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文档简介

习题2010年,获得第一个“人造细胞”

第一章

1.什么是分子生物学?3.简述分子生物学的研究内容与研究热点。

⑴广义的分子生物学:蛋白质及核酸等生物大分子⑴研究内容

结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴,即从分子①DNA重组技术(基因工程)

水平阐明生命现象和生物学规律。②基因的表达调控

⑵狭义的分子生物学:偏重于核酸(基因)的分子③生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物

生物学,主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调学)

控等过程,当然也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的④基因组、功能基因组与生物信息学研究

结构与功能的研究。⑤基因的表达调控

⑥生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物

2.列举分子生物学发展历程中的10个重大事件。学)

1944年,著名微生物学家Avery等在对肺炎双球杆菌的⑦基因组、功能基因组与生物信息学研究

转化实验中证实了DNA是遗传物质。⑵分子生物学的研究热点及领域

1953年,Waston和Crick提出了DNA双螺旋模型。①结构生物学(StructuralBiology)

1954年,Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律,②分子发育生物学(MolecularDeveloping

后来Nirenberg等于1961年破译了第一批遗传密码。Biology)

Crick在前人基础之上提出了中心法则。③分子细胞生物学(MolecularCellBiology)

RNA

复制④分子神经生物学(MolecularNeurobiology)

复制(^DNA・转录^^RNA—翻译a蛋白质⑤分子肿瘤学(MolecularTumorology)

1956年,A.Kornberg在大肠杆菌中发现了DNA聚合酶I,4.根据你所学的知识谈谈分子生物学在生命科学以及社

这是能在试管中合成DNA的第一种核酸酶。会经济活动中的地位与作用。

1961年,F.Jacob&J.Monod提出调节基因表达的操⑴人口与粮食;⑵健康与疾病;⑶环境与生

纵子模型。态;⑷能源与资源

1967年,Gellert发现了DNA连接酶。

1970年,Smith和Wilcox等分离得到第一种限制性核酸5.简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术

内切酶。发明。

1970年,Temin和Baltimore在RNA肿瘤病毒中发现逆

理论:

转录酶。

⑴1940年艾弗里(0.Avery)等人通过肺炎球菌的

1972^1973年,H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA

转化试验证明了生物的遗传物质是DNA,而且证明了通过

技术,并完成了第一个细菌基因的克隆。

DNA可以把一个细菌的性状转移给另一个细菌;

1975~1977年,Sanger、Maxam和Gilbert发明了DNA序

(2)1950年沃森(J.D.Watson)和克里克(F.Crick)

列测序技术。1977年第一个全长5387bp的噬菌体X174

发现了DNA分子的双螺旋结构及DNA半保留复制机理;

基因组测定完成。

⑶I960年关于遗传信息中心法则的确立。

1981年,Cech等发现四膜虫26srRNA前体自剪接作用,

技术:

发现了核酶(ribozyme)。

⑴限制性内切核酸酶;⑵DNA连接酶;⑶基因载体的发

1982年,Prusiner等在感染瘙痒病的仓鼠脑中发现了阮

病毒(Prion)o

1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)o

1988年,McClintock发现可移动的遗传因子(转座子)。6.21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学

OOO的突破性成就,使生命科学在自然科学中的位置起了革

2001年,RNAi干扰机制的发现。

命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原

,端粒及端粒酶的发现。

2006年,成功获得诱导干细胞(iPS细胞)则,三大支撑学科和研究的三大主要领域?

⑴三大基本原则:传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。

①构成生物大分子的单体是相同的,共同的核酸也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。这是

语言,共同的蛋白质语言所有有细胞结构的生物所遵循的法则。

②生物遗传信息表达的中心法则相同11>增色效应:指在DNA变性的过程中,他在260nm的吸

③生物大分子单体的排列(核甘酸、氨基酸)的收值先是缓慢上升,达到某一温度时及骤然上升.

不同

⑵三大支撑学科:Cytology、Genetics、Biochemistry•简答题

⑶研究的三大主要领域:

1.DNA携带哪两类不同的遗传信息?

①基因的分子生物学:基因的概念、结构、复制、

答:从化学角度看,不同的核甘酸仅是含氮碱基的差别。

表达、重组、交换

从信息方面看,储存在DNA中的信息是指碱基的顺序,

②结构生物学:生物大分子的结构与功能、生物

而碱基不参与核昔酸之间的共价连接,因此储存在DNA

大分子之间的互作

的信息不会影响分子结构,来自突变或重组的信息改变

③生物技术理论与应用

也不会破坏分子。

第二章

2.在何种情况下有可能预测某一给定的核甘酸链中“G”

•名词解释:

的百分含量?

1、基因:基因是合成一种功能蛋白或RNA分子所必需的

答:由于在DNA分子中互补碱基的含量相同的,因此只

全部DNA序列,即DNA分子中含有特定遗传信息的一段

有在双链中G+C的百分比可知时,G%=(G+C)%/2

核昔酸序列,是遗传物质的最小功能单位。

2、端粒酶:端粒酶是参与真核生物染色体末端的端粒

3.真核基因组的哪些参数影响COt1/2值?

DNA复制的一种核糖核蛋白酶。由RNA和蛋白质组成,其

答:C0tl/2值受基因组大小和基因组中重复DNA的类型

本质是一种逆转录酶。它以自身的RNA作为端粒DNA复

和总数影响。

制的模版,合成出富含脱氧单磷酸鸟昔Deoxyguanosine

Monophosphate(dGMP)的DNA序列后添加到染色体的末端

4.哪些条件可促使DNA复性(退火)?

并与端粒蛋白质结合,从而稳定了染色体的结构。

答:降低温度、pH和增加盐浓度。

3、假基因:与正常基因结构相似,但没有正常功能的DNA

序列

5.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?

4、Alu序列家族:Alu重复序列是哺乳动物基因组中SINE

答:形成沟状结构是DNA与蛋白质相互作用所必需。

家族的一员,约有50万份拷贝。由于这种DNA序列中有

限制性内切核酸酶Alu工的识别序列AGCT,所以称为Alu6.大肠杆菌染色体的分子质量大约是2.5X109Da,核背

重复序列。Alu序列两端各有一个正向重复序列,末端有酸的平均分子质量是330Da,两个邻近核甘酸对之间的距

一个poly(A)尾。离是0.34nm,双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm,

5、断裂基因:编码某一RNA的基因中有些序列并不出现请问:

(1)该分子有多长?

在成熟的RNA序列中,成熟RNA的序列在基因中被其

答:1碱基=330基,1碱基对=6基Da

他的序列隔开

碱基对=2.5X109/660=3.8X106kb

6、重叠基因:是指两个或两个以上的基因共有一段DNA染色体DNA的长度=3.8X106/0.34=1,3X106nm=l.3mm

序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的(2)该DNA有多少转?

组成部分。答:转数=3.8X106X0.34/3.4=3.8X105

7、变性:DNA双螺旋区的氢键断裂,使双螺旋的两条链

完全分开变成单链,这一链分离的过程叫做变性。7.说明三股螺旋DNA形成的条件与结构特点及其可能的

功能。

8、复性:变性DNA在适当条件下,两条彼此分开的链又

答:在1949T951年间,EChargaff发现:

可以重新地合成双螺旋结构的过程(退火)。(1)不同来源的DNA的碱基组成变化极大

9、C值矛盾:在真核生物中,每种生物的单倍体基因组的(2)A和T、C和G的总量几乎是相等的(即Chargaff

DNA总量总是恒定的,称为C值,形态学的复杂程度与C-规则)

值的不一致称为C值矛盾.(3)虽然(A+G)/(C+T)=1,但(A+T)/(G+C)的比

10、中心法则:指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA

值在各种生物之间变化极大制终止的一段区域,能够独立地进行复制。

6、半不连续复制:DNA双链复制时,一条链是连续

8.为什么在DNA中通常只发现A-T和C-G碱基配对?

合成的,另一条链是不连续合成的,这种前导链的

答:(1)C-A配对过于庞大而不能存在于双螺旋中;G-T

连续复制和后随链的不连续复制方式称DNA的半不连

碱基对太小,核甘酸间的空间空隙太大无法形成氢键。

(2)A和T通常形成两个氢键,而C和G可形成三个氢续复制。

键。正常情况下,可形成两个氢键的碱基不与可形成三7、先导链:又称前导链,是在复制叉处从5'—3'进

个氢键的碱基配对。行连续合成的一条子链。

8、后随链:又称滞后链,复制方向与复制叉的方向

9.为什么只有DNA适合作为遗传物质?相反,后随链的合成要等前导开始合成从而将其模板

答:是磷酸二酯键连接的简单核甘酸多聚体,其双链结

链暴露出来后,才得以进行。后随链上先合成了不连

构保证了依赖于模板合成的准确性,DNA的以遗传密码的

续的冈崎片段,然后在DNA聚合酶I的催化下切除RNA

形式编码多肽和蛋白质,其编码形式多样而复杂

引物,同时填补切除RNA后的空隙,再在DNA连接酶的

10.简述真核生物的染色体结构,它们是如何组装的?有作用下,将冈崎片段连接成一条连续的DNA单链。

几种组蛋白参与核小体的形成?9、DNA复制的转录激活:DNA复制起始时通过

答:DNA和组蛋白构成核小体一►多个核小体形成串珠RNApolymerse的转录过程而解开局部的双链。

链f串珠链绕成每圈6个核小体的中空螺旋管的微纤10、夹子装置器:又称为Y-复合物,主要功能是帮助

丝f微纤丝与多种非蛋白结合形成的突环,每个突环P亚基专住DNA,并有增强核心酶活性的作用。

含若干功能基因由6个突环形成一个玫瑰花结状结11、DNA连接酶:是将DNA双链上的两个缺口同时连

构一A组装成每圈30个玫瑰花结的螺旋圈由10个接起来的酶。若双链DNA中一条链有切口,一端是

螺旋圈再组装成一个染色单体3,-0H,另一端是5-一磷酸基,连接酶可催化这两端

2分子H3和2分子H4形成四聚体;H2A和H2B形成磷酸二酯键,而使切口连接的酶。

12、SSB:单链结合蛋白,稳定已被解开的DNA单链,

11.核酸变性后分子结构和性质发生了哪几种变化?阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。

答:变性:DNA双螺旋区的氢键断裂,使双螺旋的两条链13、HU:类组蛋白,和DNA结合蛋白,能促进复制的

完全分开变成单链,这一链分离的过程叫做变性。起始。

变化:DNA溶液的黏度大大下降;沉淀速度增加;浮力密14、DnaA:引发体的部分组成,辨认复制起始点。

度上升;紫外吸收光谱升高;酸碱滴定曲线改变;生物15、DnaB:引发体的部分组成,与DnaC相互作用,

活性丧失。解螺旋作用。

16、DnaC:引发体的部分组成,与DnaB相互作用,

使DnaB蛋白组装到复制起始点上。

第三章17、回环模型:滞后链绕酶一圈形成的环形,使得滞

•名词解释:后链和前导链朝着同一方向沿复制叉进行。

1、复制:亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下,

分别以每单链DNA分子为模板,聚合与自身碱基可以•问答题

互补配对的游离的dNTP,合成出两条与亲代DNA分子1.描述Meselson-Stahl实验,说明这一实验加深我们

完全相同的子代DNA分子的过程。对遗传理解的重要性。

2、半保留复制:在DNA复制时,子代双链DNA中,Meselson-Stahl实验证实了DNA的半保留复制。证实

一条链来自亲代,另一条链是新合成的互补链,这种了两个假说:

方式称半保留复制。(1)复制需要两条DNA的分离(解链/变性)

3、复制叉:复制开始,在复制起点形成的一个特殊(2)通过以亲本链作为模板,新合成的DNA链存在于

的叉形结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物两个复制体中。

和新链合成的部位,这个部位称为复制叉。2.请列举可以在线性染色体的末端建立线性复制的三种

4、引发酶:为DNA复制中引物-RNA的合成酶,狭义方式。

的引发酶是指大肠杆菌dnaG遗传因子的产物。(1)染色体末端的短重复序列使端粒酶引发非精确

5、复制子:是DNA复制时从一个DNA复制起点到复复制。

(2)末端蛋白与模板链的5'端共价结合提供核甘酸答:(1)将大肠杆菌在15N培养基中培养多代,得到的

游离的31端DNA两条链都被标记,形成重链。

(3)通过滚环复制,DNA双链环化后被切开,产生延(2)细胞移到14N培养基中培养,提取DNA;

伸的3'-0H端(3)将DNA进行氯化钠密度梯度离心,;

3.为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制(4)经过一定时间后,DNA在离心管聚集成带,每个带

所需的时间要少?为什么在选择营养条件下,E.coli中的密度均与该点的氯化钠溶液的密度相同;

可以存在多叉的染色体或多达4个以上的开环染色体拷(5)照相决定每条带的位置和所含的DNA量。

1)经15N培养基,所有DNA都聚集在一条重密度带;

贝,而正常情况下染色体是单拷贝的?

2)经14N培养基一代后,所有的DNA形成一条中间密度

答:单拷贝复制由细胞中复制起点的浓度控制的。444-

在适宜的培养条件下,细胞呈快速生长,稀释起始阻遏市;

3)经14N继续培养基一代,DNA一半是中间密度带,另

物的浓度,使复制连续进行。

一半是轻密度带;

4.在DNA聚合酶IH催化新链合成以前发生了什么反

4)最后,他们证明第一代的分子是双链,且为半保留复

应?

制。

答:DnaA(与每9个碱基重复结合,然后使13个碱基解

11.描述滚环复制过程及其特征。

链)、DnaB(解旋酶)和DnaC(先于聚合酶III与原核复制

答:仅是特定环状DNA分子的复制方式。

起点相互作用。后随链复制需要引发体完成的多重复制

(1)复制过程:

起始,引发体由DnaG引发酶与多种蛋白质因子组成。

1)环状双链DNA的+链被内切酶切开;

5.DNA复制起始过程如何受DNA甲基化状态影响?

2)以-链为模板,DNA聚合酶以+链的3'端作为引物合成

答:亲本DNA通常发生种属特异的甲基化。在复制之后,

新的+链,原来的+链DNA分子的5'端与-链分离;

两模板-复制体双链DNA是半甲基化的。半甲基化DNA对

3)+链的3'端继续延长;

膜受体比对DnaA有更高的亲和力,半甲基化DNA不能复

4)引发酶以离开的+链为模板合成RNA引物,DNA聚合酶

制,从而防止了成熟前复制。

以+链为模板合成新的-链;

6.请指出在oriC或①X型起点起始的DNA复制之间存在

5)通常滚环复制的产物是一多聚物,其中大量单位基因

的重要差异。组头尾相连。

答:oriC起点起始的DNA复制引发体只含有DnaGo(2)复制过程的特征:

OX型起点起始的DNA复制需要额外的蛋白质一Pri蛋白1)复制是单方向不对称的;

的参与。Pri蛋白在引物合成位点装配引发体。2)产物是单链DNA,但可通过互补链的合成转变为双链;

7.大肠杆菌被T2噬菌体感染,当它的DNA复制开始后3)子代DNA分子可能是共价连接的连环分子;

提取噬菌体的DNA,发现一些RNA与DNA紧紧结合在一起,4)连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。

为什么?12.简述E.ColiDNA复制起始的主要步骤。

答:该DNA为双链并且正在进行复制。RNA片段是后随链⑴DNA合成在复制起点(oriC)的起始,Primase(引物酶)

复制的短的RNA引物。

合成RNA引物。

8.DNA连接酶对于DNA的复制是很重要的,但RNA的合⑵DNAhelicase(DNA解旋酶)打开DNA双链,SSB结合

成一般却不需要连接酶。解释这个现象的原因。单链DNA,DNAGyrase(DNA促旋酶)引入负螺旋,减少正

答:DNA复制时,后随链的合成需要连接酶将一个冈崎片螺旋。

段的5'端与另一冈崎片段的3'端连接起来。而RNA合成⑶在DNA聚合酶III作用下,5'-3'合成前导链和后随

时,是从转录起点开始原5'—3'一直合成的,因此不需链前体片段(冈崎片段)。

DNA连接酶。⑷在DNA聚合酶I作用下,去除后随链前体片段5'端

9.曾经认为DNA的复制是全保留复制,每个双螺旋分子RNA引物,后随链前体片段间的缺口由DNAligase连接,

都作为新的子代双螺旋分子的模板。如果真是这样,在形成完整的后随链。

Meselson和Stahl的实验中他们将得到什么结果?13.比较原核生物和真核生物DNA复制的不同点。

答:复制一代后,一半为重链,一半为轻链;复制两代共同点:

后,1/4为重链,3/4为轻链。(l)DNA的半保留复制即在DNA复制过程中.碱基间氢键

10.解释在DNA复制过程中,后随链是怎样合成的。

首先断裂.双螺旋解旋和分开.每条链分别作为模板.按DNA复制还存在正调控和负调控,调控分子可以

碱基配对原则合成其互补链.从而形成两个新的双链分是蛋白质,也可以是RNA。

子.因新形成的DNA分子中.各保留一条亲代的DNA单链.⑵保证蛋白质翻译忠实性的因素

故名半保留复制.也因此保证了遗传信息的稳定性.此假①氨基酸活化成为氨基酰TRNA的过程由氨

说最先由Waston和Crick提出.后经基酰-tRNA合成酶催化,该酶对底物氨基酸和tRNA都

Meselson.Stahl(1957)设计的氯化钠密度梯度离心实验.有高度特异性,此外还有校正活性即将任何错误的氨基

以及Taylor(1957).Cairns(1963)的放射自显影实验所酰-AMP-E或氨基酰-tRNA的酯键水解,再换上与密码

证实.现已为大家所公认.成为原核生物和真核生物DNA子相对应的氨基酸。这样使氨基酰-tRNA分子中tRNA

复制的普遍规律.的反密码子通过碱基配对识别mRNA分子上的密码子,

(2)DNA的半不连续复制1968年日本学者冈崎等提出了使氨基酸按mRNA信息的指导“对号入座”,保证了从核

DNA半不连续复制的模型.后又用同位素标记技术.令人酸到蛋白质的遗传信息传递的准确性。

信服地解释了两条互补反向平行的DNA单链是如何同时②核糖体对氨基酰-tRNA的进位有校正作

作为模板进行复制的.他认为.在DNA复制过程中.一股模用。只有正确的氨基酰-tRNA能发生反密码子-密码

板上DNA的合成是连续的,另一模板上DNA链的合成是不子适当配对而进入A位。反之,错误的氨基酰-tRNA因

连续的.是首先合成较短的DNA片段(即冈崎片断).然后反密码子-密码子配对不能及时发生而从A位解离。

再由连接酶连成大片段.同时.不连续合成的这条链总是这是维持蛋白质生物合成的高度保真性的另一重要机

落后于连续合成的那条链.称为滞后链,连续合成的链称制。

为前导链.前导链前进的方向与复制叉前进方向相同,滞

后链合成方向与复制叉前进方向相反.因此.DNA聚合酶•名词解释:

的反应方向始终保持5,-T.1、转录:是指以DNA为模板,在依赖于DNA的RNA聚和

(3)DNA复制的起始.延伸和终止许多实验表明.DNA的半酶催化下,以4中NTP(ATP、

保留复制是从DNA分子的特定位点开始的.即复制原点CTP、GTP和UTP)为原料,合成RNA的过程。

(用ori或。表示).现已证明.除fd组噬菌体外.许多生2、转录单位:从启动子到终止子称为转录单元

物的复制原点都是富含A-T的区段.由于此区段的键能较(transcriptionunit)(转录起始点)

低.易于形成瞬时单链.便于单链结合蛋白与之结合.不3、模板链:又称反义链,指作为模板进行RNA转录的链

同点:4、编码链:又称有义链,指不作模板的DNA单链

1)原核生物基因组DNA有1个复制子.真核生物有多个5,转录泡:在转录时RNA聚合酶II(RNAPII)与DNA模

复制子板结合,会形成一个泡状结构,成为转录泡。

2)原核生物比真核生物DNA复制速度快6、RNA聚合酶:以一条DNA链或RNA为模板催化由核普

3)原核生物引物由引酶催化合成的.真核生物引物由-57-三磷酸合成RNA的酶。是催化以DNA为模板

DNA聚合酶a催化合成的(template),三磷酸核糖核昔为底物、通过磷酸二酯键

4)原核生物与真核生物DNA聚合酶不同而聚合的合成RNA的酶。

5)真核生物端粒DNA的合成由端粒酶催化合成的.原核7、C端结构域(CTD):RNApolII的大亚基中有C末端结

生物不存在这种情况.构域。CTD中含一保守氨基酸序列的多个重复Tyr—Ser

14.保证DNA复制忠实性和蛋白质翻译忠实性的因素分—Pro—Thr—Ser—Pro—SerC端重复七肽。

别有哪些?8,启动子:是指DNA分子上被RNA聚合酶识别并结合形

(DDNA复制的复杂性保证了复制的高度忠实性。成起始转录复合物的区域,它还包括一些调节蛋白因子

E.coli复制时,每个碱基对错配频率为的结合位点

10-9^10-10,是高保真系统。9、上游:转录起点上游的序列,是调控区,与转录的方

新DNA链合成时需引物,引物后又要切除,再以向相反。

DNA链取代,DNA聚合酶在合成时还有校对功能,每10、下游:转录起点下游的区域,是编码区,与转录的

引入一个核甘酸都要复查一次,未核实则不能继续进方向一致。

行聚合反应。11、转录起点:+1位点,RNA聚合酶的转录起始位点,

在复制过程中还有许多辅助蛋白,E.coli就至少起始NTP多为ATP或GTPo

有15种。复制叉的复杂结构进一步提高复制准确性。12、转录泡:RNApol结合和转录的DNA模板区域,有17bp

左右DNA形成解链区。

13、三元转录复合物:由RNA聚合酶,DNA模板和一小段作用。

转录产物RNA构成的转录泡复合物。(5)w亚基:在全酶中存在,功能不清楚。

14、核心启动子:RNA聚合酶能够直接识别并结合的启动

子。•问答题

15、上游激活序列(UAS):TATA框上游的保守序列称为上1.简述转录的基本过程?

游启动子元件或上游激活序列。答:⑴全酶与启动子结合的封闭型启动子复合物的形成

16、终止子(terminator):在转录的过程中,提供转录(R位点被。因子发现并结合)

终止信号的RNA序列。⑵开放型启动子复合物的形成:

17、抗终止子:有的蛋白因子能作用于终止序列,减弱①RNApol的一个适合位点到达一10序列区域,诱

或取消终止子的作用,称为抗终止作用,这种蛋白因子导富含A•T的Pribnow框的"熔解",形成12—17bp

就称为抗终止因子。/引起抗终止作用的蛋白质。的泡状物,同时酶分子向一10序列转移并与之牢固结合

18、hnRNA:核内不均一RNA,是存在于真核细胞核中的②开放型启动子复合物使RNApol聚合酶定向

不稳定,大小不均一的一组高分子RNA的总称。③两种复合物均为二元复合物(全酶和DNA)

19、选择性剪接:一个hnRNA(pre-mRNA)转录本,通⑶在开放型的启动子复合物中,RNApol的I位点和

过外显子的剪、接、重组,产生多个成熟的niRNA的机制。E位点的核甘酸前体间形成第一个磷酸二酯键(8亚

20、组成性剪接:一个基因的转录产物通过剪接只能产基);三元复合物形成;+1位多为CAT模式,位于离开保

生一种成熟的mRNA.它和选择型剪接的区别是后者可以守T6~9个核甘酸处

产生多种成熟mRNAo(4)。因子解离一核心酶与DNA的亲和力下降起始过

21、GU-AG规则:这是一条与真核生物蛋白质编码基因相程结束一核心酶移动进入延伸过程

关的规则,说的是RNA内含子序列51端的起始两个

2.试比较原核和真核细胞的mRNA的异同.

核甘酸总是5'-GU-3',并且其3'端的最后两个核昔

⑴原核生物

酸总是5'-AG-31

①原核生物mRNA的半衰期短。

22、剪接体:在剪接过程中形成的剪接复合物称为剪接

②许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在。

体,剪接体的主要组成是蛋白质和小分子的核

③其5,端无帽子结构,3,端没有或只有较短的

RNA(snRNA)o复合物的沉降系数约为50〜60S,它是在剪

poly(A)o

接过程的各个阶段随着snRNA的加入而形成的。

④原核细胞mRNA(包括病毒)有时可以编码几个多肽。

⑤原核生物常以AUG(有时GUG,甚至UUG)作为起始

2.说明RNApol全酶各个亚基的主要功能。

密码子

(1)o亚基:转录起始时与核心酶结合全酶。使

⑵真核生物:

全酶能识别启动子的SextamaBox(—35区),并通过

①其5'端存在帽子结构。

。与模板链结合。不同的。因子与核心酶结合,可识

②绝大多数真核生物mRNA具有poly(A)尾巴。

别不同的启动子。

③其RNA最多只能编码一个多肽。

(2)a亚基:核心酶的组建因子,促使RNApol与

④真核生物几乎永远以AUG为起始密码子。

DNA模板链结合

前端a因子一一使模板DNA双链解链为单链3.以E.coli为例,说出Prok.启动子结构及各部分功

尾端a因子一一使解链的单链DNA重新聚合为双链能。

(3)B亚基:DNA/RNA杂交链结合位点答:启动子由两个部分组成:

•完成NMP之间的磷酸酯键的连接上游部分一CAP-cAMP结合位点(基因表达调控的正控

•编辑功能(排斥与模板链不互补的碱基)制位点)

•与Rho(P)因子竞争RNA3'-endCAP:降解物基因活化蛋白,环腺昔酸(cAMP)的受体

,构成全酶后,B因子含有两个位点:蛋白

Isite(initiationsite.Rifs):该位点专一■性下游部分一RNApol的进入(结合)位点,一35~—

地结合ATP或者GTP(需要高浓度的ATP或GTP)10,包括识别位点和结合位点

Esite(elongationsiteRifR):对NTP非专一1)Sextama框:-35序列,位于复制起点上游

性地结合(催化作用和Editing功能)35个核甘酸处的6核甘酸序列,能被RNA聚合酶全酶识

(4)B'亚基:参与RNA非模板链的结合,保护

别并结合。其中,。亚基在识别中起关键作用。9.真核生物mRNA的3'poly(A)的编码情况及其准确生

2)Pribonow框:TO序列,位于-10处的6核成的机制为何?

甘酸序列(TATAAT),能使RNA聚合酶识别DNA双链中的大多数真核生物的mRNA3'末端都有由100~200个A组成

反义链,确保转录的链和方向无误。的Poly(A)尾巴。

生成:a、RNA末端腺昔酸转移酶(poly(A)聚合酶)催

4.真核生物的RNA聚合酶是如何区分的?有几类?分别化前体一一ATP

转录哪些RNA?反应如下:Mg++或Mn++

根据对a-鹅膏蕈碱的敏感性不同而分三类:多聚核糖核酸+nATP-------->多聚核糖核酸(A)n+

RNApolI:最不敏感(动、植、昆)RNApolII:nPPi

最敏感RNApolIII:不同种类的敏感性不同b、添加位点

转录产物:内切酶(360KDa)切除一段序列----->由poly(A)聚合

RNApolI:核仁活性所占比例最大转录rRNA酶催化添加poly(A)

(5.8S、18S、28S)内切酶的识别位点(有其它因子参与)

RNApolII:核质主要负责hnRNA、snRNA的转录切点上游13-20bP处的AAUAAA,切点下游的

hnRNA(mRNA前体,核不均一RNA)snRNAGUGUGUG(单细胞Euk.除外)

(核内小分子RNA)

RNApolIII:核质负责tRNA、5SrRNA、Alu序列和10.增强子最早在哪里发现?简述它的5个作用特点。

部分snRNASV40的两个正向重复研究得最清楚(DR),-107^-178、

-179--250;各72bp.

5.真核生物-25~-35区、-70~-80区的保守序列分该增强子的特点如下:

别是什么?⑴对依赖于TATA框的转录的增强效应高于不依赖的

Sextama框(SextamaBox),-35序列,大多数启动子中情况

共有序列为TTGACA⑵距离效应:离72bp越近的容易起始转录

CAAT框(CAATbox):其一致顺序为GGGTCAATCT,是真

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