利用液质联用技术分析蜘蛛抱蛋属植物化学成分

利用液质联用技术分析蜘蛛抱蛋属植物化学成分摘要：蜘蛛抱蛋属(Aspidistra)隶属于百合科(Liliaceae)铃兰族(Convallariaceae),该属植物多分布于越南和我国云贵高原地带。其中四川蜘蛛抱蛋(Aspidistrasichuanensis)资源丰富,根茎在民间作为药材应用,具有活血散瘀、消肿止痛、补虚止咳等作用。甾体皂苷是蜘蛛抱蛋属植物中的主要活性成分,由于该属植物中甾体皂苷母核变化较多,部分甾体皂苷含量低,使其植化研究变得复杂和困难,系统的研究报道较少。液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)具有专属、快速、灵敏等优点,是中药复杂化学成分定性和定量分析的有力工具。本论文采用LC-MS技术对6种蜘蛛抱蛋属植物特别是四川蜘蛛抱蛋中的化学成分进行了研究。主要分为以下3个部分：1.蜘蛛抱蛋属植物化学成分分析。该部分进行了蜘蛛抱蛋属6种植物即四川蜘蛛抱蛋(Aspidistrasichuanensis)、卵叶蜘蛛抱蛋(Aspidistratypica)、丛生蜘蛛抱蛋(Aspidistracaespitosa)、贵州蜘蛛抱蛋(Aspidistraguizhouensis)、荔波蜘蛛抱蛋(Aspidistraliboensis)和线叶蜘蛛抱蛋(Aspidistralinearifolia)的LC-MS指纹图谱分析；并进一步运用Markerlynx软件进行多元统计处理,发现四川蜘蛛抱蛋与卵叶蜘蛛抱蛋化学成分相似,丛生蜘蛛抱蛋化学成分与其它几种蜘蛛抱蛋的化学成分差异最大。2.四川蜘蛛抱蛋根茎中甾体皂苷类成分的鉴定。该部分在课题组前期对卵叶蜘蛛抱蛋化学成分分离鉴定的基础上,总结了6种典型结构甾体皂苷的质谱裂解规律和色谱规律,如在正离子高能量下不同苷元类型具有不同的裂解碎片：雅莫皂苷元(yamogenin)415/271,253,新静特诺皂苷元(neogentrogenin)429、411/297、279等；C25位R/S异构同分异构体化合物,在C18色谱柱上C25位R构型化合物的保留稍强于C25位S构型化合物。利用UPLC/Q-TOFMSE技术并结合文献报道,共鉴定了四川蜘蛛抱蛋中60个化合物的结构(苷元种类多达26种),包括34个可能的新化合物、15组同分异构体(C25位R/S异构5种、羟基不同位置异构3种、糖基不同位置异构3种、双键不同位置异构4种)。3.四川蜘蛛抱蛋不同部位化学成分分析。该部分进行了四川蜘蛛抱蛋根茎、须根和叶3个部位的LC-MS指纹图谱分析；并进一步运用Markerlynx软件进行多元统计处理,发现须根和根茎部位的化学成分相似,而叶与根茎部位的化学成分差异较大；并鉴定了叶中8个与根茎差异较大的化学成分和根茎中12个与叶差异较大的化学成分。同时利用OPLS_DA分析寻找根茎与须根部位中有差异的化合物进行结构鉴定,共鉴定了须根中2个化合物和根茎中5个化合物,作为目标化合物进行了POSI±IVE分析。发现根茎与须根部位化学成分整体种类相似,但部分化学成分含量有差别。此部分的研究提示可以考虑蜘蛛抱蛋须根与根茎一起作为药用。结论：本论文利用UPLC/Q-TOFMSE技术,结合多元统计分析软件,建立了中药组成成分表征、差异性分析及其结构快速鉴定的方法。以蜘蛛抱蛋属6种植物为研究对象,利用UPLC/Q-TOFMS技术进行了甾体皂苷组成的表征；根据甾体皂苷的质谱裂解规律和色谱规律快速鉴定了四川蜘蛛抱蛋中一系列甾体皂苷化合物的结构,包括新化合物及同分异构体；利用Markerlynx软件快速了解了不同种植物化学成分的异同,以及四川蜘蛛抱蛋植物须根、叶部位与根茎部位化学成分的异同,为四川蜘蛛抱蛋药用部位的研究提供了理论支持,鉴定的