巴比妥类药物的分析

关于巴比妥类药物的分析基本要求掌握：巴比妥类药物的鉴别方法，含量测定的银量法、溴量法和紫外分光光度法。熟悉:巴比妥类药物的结构、性质和分析方法的关系；特殊杂质的检查方法；含量测定的酸碱滴定法。了解：HPLC法、CE法、GC-MS法在本类药物含量测定中的应用。第2页,共64页，2024年2月25日，星期天基本内容一、巴比妥类药物的基本结构与主要性质二、鉴别试验三、特殊杂质检查方法四、含量测定练习与思考第3页,共64页，2024年2月25日，星期天结构剖析理化特征鉴别试验杂质检查含量测定练习与思考第4页,共64页，2024年2月25日，星期天一、结构特征与典型药物（一）基本结构巴比妥酸的衍生物，结构通式如下巴比妥酸的5，5－取代物1，5，5－取代物C2位硫取代物母核：巴比妥酸，丙二酰脲的结构第5页,共64页，2024年2月25日，星期天第6页,共64页，2024年2月25日，星期天第7页,共64页，2024年2月25日，星期天第8页,共64页，2024年2月25日，星期天第9页,共64页，2024年2月25日，星期天巴比妥类药物结构:性质：应用：1,3-二酰亚胺鉴别弱酸性苯环、丙烯基、S鉴别含量测定返回各有特性结构决定性质丙二酰脲

丙二酰脲类反应

鉴别、含量测定第10页,共64页，2024年2月25日，星期天1.弱酸性1，3-二酰亚胺基团，能发生酮式-烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离（二）主要性质第11页,共64页，2024年2月25日，星期天弱酸性弱碱性白色结晶易溶于有机溶剂易溶于水H+用于：分离、鉴别、检查和含量测定。第12页,共64页，2024年2月25日，星期天(1)巴比妥类药物的水解

JP(14)采用这一反应鉴别异戊巴比妥和巴比妥。

2.水解反应(2)巴比妥类药物钠盐的水解第13页,共64页，2024年2月25日，星期天

3.与重金属反应（丙二酰脲基团）可溶性一银盐难溶性二银盐白色↓

(1)与Ag+的反应第14页,共64页，2024年2月25日，星期天(2)与Cu2+的反应巴比妥类+铜吡啶试液吡啶紫色或紫色↓硫喷妥钠+铜吡啶试液吡啶绿色第15页,共64页，2024年2月25日，星期天

(3)与Co2+的反应第16页,共64页，2024年2月25日，星期天(4)与Hg2+的反应白色第17页,共64页，2024年2月25日，星期天加乙醇后，其反应产物可转变为棕红色蓝色

4.与香草醛的反应第18页,共64页，2024年2月25日，星期天

5.紫外吸收光谱特征

主要特点：随着电离级数的不同，巴比妥类药物的紫外光谱会发生显著的变化。即，溶液pH值的不同以及取代基的不同会对紫外光谱产生影响。第19页,共64页，2024年2月25日，星期天A.H2SO4溶液（0.05mol/L）B.pH9.9缓冲液C.NaOH溶液（0.1mol/L）巴比妥类药物的紫外吸收光谱硫喷妥的紫外吸收光谱HCl溶液(0.1mol/L)－－－

pH10的碱性溶液第20页,共64页，2024年2月25日，星期天pH5,5-取代物（nm）1,5,5-取代物（nm）C2硫代（nm）1(原形)无无287（大）238（小）10(一级电离)240240304（大）255（小）13(二级电离)255240304第21页,共64页，2024年2月25日，星期天

6.色谱行为特征（主要用于鉴别）

（1）TLC

一般采用对照品比较法，要求供试品主斑点应与对照品斑点一致。（2）HPLC

与对照品比较保留行为，主要是比较保留时间和相对保留时间。第22页,共64页，2024年2月25日，星期天二、鉴别试验

(一)丙二酰脲鉴别反应这一鉴别试验已经收载在中国药典附录中的“一般鉴别试验”项下。包括银盐反应和铜盐反应，分别生成沉淀和呈色反应。第23页,共64页，2024年2月25日，星期天

例如：

苯巴比妥钠的鉴别中国药典的方法：取本品约0.5g→

加水溶解→加过量稀盐酸→白色结晶性沉淀→过滤→用水洗净沉淀→105℃干燥，熔点应为174℃～178℃。(二）测定熔点

巴比妥类的钠盐＋酸→游离巴比妥类药物↓→过滤→洗涤→干燥→测熔点第24页,共64页，2024年2月25日，星期天

（三）利用特殊取代基或元素的鉴别试验

1.利用不饱和取代基的鉴别试验司可巴比妥钠原理：含丙烯基，可发生加成或氧化反应（碘、溴）（高锰酸钾）①与碘试液反应第25页,共64页，2024年2月25日，星期天

②与高锰酸钾的反应原理：具有还原性，在碱性溶液中与高锰酸钾反应，使紫色的高锰酸钾还原成棕色的二氧化锰。第26页,共64页，2024年2月25日，星期天

2.利用芳环取代基的鉴别试验

苯巴比妥①硝化反应

苯巴比妥或其钠盐，与硝酸钾和硫酸共热，生成黄色硝基化合物。黄色第27页,共64页，2024年2月25日，星期天③与甲醛-硫酸的反应苯巴比妥与甲醛-硫酸反应，生成玫瑰红色产物②与亚硝酸钠-硫酸的反应苯巴比妥与亚硝酸钠-硫酸反应生成橙黄色产物，并随即转变为橙红色。第28页,共64页，2024年2月25日，星期天

3.硫元素的反应

硫喷妥钠可将其硫元素转变为无机硫离子，而显硫化物的反应。如硫喷妥钠在氢氧化钠试液中与铅离子反应生成白色沉淀；加热后，沉淀转变成黑色的硫化铅。第29页,共64页，2024年2月25日，星期天思考题如何通过化学法区分并鉴别四种失去标签的巴比妥类药物？巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、硫苯妥钠返回第30页,共64页，2024年2月25日，星期天三、特殊杂质检查（3）中性或碱性物质（提取重量法）（杂质）第31页,共64页，2024年2月25日，星期天四、含量测定

银量法溴量法巴比妥类药物的含酸碱滴定法量测定方法紫外分光光度提取重量法

HPLC法、GC法第32页,共64页，2024年2月25日，星期天（一）银量法优点：操作简便，专属性较强。缺点：受温度影响较大；以溶液出现浑浊来指示终点难以观察。1.原理：巴比妥类一银盐二银盐↓Na2CO3AgNO3终点：电位法（Ag－玻璃电极系统）AgNO3第33页,共64页，2024年2月25日，星期天

2.测定方法与计算例如:异戊巴比妥(M=226.28)及其钠盐(M=248.26)的测定：溶剂：甲醇碱性试液：新配3％无水Na2CO3

滴定液：AgNO3滴定液（0.1mol/L）终点：电位法第34页,共64页，2024年2月25日，星期天1.原理：

司可巴比妥钠含不饱和键，与溴定量地发生加成反应（定量过量）Br2+2KI2KBr+I2（剩余）I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6（二）溴量法近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失将滴定的结果用空白试验校正第35页,共64页，2024年2月25日，星期天原料药剩余滴定法2.计算

注意事项：（1）操作中要防止溴和碘的逸失。（2）平行条件进行空白试验可校正滴定过程和试剂等引入的误差。第36页,共64页，2024年2月25日，星期天（三）酸碱滴定法原理用碱滴定酸要求C·Ka>10-8，巴比妥类pKa=8,滴定时突跃过小，难以观察，且在水中溶解度小，故测定时需解决：溶解度和突跃。方法水－醇混合溶剂中滴定溶剂是为了提高溶解度指示剂：麝香草酚酞，变色范围9.3～10.5，供试品为一弱酸，突跃在碱区。第37页,共64页，2024年2月25日，星期天

例如：异戊巴比妥的含量测定取本品约0.5g，精密称定，加乙醇20ml溶解后，加麝香草酚酞指示剂6滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。第38页,共64页，2024年2月25日，星期天在胶束水溶液中滴定（溴化十六烷基苄三甲基胺）

增加溶解度，胶束的特性

增加突跃，使用表面活性剂具有碱性，可增加巴比妥的离解，使Ka变大。非水溶液滴定法溶剂:二甲基甲酰胺标准液：甲醇钠终点指示：麝香草酚兰，电位法第39页,共64页，2024年2月25日，星期天1.直接测定方法标准品对照法表5-2一些巴比妥类药物紫外吸收的有关数据（四）紫外分光光度法第40页,共64页，2024年2月25日，星期天

对照法Lambert-Beer定律第41页,共64页，2024年2月25日，星期天每1mg硫喷妥相当于1.091mg的C11H17N2NaS。注射用硫喷妥钠的含量测定：在304nm处，测定A供A对第42页,共64页，2024年2月25日，星期天2.提取分离后的紫外分光光度法适用于：含干扰物质的样品原理：巴比妥类药物具有弱酸性，在三氯甲烷等有机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶。第43页,共64页，2024年2月25日，星期天巴比妥类钠盐酸化三氯甲烷提取水层×氯仿层0.45mol/LNaOH三氯甲烷层×水层调pHλmax处测A第44页,共64页，2024年2月25日，星期天

USP（24）对苯巴比妥钠的含量测定采用本法

样品→溶解→酸化→三氯甲烷提取(250ml)

→精密量取适量三氯甲烷液(5ml)→蒸气浴上挥干→乙醇、pH9.6缓冲液(100ml)供试品溶液（样品液(mg/ml)）苯巴比妥对照品→乙醇、pH9.6缓冲液→标准溶液（对照液(µg/ml)）

240nm为测定波长第45页,共64页，2024年2月25日，星期天多用于制剂及体液中巴比妥类药物的含量测定如：苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的血药浓度监测色谱条件：色谱柱AgilentZORBAXSB-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）预柱：AgilentZORBAXSB-C18柱（4mm×4mm，5μm）流动相：水-甲醇-乙腈(45:45:10)v（五）HPLC返回第46页,共64页，2024年2月25日，星期天练习题[A型题]1.苯巴比妥中检查的特殊杂质是

A.巴比妥

B.间氨基酚

C.水杨酸

D.中性或碱性物质

E.氨基酚练习与思考第47页,共64页，2024年2月25日，星期天

2.司可巴比妥钠《中国药典》规定的含量测定方法为

A.中和法

B.溴量法

C.碘量法

D.紫外分光法

E.高锰酸钾法第48页,共64页，2024年2月25日，星期天3.于Na2CO3溶液中加AgNO3试液，开始生成白色沉淀经振摇即溶解，继续加AgNO3试液，生成的沉淀则不再溶解，该药物应是盐酸可待因咖啡因C.新霉素D.维生素CE.异戊巴比妥第49页,共64页，2024年2月25日，星期天4.与NaNO2～H2SO4反应生成橙黄至橙红色产物的药物是A.苯巴比妥B.司可巴比妥C.巴比妥D.硫喷妥钠E.硫酸奎宁第50页,共64页，2024年2月25日，星期天5.中国药典（2000年版）采用AgNO3滴定液（0.1mol/L）滴定法测定苯巴比妥的含量时，指示终点的方法应是A.K2CrO4溶液B.荧光黄指示液C.Fe(III)盐指示液D.电位法指示终点法E.永停滴定法第51页,共64页，2024年2月25日，星期天6.银量法测定苯巴比妥钠含量时,若用自身指示法来判断终点,样品消耗标准溶液的摩尔比应为A.1:2B.2:1C.1:1D.1:4E.以上都不对第52页,共64页，2024年2月25日，星期天7.下列巴比妥类药物水溶液中酸性最小的药物是A.苯巴比妥B.巴比妥C.异戊巴比妥D.异戊巴比妥钠E.以上都不对第53页,共64页，2024年2月25日，星期天8.用酸碱滴定法测定巴比妥类药物含量时，适用的溶剂为A.碱性B.水C.酸水D.醇－水E.以上都不对第54页,共64页，2024年2月25日，星期天9.司可巴比妥钠（分子量为260.27）采用溴量法测定含量时，每lml溴滴定液(0.05mol/L)相当于司可巴比妥钠的毫克(mg)数为1.3012.603C.26.03D.52.05E.13.01第55页,共64页，2024年2月25日，星期天10.ChP（2005）注射用硫喷妥钠采用的含量测定方法为

A.紫外分光光度法

B.银量法

C.酸碱滴定法

D.比色法

E.非水滴定法第56页,共64页，2024年2月25日，星期天11.凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，如司可巴比妥钠，中国药典（1990年版）采用的含量测定方法是A.酸量法B.碱量法C.银量法D.溴量法E.比色法第57页,共64页，2024年2月25日，星期天12.巴比妥类药物在吡啶溶液中与铜吡啶试液作用，生成配位化合物，显绿色的药物是A.苯巴比妥B.异戊巴比妥C.司可巴比妥