30单元七 微生物的生长与控制　项目二 微生物生长的控制（三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制）

微生物学基础单元七微生物的生长与控制

１目的要求三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

项目二微生物生长的控制了解不同环境中微生物的存在；掌握物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用。

２基本原理三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

不同环境因素对微生物的生长影响不同；同一因素因其浓度或作用时间不同，对微生物的影响也不同；有的因素是微生物生长繁殖所必须的条件,有的表现为抑制作用,有的表现为杀菌作用；掌握物理的、化学的和生物的环境因素对微生物生长或抑制或杀死的影响,以便对有利的微生物创造其生长的条件，而对有害微生物则设法加以控制或杀死。

３实训用品三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；培养基：牛肉膏蛋白脉琼脂及液体培养基、而码糖蛋白脉液体培养基、豆芽汁葡萄糖琼脂培养基；药品：土霉素、新洁尔灭、复方新诺明、汞溴红(红药水)、结晶紫(紫药水)；仪器或其他用具：水浴锅、黑纸、紫外线灯、接种工具。

４操作步骤－环境中微生物的检查三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

环境中微生物的检查：检查项目及要求：微生物在自然界广泛分布,为了进行纯种培养，必须进行无菌操作；本实验是检查空气、土壤、手指、钱币等处微生物的存在,以加强无菌观念；方法:

✔制备牛肉膏蛋白胨平板培养基,在培养皿的底部，用红蜡笔划分几个区域,用手指、钱币等轻轻在平板上涂抹，37℃培养；✔检查空气中杂菌时，则将培养皿盖打开,在空气中暴露5-10min,再盖上皿盖,37℃培养24h。

４操作步骤－物理因素影响微生物生长的检查三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

物理因素影响微生物生长的检查：紫外线照射的影响：✔原理：紫外灯的瓦数、照射时间及照射距离的不同,对微生物产生不同的影响效果；功率大、时间长、距离短时容易杀死微生物；功率小、时间短、距离长时就会有微生物个体残存下来,其中有个体发生了变异；可被利用来进行灭菌和诱变选育；✔方法：吸取0.1mL培养18h的金黄色葡萄球菌或大肠杆菌或枯草芽孢杆菌菌液于牛肉膏蛋白胨平板上，以无菌涂布棒涂布均匀；打开皿盖，用无菌黑纸遮住部分平板，置紫外灯下照射30min，取出黑纸，盖上皿盖。37℃培养24h后观察结果。

４操作步骤－物理因素影响微生物生长的检查三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

物理因素影响微生物生长的检查：微生物对高温的抵抗能力：

✔原理：根据微生物最适生长的温度范围，可分为高温菌、中温菌、低温菌，自然界中绝大部分微生物属于中温菌,但不同的微生物对高温的抵抗力不同,特别是芽孢杆菌对温度抵抗力强；

✔方法：①取盛有牛肉膏蛋白胨培养基的试管8支,编号；②将培养48h的枯草芽孢杆菌及大肠杆菌的斜面,加入无菌生理盐水各4mL,用接种环刮下菌体,混匀,制成菌悬液,在单号试管1、3、5、7中各加人两滴枯草芽孢杆菌菌液,在双号试管2、4、6、8中各加人两滴大肠杆菌菌液；③将所有试管都放入100℃水浴中,10min取出1～4管,再过10min取出5~8管。当上述各管取出后立即用冷水冲凉或冰浴中冷却,然后放人37℃培养箱中培养,24h后,观察生长情况。

５操作步骤－化学因素影响微生物生长的检查三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制

化学因素影响微生物生长的检查：原理：一些化学药品对微生物的生长有抑制或杀死作用,因此在实验室内,生产上或医疗上常利用适宣的化学药品对有害菌进行消毒或杀菌,但应注意药品的浓度及使用时其他因素的影响；方法：圆滤纸片法；

✔第一步：在培养18~20h的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的斜面中，加人4mL生理盐水，用接种环将菌苔刮下,振荡，制成均匀的菌悬液；

✔第二步：吸取0.2mL（或4滴）菌液,滴入无菌培养皿中,然后将融化而冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基倾入（12~15mL)，混匀,平置待冷；✔第三步：用镊子取已分别浸泡土霉素、新洁尔灭、复方新诺明、汞溴红（红药水)、结晶紫（紫药水）的药品溶液中的圆滤纸片,置于同一含菌的平板上；

✔第四步：将平板倒置于37℃恒温箱中,培养24h后观察结果。记录抑菌圈的直径，根据其直径的大小,可初步确定各种药物的抑菌效能。

５操作步骤－化学因素影响微生物生长的检查三、项目实训：环境因素对微生物生长的控制