蛋白质化学综合习题

蛋白质化学综合习题生物化学习题蛋白质化学一、选择题在寡聚蛋白质中，亚单位之间的三维排列和相互作用以及接触位点之间的空间结构称为（）a、三级结构b、缔合现象c、四级结构d、变构现象为了形成稳定的肽链空间结构，肽键中的四个原子和相邻的两个原子是（）a、不断绕动状态b、可以相对自由旋转c、甘氨酸的解离常数为PK1=2.34,PK2=9.60,等电点为（）a、7.26b、5.97c、7.14d、10.774、肽链中的肽键大都是：（）a、顺式结构B,顺式和反式C共存，反式结构5。维持蛋白质二级结构稳定的主要因素有：（）a、静电作用力b、氢键c、疏水键d、范德华作用力6、蛋白质变性是由于（）a、一级结构变化B，空间构象破坏C，假肢基脱落D,蛋白质水解7氨基酸没有的化学反应是（）a.双缩脲反应b.茚三酮反应c.dnfb反应止pitc反应8、在下列所有氨基酸溶液中，不引起偏振光旋转的氨基酸是（）a、丙氨酸B、亮氨酸C、甘氨酸D、丝氨酸9,天然蛋白质中20种氨基酸的结构（）a、全部是l一型b、全部是d型c、部分是L型，部分是D型，D,除了甘氨酸是L型'+10.谷氨酸的PK1（-C00H）为2.19,PK'2（-NH3）为9.67,PK'3r（-C00H）为4.25,其Pi为（）a,4.25b,3.22c,6.96d和5.9311。以下哪种氨基酸在生理pH值下具有净负电荷？（）a、prob、lyse、hisd、glu12、天然蛋白质中不存在的氨基酸是（）a、半胱氨酸B、瓜氨酸C、丝氨酸D、蛋氨酸13、破坏a――螺旋结构中的一个氨基酸残基是：（）a、亮氨酸b、丙氨酸c、脯氨酸d、谷氨酸14、当蛋白质处于等电点时，可使蛋白质分子的（）a、稳定性增加B，表面净电荷保持不变C,表面净电荷增加D,溶解度最小为15,蛋白质分子的-s-s-断裂方法为（）a、加尿素b、透析法c、加过甲酸d、加重金属盐16、区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据a、含有B的羧基和氨基的极性。含有C的氨基和羧基的数量。含有D的R基团的大小。脂肪族氨基酸是极性氨基。含有E的R基团是极性或非极性的17、有一个肽，用胰蛋白酶水解得：①met-glu-leu-lys②ser-ala-arg③gly-tyr三组片段，用brcn处理得：④ser-ala-arg-met⑤glu-leu-lys-gly-tyr两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为：a、3+2+1b。5+4c。2+1+3d。2+3+1e。1+2+3二、是非题（在题后括号内打丿或X）+一、一氨基一羧基氨基酸的pi为中性，因为-cooh和-nh3的解离度相等。（）2、构型的改变必须有旧的共价健的破坏和新的共价键的形成，而构象的改变则不发生此变化。（）3、生物体内只有蛋白质才含有氨基酸。（）4、所有的蛋白质都具有一、二、三、四级结构。（）5.蛋白质中所有氨基酸在紫外光区都有光吸收特性。（）6•当酸性蛋白质（PI〈7）溶解在pH为9的0缓冲溶液中时，该蛋白质的净电荷为负（）7、镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传性的分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被缬氨酸残基所置换。（）镰状细胞贫血是一种先天性遗传病。其病因是血红蛋白代谢紊乱。（9）在蛋白质和肽中，只有一个共价键连接氨基酸残基，即肽键。（10）热力学上，蛋白质分子最稳定的构象是自由能最低的构象。（11）天然氨基酸的a-碳原子不对称。（12）变性蛋白质的分子量也发生了变化。（）13、蛋白质在等电点时净电荷为零，溶解度最小。（）三、问答题和计算题：试着说明蛋白质结构和功能之间的关系（包括初级结构、高级结构和功能之间的关系）。2•维持蛋白质空间结构的力量是什么？3•计算以下溶液的pH值：等体积的0.2mol/lgly溶液和O.lmol/lhcl溶液的混合溶液。(甘氨酸激酶l=2.34pk2=9.60)4。试着描述确定蛋白质多肽链氨基酸序列的一般步骤。5•有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：asp1,ser1,gly1,ala1,met1,phe1和lys2，又做了一系列分析，结果如下：FDNB与之反应，然后酸水解得到DNP-ala胰凝乳蛋白酶消化后，从产物中分出一个纯四肽，其组成为：asp1,gly1,lys1,met1,此四肽的fdnb降解产物为DNP-Gly(不考虑糜蛋白酶水解亮氨酸、蛋氨酸和组氨酸羧基末端)胰蛋白酶消化八肽后又可得到组成分别为lys1,ala1,ser1及lys1,phe1,gly1的两个三肽及一个二肽。经CNBr处理后，游离天冬氨酸从二肽中解离。请列出八肽全序列并简示你推知的过程。6.一种七肽，其氨基酸组成为Lys、pro、Arg、Phe、ala、Tyr、Ser；未经胰凝乳蛋白酶处理，它与FDNB反应，不产生a-经胰凝乳蛋白酶处理后，DNP氨基酸被分解成两个肽(ALA、Tyr、Ser和Lys、pro、Arg和Phe)，分别与FDNB反应生成DNP-Ser和DNP-Lys；这七种肽与胰蛋白酶反应生成两种肽(pro、Arg和Lys、Phe、ala、Tyr、Ser)，或者可以生成DNP-Phe的a-七肽。这七种肽的主要结构是什么？4、名词释义等电点(pi)肽键和肽链肽平面及二面角一级结构二级结构波耳效应三级结构四级结构超二级结构结构域蛋白质变性与复性五、填空题1.在紫外区域具有光吸收特性的氨基酸为()， ()， ()。2.写出下列物质的分子结构式：丙酮酸()、草酰乙酸()；写出下列物质的名称ASN()、Glu()、Arg()在20种氨基酸中，()氨基酸没有立体异构体；脯氨酸是()氨基酸，与茚三酮反应生成()颜色物质，是分子量最小的氨基酸()。4•典型的a-螺旋，每圈螺旋包含()个氨基酸残基，螺距是()nm。1•确定蛋白质多肽链N端和C端的常用方法是什么？基本原则是什么？解答：(1)n-末端测定法：常采用2,4d二硝基氟苯法、edman降解法、丹磺酰氯法。2,4d二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法：多肽或蛋白质的自由端氨基与2,4d二硝基氟苯(2,4ddnfb)反应(桑格反应)生成dnpd多肽或dnpd蛋白质。由于DNFB与氨基形成的键在酸水解时比肽键稳定得多，因此dnpd多肽酸水解后，只有nd端氨基酸为黄色的dnpd氨基酸衍生物，其余为游离氨基酸。丹磺酰氯（dns）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（dnsdcl）反应生成dnsd多肽或dnsd蛋白质。由于dns与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此dnsd多肽经酸水解后，只有nd末端氨基酸为强烈的荧光物质dnsd氨基酸，其余的都是游离氨基酸。苯基异硫氰酸酯（PITC或Edman降解）方法：多肽或蛋白质的自由端氨基与苯基异硫氰酸酯（PITC）反应（Edman反应）生成苯氨基硫代甲酰多肽或蛋白质。当在酸性有机溶剂中加热时，nd端PTCD氨基酸被环化形成苯乙内酰脲衍生物并从肽链上脱落。去除nd末端氨基酸后，剩余的肽链仍然完整。氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的n端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的n端残基序列。（2）镉末端测定方法：常用联氨水解法、还原法和羧肽酶法。肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除c端氨基酸以游离形式存在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。还原方法：用硼氢化锂aD氨基醇将肽链的C端氨基酸还原为相应的氨基酸。肽链完全水解后，它代表原始CDaD-氨基醇末端的氨基酸，可通过色谱法进行鉴定。羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的cd末端开始逐个降解，释放出游离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量（摩尔数）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的cd末端氨基酸序列。血红蛋白的铁含量为0.426%，并计算其最小相对分子量。纯酶含有1.65%的亮氨酸和2.48%的异亮氨酸（按质量计）。最低相对分子量是多少？解答：（1）血红蛋白：铁的相对原子质量为55.8，最低相对分子质量=?100=?100?—万三千一百铁的百分含量0.426（2）酶：由于亮氨酸和异亮氨酸的相对分子量相等，因此亮氨酸与异亮氨酸的比例为1.65%：2.48%=2:3。因此，该酶分子至少含有2个亮氨酸和3个异亮氨酸。2?131.11?1003?131.11?100mr?最低？？？15900mr?最低？？？159001.652.483•指出在以下pH条件下，每种蛋白质在电场中的移动方向，即正极、负极，或保持原点？（1）胃蛋白酶（pi1.0）、pH值为5.00（2）的血清白蛋白（pi4.9）、pH值为60（3）的a-脂蛋白（pi5.8）、pH值为50和pH值为90回答：（1）胃蛋白酶pi10V环境pH值50,带负电荷，移向正电荷；（2）血清白蛋白pi49V环境pH60,带负电，向正方向移动；（3）a-脂蛋白pi58〉环境pH50,带正电荷，向负极移动；a-脂蛋白pi58V环境pH90,带负电，向正方向移动。4•什么是蛋白质变性和沉淀？两者的本质区别是什么？解答：蛋白质变性的概念：天然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的生物活性，并伴随着物理化学性质的改变，这种作用称为蛋白质的变性。变性的本质是：分子中的各种二级键断裂，使其空间构象从紧而有序的状态转变为松而无序的状态，一级结构没有被破坏。蛋白质变性后的表达：①？生物活性消失；②？物理和化学性质的变化：溶解度降低，粘度增加，紫外线吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易于水解。蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。蛋白质沉淀可分为两类：（1） 可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。（2） 不可逆沉淀：蛋白质分子的内部结构发生了重大变化。蛋白质变性并沉淀，不能再溶解在原始溶剂中。例如加热引起的蛋白质沉淀，与重金属或某些酸的反应都属于这一类。蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在，并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。5•蛋白质化学研究中常用的试剂和酶有：CNBr、异硫氰酸苯酯、丹磺酰氯、尿素、6mol/lhclB-巯基乙醇、水合茚三酮、过酸、胰蛋白酶、糜蛋白酶，哪一种最适用于以下任务？（1）测定小肽的氨基酸序列。（2）鉴定肽的氨基末端残基。（3） 蛋白质无二硫键的可逆变性。如果存在二硫键，应添加什么试剂？（4）水解芳香族氨基酸残基羧基侧的肽键。（5）水解蛋氨酸残基羧基侧的肽键。（6）水解赖氨酸和精氨酸残基一侧的肽键。答：（1）异硫氰酸苯酯；（2）丹黄酰氯；（3）尿素-巯基乙醇减少二硫键；（4）糜蛋白酶；（5）cnbr；（6）胰蛋白酶。6．由下列信息求八肽的序列。(1)酸水解得到Ala、Arg、Leu、met、Phe、THR、2val°(2)DNP-ala由Sanger试剂获得。（3）通过胰蛋白酶处理获得Ala、Arg、thr和Leu、met、Phe、2val。用Sanger试剂处理后，分别得到DNP-ala和DNP-Val°（4）通过溴化氰处理获得Ala、Arg、高丝氨酸内酯、THR、2val、Leu和Phe。用Sanger试剂处理后，分别得到DNP-ala和DNP-Leu。解答：由（2）推出n末端为ala；由（3）推出val位于n端第四，arg为第三，而thr为第二；溴化氰裂解，得出n端第六位是met,由于第七位是leu，所以phe为第八；由（4）,第五为val。所以八肽为：ala-thr-arg-val-val-metTeu-phe。7•—个a-螺旋片段包含180个氨基酸残基。这个片段中有多少螺旋圈？计算该a-螺旋段的轴长度。答：180/3.6=50圈，50X0.54=27nm，片段包含50圈螺旋，其轴长为27nm。8•当一种四肽与fdnb反应后，用5.7mol/lhcl水解得到dnp-val及其他3种氨基酸;当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段；其中一片用libh4（下标）还原后再进行酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫（红）色产物的氨基酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？答：（1）四肽与FDNB反应后，用5.7mol/l盐酸水解得到DNPVal，证明N端为Val。（2）还原后水解LiBH4，水解液中发现氨基乙醇，证明肽的C端为Gly。（3） 水解液中有在浓h2so4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸，说明此氨基酸为trp。说明c端为gly—trp?（4） 根据胰蛋白酶的特异性，N-末端片段为Val-Arg（Lys）?，根据（1）、（2）和（3）的结果，我们可以知道四肽的顺序：n-val-arg（Lys）-trp-gly-c。9•概述测定蛋白质一级结构的基本步骤。解答：（1）测定蛋白质中氨基酸组成。（2）蛋白质的n端和c端的测定。（3） 采用两种或两种以上不同的水解方法来断开待测蛋白质肽链，分别得到一系列大小不同的肽。（4）对肽进行分离纯化，并测定其序列。（5） 从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列顺序。如果蛋白质包含多条肽链，则需要将其分解为一条肽链，然后根据上述原则确定其一级结构。对于含有二硫键的蛋白质，在确定氨基酸序列之前，还必须分解二硫键以分离肽链并确定二硫键的位置。二硫键可以被去除并用过氧酸氧化，从而将胱氨酸部分氧化为两种半胱氨酸磺酸。酶一、多项选择题1、酶反应速度对底物浓度作图，当底物浓度达一定程度时，得到的是零级反应，对此最恰当的解释是：（）a、形变底物与酶产生不可逆结合b、酶与未形变底物形成复合物c、酶的活性部位被底物D饱和。过多的底物与酶结合不利于催化反应2。米氏常数km是一种度量（）a、酶和底物亲和力大小的常数b、酶促反应速度大小的常数c、酶被底物饱和程度的常数d、酶的稳定性的常数3、酶催化的反应与无催化剂的反应相比，在于酶能够：（）a、增加反应B所需的活化能，降低反应C所需的活化能，促进正向反应速度增加，但反向反应速度保持不变或降低。4•辅酶和酶的结合更多（）a,紧密B,松散C,特异5。以下关于辅助组的陈述哪项是正确的？（）a、是一种结合蛋白质b、只决定酶的专一性，不参与化学基因的传递c、与酶蛋白的结合比较疏松d、一般不能用透析和超滤法与酶蛋白分开6、酶促反应中决定酶专一性的部分是（）a、酶蛋白B、底物C、辅酶或辅酶D、催化组7测定酶活性时，下列哪种条件是错误的a.［s］?［e］b.［s］=［et］c.测初速度d.最适ph8、全酶是指什么？（）a、酶B的辅因子以外的部分，酶C的非活性前体，酶抑制剂复合物D，需要辅因子的酶，具备了酶蛋白、辅助因子各种成分。9•根据Mie方程，关于［s］和KM之间关系的陈述是不正确的：（a）当［s］〈KM时，V与［s］成正比；b、当［S］二km时，v=l/2vmaxc、 当［s］〉〉km时，反应速度与底物浓度无关。d、 当［S］=2/3km时，v=25%Vmax-l10.已知酶的Km值为0.05moll?当这种酶催化的反应速率达到最大反应速率的80%时，底物的浓度应该是多少？（）-1-1-1-1a、0.2mol。lb、0.4mol。lc、O.lmol。ld、0.05mol。Lll。一种酶有四种底物。Km值如下所示。酶的最佳底物是（）-5-5-5-5a、sl:km=5X10mb、s2:km=lX10mc、s3:km=10X10md、s4:km=0.1X10ml2。当酶促反应速率为其最大反应速率的80%时，KM等于（）a、[s]b、1/2[s]c、1/4[s]d、0.4[s]13、下列关于酶特性的叙述哪个是错误的？（）a、催化效率高B特异性强C，反应条件温和D,催化反应涉及辅因子14。这种酶具有高催化能力的原因是（）a、酶能降低反应的活化能b、酶能催化热力学上不能进行的反应c、酶可以改变化学反应的平衡点。酶可以提高反应物分子15的活化能。非竞争性酶抑制剂对酶反应的影响为：（）a、vmax不变，km增大b、vmax不变，km减小c、vmax增大，km不变d、vmax减小,km不变16、目前公认的酶与底物结合的学说是（）a、活性中心理论B诱导拟合理论C,关键理论D,中间产物理论17，变构酶是一种（）a、单体酶b、寡聚酶c、多酶复合体d、米氏酶18、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）a、蛋白质B,rnac，DnaD，糖蛋白19，以下关于酶活性中心的陈述是正确的（）a、所有酶都有活性中心b、所有酶的活性中心都含有辅酶c、酶的活性中心都含有金属离子d、所有抑制剂都作用于酶活性中心。20、乳酸脱氢酶（ldh）是一个由两种不同的亚基组成的四聚体。?假定这些亚基随机结合成酶，这种酶有多少种同工酶？（）a、FMN和fad的维生素前体是（）。a、vb1b、vb2c、vb6d、vpp22、水溶性维生素常是辅酶或辅基的组成部分，如：（）a、辅酶a含有烟酰胺B，fad含有吡哆醛C，nad含有烟酰胺D,脱羧辅酶含有生物素+23、nad在酶促反应中转移（）a、氨基B、氢原子C、氧原子D、羧基24含烟酰胺的辅酶在生物代谢中的作用a.为电子载体b.为一碳基团载体c.为羧化酶辅酶d.参与a-酮酸的氧化作用25、辅酶磷酸吡哆醛的主要功能是（）a、以下哪种酶是氢B、二氧化碳C组、碳一基因D、氨基26和生物素的辅酶？（）a、丙酮酸脱氢酶b、丙酮酸激酶c、丙酮酸脱氢酶系d、丙酮酸羧化酶27•含叶酸的辅酶其主要作用为（）。