿主细胞DNA中，造成细胞转化。这种作用与一些疱疹病毒致癌机理有亲密关系④先天性感染病毒经胎盘感染胎儿，可引发先天畸形黄病毒专题知识讲座第57页第一节单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒(HSV)是疱疹病毒经典代表，因为在感染急性期发生水疱性皮疹即所谓单纯疱疹而得名。本病毒以引发各种类型感染和疾病而日益受到重视

一、生物学性状HSV含有经典疱疹病毒科病毒形态特征。其基因组为两个相互接连长片段和短片组成双股线状DNA。HSV有两种血清型：HSV-1和HSV-2。两型病毒DNA有50%同源性黄病毒专题知识讲座第58页HSV可在各种细胞中增殖，最常见原代仔兔肾、人胚肺、人胚肾、人羊膜等细胞培养。病毒感染细胞后，CPE发展快速，表现为细胞肿胀、变圆和产生嗜酸性核内包涵体HSV对动物感染范围相当广泛。常见试验动物有家兔、豚鼠、小鼠等。因为接种路径不一样，感染结果也不一样。如脑内接种引发疱疹性脑炎；接种角膜引发疱疹性角膜炎；接种鸡胚绒毛尿囊膜则可形成白斑黄病毒专题知识讲座第59页

二、致病性和免疫性

HSV在人群中感染较为普遍。患者及健康病毒携带者是传染源。病毒常存在于疱疹病灶或健康人唾液中，主要经过直接亲密接触与两性接触而传输。病毒经呼吸道、生殖器粘膜及破损皮肤、眼结膜侵入体内。人感染HSV后大多无显著症状，常见临床表现是粘膜或皮肤局部疱疹，偶然可产生严重甚至致死全身性感染。HSV感染可表现为原发感染、潜伏感染及先天性感染黄病毒专题知识讲座第60页

(一)原发感染原发感染多见于6个月-2岁婴幼儿。因为6个月以后婴儿来自母体抗体多数消失，此时轻易发生HSV-1原发感染。约90%是隐性感染。HSV-1最常引发龈口炎，在牙龈、咽颊部粘膜产生成群疱疹，疱疹破裂后形成溃疡。另外，还可引发疱疹性角结膜炎、皮肤疱疹性湿疹或疱疹性脑炎。HSV-2原发感染多发生于性交后，主要引发生殖器疱疹。原发性生殖器疱疹约80%由HSV-2引发，少数由HSV-1所致黄病毒专题知识讲座第61页

(二)潜伏感染和复发人体在HSV原发感染后很快产生特异性免疫，能将大个别病毒去除。但少数病毒可长久存留于神经细胞内，不表现临床症状，机体与病毒处于相对平衡状态

黄病毒专题知识讲座第62页HSV-1潜伏于三叉神经节和颈上神经节，HSV-2潜伏于骶神经节。各种非特异性刺激，如发烧、严寒、情绪担心等，使这种平衡关系遭到破坏，潜伏病毒被激活重新增殖，借助于神经轴突，经过轴浆下行到感觉神经末梢支配上皮细胞内继续增殖，引发复发性局部疱疹HSV再次复发往往是在同一部位。比如，原发性疾病是龈口炎，复发普