医院常规细菌培养教材教学课件

医院常规细菌培养教材教学课件目录contents细菌培养基础知识常规细菌培养方法临床标本采集与处理细菌鉴定与药敏试验方法医院感染防控策略与措施实验室安全与废弃物处理01细菌培养基础知识03螺形菌弧菌、螺杆菌、螺旋体等01球菌单球菌、双球菌、链球菌、葡萄球菌等02杆菌棒状杆菌、分枝杆菌、乳酸杆菌等细菌种类与形态水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等营养需求温度、pH值、氧气需求等生长条件基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基等培养基类型细菌生长条件及培养基类型无菌室准备清洁、消毒、灭菌等无菌操作原则避免污染、减少微生物数量等无菌操作技术无菌接种、无菌划线、无菌涂布等无菌操作技术要点污染来源空气、水、培养基、操作工具等预防措施定期清洁消毒实验室、使用无菌操作技术、选用优质培养基和试剂等常见污染来源及预防措施02常规细菌培养方法

平板划线法操作步骤在无菌操作台上，用接种环沾取少量菌液，在平板培养基表面连续划线，然后将平板倒置，放入恒温培养箱中培养。注意事项划线时力度要均匀，避免划破培养基；接种环要灼烧灭菌，避免污染。优缺点平板划线法简单易行，但划线区域容易干燥，影响细菌生长。注意事项倾注前要确保平板无菌，样品与生理盐水要充分混匀。操作步骤将待测样品与适量无菌生理盐水混合均匀，倾注到无菌平板培养基上，迅速旋转平板使样品均匀分布，然后静置凝固，倒置放入恒温培养箱中培养。优缺点倾注平板法适用于各种样品，操作简便，但平板较厚，观察菌落形态不够清晰。倾注平板法将待测样品进行系列稀释，选择适宜稀释度的菌液接种到液体培养基中，放入恒温摇床中振荡培养。操作步骤注意事项优缺点稀释过程中要确保无菌操作，选择合适的稀释度以避免菌液过浓或过稀。液体稀释法适用于细菌计数和测定细菌对抗生素的敏感性，但操作相对繁琐。030201液体稀释法适用于专性厌氧菌的培养，需要在无氧环境下进行。厌氧培养法适用于需要高浓度二氧化碳才能生长的细菌培养。二氧化碳培养法通过在培养基中加入特定抑制剂或选择剂，选择性地抑制非目标菌的生长，促进目标菌的生长。选择性培养基法其他特殊培养方法03临床标本采集与处理采集时间采集部位采集量标本处理血液标本采集与处理01020304建议在患者寒战或发热初起时采集，同时避免在患者使用抗菌药物之前采集。成人一般选择肘静脉，新生儿和婴儿可选择颈静脉或股静脉。成人一般采集5-10ml，婴幼儿采集2-5ml。将血液注入无菌的血培养瓶中，轻轻混匀，防止凝固。一般建议在清晨第一次排尿时采集。采集时间清洁尿道口后，留取中段尿10-20ml于无菌容器中。采集方法将尿液充分混匀后，取10ml注入无菌的尿培养瓶中。标本处理尿液标本采集与处理采集方法用无菌容器收集痰液，避免混入唾液和鼻咽部分泌物。标本处理将痰液用无菌生理盐水稀释后，取适量注入无菌的痰培养瓶中。采集时间建议在清晨漱口后用力咳出深部痰液。痰液标本采集与处理其他类型标本采集与处理用无菌注射器穿刺抽取病变部位的液体，注入无菌的穿刺液培养瓶中。用无菌手术刀或剪刀取病变组织，放入无菌的组织培养瓶中。用无菌棉拭子擦拭咽部或扁桃体表面，将棉拭子放入无菌的咽拭子培养瓶中。用无菌棉签挑取粪便中的异常部分或黏液脓血部分，放入无菌的粪便培养瓶中。穿刺液组织标本咽拭子粪便标本04细菌鉴定与药敏试验方法通过结晶紫初染和碘液媒染后，用酒精脱色，再用蕃红复染，根据细胞壁成分和性质的不同，可将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。革兰染色法原理涂片、干燥、固定、初染、媒染、脱色、复染、镜检。革兰染色法步骤紫色为革兰阳性菌，红色为革兰阴性菌。革兰染色法结果判读革兰染色法鉴定细菌种类不同种类的细菌具有不同的酶系统，对底物的分解能力和代谢产物不同，通过检测细菌对底物的分解产物，可以鉴定细菌种类。生化反应原理糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、VP试验等。生化反应种类根据细菌对底物的分解能力和代谢产物不同，判断细菌种类。生化反应结果判读生化反应鉴定细菌种类药敏试验方法纸片扩散法、稀释法、E-test法等。药敏试验结果判读根据抑菌圈大小或最低抑菌浓度（MIC）判断细菌对药物的敏感性。药敏试验原理通过检测细菌对抗菌药物的敏感性，指导临床合理用药，减少耐药性的产生。药敏试验原理及方法介绍综合革兰染色法、生化反应和药敏试验结果，确定细菌种类和药物敏感性。结果判读为临床医生提供准确的病原学诊断和用药指导，减少经验性用药和盲目使用抗菌药物的现象，提高治疗效果和患者生活质量。同时，也有助于减少耐药性的产生和传播，保障公共卫生安全。临床意义结果判读及临床意义05医院感染防控策略与措施医院感染定义指住院病人在医院内获得的感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染；但不包括入院前已开始或入院时已处于潜伏期的感染。危害性分析医院感染不仅增加患者痛苦和经济负担，还影响医院声誉和医疗质量，甚至引发医疗纠纷和医疗事故。医院感染定义及危害性分析接触传播、飞沫传播、空气传播、消化道传播、血液传播等。传播途径老年人、婴幼儿、孕产妇、手术患者、重症患者、免疫力低下者等。易感人群特点医院感染传播途径和易感人群特点包括环境清洁消毒、医疗器械清洗消毒、无菌技术操作规范等。定期对医院各科室进行消毒效果监测和评估，确保消毒隔离制度得到有效执行。消毒隔离制度执行和监督检查监督检查消毒隔离制度包括洗手、卫生手消毒和外科手消毒等操作规范。手卫生规范通过培训、宣传海报、宣传视频等多种形式，提高医务人员手卫生意识和操作技能水平，促进手卫生规范的落实。同时，加强对患者和家属的手卫生宣传教育，提高其自我防护意识。培训和宣传推广手卫生规范培训和宣传推广06实验室安全与废弃物处理BSL-1级适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如非致病性球菌、杆菌等。要求实验室具备基本的生物安全防护水平，如门禁系统、生物安全柜等。BSL-2级适用于对人类或环境具有中等潜在危害的微生物，如流感病毒、沙门氏菌等。要求实验室除满足BSL-1级要求外，还需具备更严格的生物安全防护措施，如负压实验室、高效过滤排风装置等。BSL-3级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素，如结核分枝杆菌、炭疽芽孢杆菌等。要求实验室采取更高级别的生物安全防护措施，如独立建筑物、双门互锁传递窗等。实验室生物安全级别划分及要求选择棉质、透气、不易产生静电的实验服，穿戴时要将衣袖和裤脚扎紧，避免皮肤暴露。实验服根据实验需要选择合适的口罩类型，如N95口罩、医用外科口罩等。佩戴时要确保口罩紧贴面部，无漏气现象。口罩选择适合的手套材质和大小，确保手套无破损。在实验过程中要定期更换手套，避免交叉污染。手套在处理可能产生飞溅或气溶胶的实验时，需佩戴护目镜或面罩以保护眼睛和面部。护目镜或面罩个人防护装备选择和穿戴方法感染性废弃物包括培养物、被污染的实验器材和防护用品等。需使用专用黄色感染性废弃物袋进行收集，并标注“感染性废弃物”标识。收集后需进行高压蒸汽灭菌处理或化学消毒处理后再进行无害化处置。一般废弃物包括未被污染的实验器材、纸张等。可使用普通垃圾袋进行收集，并按照医院垃圾分类要求进行处置。废弃物分类收集和处理流程VS发生实验室生物安全事故时，应立即启动应急预案，采取必要的控制措施，如关闭实验室、疏散人员、封锁现