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文档简介

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准猪旋毛虫病酶联免疫吸附试验操作规程2005-05-20发布I本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位:中华人民共和国山西出入境检验检疫局本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。1猪旋毛虫病酶联免疫吸附试验操作规程1范围本标准规定了猪血清中抗旋毛虫抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的方法。本标准适用于猪血清中抗旋毛虫抗体的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准.GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(epvISO3696:1987)3材料与试剂3.1猪旋毛虫病ELISA诊断试剂盒2℃~8℃保存。试剂盒内应包括的物品如下;—-包被好的96孔酶标板:——抗旋毛虫阳性对照血清;-—抗旋毛虫阴性对照血清;——100倍浓度的酶标结合物;——底物溶液;——显色剂(ABTS);—-终止剂;——血清和酶标结合物稀释液;——10倍浓度的洗涤液。3.2待检血清按常规方法采血并分离血清,置4℃冰箱中备用,如需长期保存应置-20℃。4仪器4.1酶标仪(波长405nm)。4.2恒温震荡器(37℃)。4.3高压灭菌器。4.48道或12道洗头洗板机。5试验准备5.1温度恢复将所有试剂(除酶标结合物外)在使用之前恢复至室温。5.2洗涤液取一份试剂盒内提供的浓缩洗涤液加入到九份蒸馏水中,混匀备用。稀释用蒸馏水应符合2ABcDEFGHA1B1D16.6加酶标结合物重复6.4、6.5的操作。6.8加底物如果阳性对照血清孔的平均OD值≥1.000,阴性对照血清孔的平均OD值介于0.100~0.300之6.10测定OD值 (2)NC——阴性对照血清孔OD值的平均值;

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