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第第页液相色谱在操作过程中需注意哪些液相色谱常见问题解决方法液相色谱仪依据固定相是液体或是固体，又分为液—液色谱（LLC）及液—固色谱（LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度掌控系统、色谱柱、检测器

液相色谱仪依据固定相是液体或是固体，又分为液—液色谱（LLC）及液—固色谱（LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度掌控系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分构成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。

液相色谱仪操作步骤：

1.首先对流动相进行过滤，依据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10—20分钟。

3.正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10—20分钟，然后再进入测试用流动相（如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10—20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止）。

4.一般情况下，流动相冲洗20—30分钟后，仪器方可稳定，紧要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5.同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98—1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6.样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10—20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7）.关机时，先关计算机，再关液相色谱。

液相色谱注意事项：

1.流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要当心振动尽量不引起气泡。

2.柱子是特别脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

3.全部过柱子的液体均需严格的过滤。

4.压力不能太大，可以不要超过150kgf/cm2.

5.由于缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。

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分析高效液相色谱仪灵敏度不够时

高效液相色谱仪是试验中常见的仪器之一，色谱柱的灵敏度是确保试验精准性的紧要原因，那么当色谱柱的灵敏度不够时，我们该如何去解决呢？应当从以下几个方面去分析：

1、样品量不足：解决方法为加添样品量

2、样品未从柱子中流出：可依据样品的化学性质更改流动相或柱子

3、样品与检测器不匹配：依据样品化学性质调整波长或改换检测器

4、检测器衰减太多：调整衰减即可。

5、检测器时间常数太大：解决方法为降低时间参数

6、检测器池窗污染：解决方法为清洗池窗。

7、检测池中有气泡：解决方法为排气。

8、记录仪测压范围不当：调整电

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