关于口腔鳞癌中Ets-2、MMP-9表达及其意义

关于口腔鳞癌中Ets-2、MMP-9表达及其意义

【摘要】目的探讨Ets-2、MMP-9在口腔鳞癌中的表达。方法应用PV-9000两步免疫组织化学染色法检测Ets-2、MMP-9在68例口腔鳞癌组织、19例口腔粘膜上皮异常增生组织和15例正常口腔粘膜组织的表达情况，分析其在口腔粘膜癌变过程中的变化趋势及在各组间表达的差异。结果1.Ets-2三组总体及组间比较均有显著性差异(P＜0.05)；在OSCC患者按年龄、性别、瘤体大小等分组间比较Ets-2的表达无显著性差异(P＞0.05)；在按有无淋巴结转移、临床分期等分组间比较Ets-2的表达差异有显著性差异(P＜0.05)。2.MMP-9的表达三组总体差异及组间差异均有统计学意义(P＜0.05)。在OSCC患者按年龄、性别、瘤体大小等分组间比较MMP-9表达无显著性差异(P＞0.05)；在按有无淋巴结转移、临床分期等分组间比较MMP-9的表达差异有显著性差异(P＜0.05)。3.在口腔鳞癌组织中，Ets-2与MMP-9的表达存在正相关关系(r=0.153，P＜0.05)。结论Ets-2、MMP-9的异常表达可能在口腔鳞癌的发生发展中起重要的作用。【关键词】口腔鳞状细胞癌Ets-2MMP-9免疫组织化学【Abstract】AimToinvestigatetheexpressionofEts-2、MMP-9inoralsquamouscellcarcinorma.MethodsThetwo-stepimmunohistochemistrytechnique(PV-9000)，wasusedtodiscovertheexpressionofEts-2andMMP-9in68OSCCtissues，19DOMtissuesand15NOMtissues，andtoanalyzetheirexpressionsindifferenttissues.Results1AstotheexpressionofEts-2，statisticalsignificancewasobservedbetweenthehighlyandmoderatelyaswellaspoorlygroups(P＜0.05)，butnotbetweenmoderatelyandpoorlygroups(P=0.534).Theresultsshowedtherewasnosignificantdifferencebetweenthegroupspidedbysex，ageandsizeoftumor(P＞0.05)，butitlinkedwithlymphnodemetastasisandTNMstage(P＜0.05).2AstotheexpressionofMMP-9，statisticalsignificancewasobservedbetweenthehighlyandmoderatelyaswellaspoorlygroups(P＜0.05)，butnotbetweenmoderatelyandpoorlygroups(P=0.589).Theresultsshowedtherewasnosignificantdifferencebetweenthegroupspidedbysex，ageandsizeoftumor(P＞0.05)，butitrelatedwithlymphnodemetastasisandTNMstage(P＜0.05).3TherewaspositivecorrelationbetweenEts-2andMMP-9inoralsquamouscellcarcinorma(r=0.153，P＜0.005).ConclusionTheimbalanceofEts-2、MMP-9mayplayanimportantorlintheoccurrenceanddevelopmentoforalsquamouscellcarcinorma.【Keywords】OralsquamouscellcarcinomaEts-2;MMP-9immunohisto-chemistryEts-2（人红血细胞增多症病毒致癌基因同源体2）是Ets家族转录因子的一员，它在肿瘤、骨发育和免疫应答中扮演重要角色[1]。它在膀胱癌、肝癌、乳腺癌等中高表达，故而有学者把它列为一种致癌基因。MMP-9则属于Ⅳ型胶原酶或明胶酶。在正常的生理情况下，基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TissueInhibitorsofMetalloproteinases，TIMPs)保持在一定的平衡状态，从而维持机体的正常状，使组织屏障的完整性得以维护[2]。在肿瘤发展的过程中，MMP-9通过降解细胞外基质(ExtracellularMatrix，ECM)中的型胶原使癌细胞突破原发部位正常的基底膜(BasementMembrane，BM)而发生浸润及转移。1资料与方法1.1临床资料选取郑州大学口腔医学院、河南省肿瘤医院、郑州大学第一附属医院2005-2008年手术切除的，且术后经病理检查确诊的原发口腔鳞状细胞癌(OralSquamousCellCarcinoma，OSCC)石蜡包埋标本68例。其中患者年龄35-79岁，男性40例，女性28例；所有患者均为首次治疗，且手术前未行放疗或化疗。全部标本均经常规福尔马林固定，石蜡包埋，4μm连续切片，分别用HE染色及免疫组化染色。肿瘤直径小于4cm者44例，不小于4cm者24例；有淋巴转移38例，无颈淋巴结转移30例；按鳞癌病理分级法，其中高分化鳞癌29例、中分化鳞癌25例、低分化鳞癌14例；肿瘤分期根据UICC2002标准，按TNM分期，Ⅰ期-Ⅱ期38例、Ⅲ期-Ⅳ期30例。1.2主要试剂鼠抗人Ets-2单克隆抗体（即用型），鼠抗人MMP-9单克隆抗体浓缩液，PV-9000通用型两步法免疫组化染色试剂盒，均购自北京中山生物技术有限公司。1.3免疫组化检测采用PV-9000两步免疫组织化学染色法检测，用已知阳性切片作为阳性对照，均以PBS液代替一抗作为阴性对照。1.4结果判定Ets-2:阳性染色定位于细胞浆；MMP-9阳性染色于细胞胞膜或胞浆。于显微镜下随机记数4个视野(10×40倍)，至少计数共400个细胞，计算平均每个视野下的阳性染色细胞数。用LI评价其表达水平。以阳性细胞比率＜5%为(-)，阳性细胞比率5-20%为(+)，阳性细胞比率＞20%为(++)[3]。1.5统计学处理应用SPSS13.0统计软件，两组间比较、多组间的两两比较采用秩和检验(Wilcoxon两样本比较法)，x2检验，相关性分析采用Spearman等级相关分析。取α=0