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文档简介

1《动物炭疽诊断技术》编制说明（SN/TSN/T2701-2010其内容已不能很好地满足动物炭疽诊断和检疫检测的232、标准编制格式符合GB/T1.主要内容包括技术指标、参数、公式、性能要4规定；且细菌分离培养周期较长，且操作繁琐作，操作时间长，易污染；缺少快速灵敏的炭a)在普通营养琼脂平板上，形成扁平、灰白色、毛玻璃样、边缘不整齐、56pXO1pagFpagR1pXO22×PCRMix模板DNA2.1.2琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物：取10μLPCR产物点样于172.2实时荧光定量PCR（RT-qP在反应混合物配制区进行。设PCR反应管总数为n，其中n为待检样品管数×重复数3＋阳性管数1＋阴性管数1，每个样品的液应在冰盒中进行，配置完毕的反应液分装时2×TaqProHSU*ProbeMasterMix8ddH2O将配制的实时荧光定量PCR反应液充分混匀，按照每管19μL分装于八联管将离心后的PCR管放入实时荧光定量PCR检测仪内，设置探针：5’端选择检测结束后，保存结果，根据收集的荧光曲线92）阳性被检样本检测Ct值≤37，且扩增曲线呈典型SCt值≤40判为样本阳性，表明炭疽杆菌核酸阳性；否2）阳性被检样本检测Ct值≤35，且扩增曲线呈典型SCt值≤40判为样本阳性，表明炭疽杆菌核酸阳性；否定的方法进行扩增。基于上述结果，绘制PA基因扩增标准曲线。证明稀释度在0～107之间，CT值与拷贝数log值之间呈线性关系（R2=0.9993）。标准曲线见2.2.6CA基因荧光定量PCR结果定的方法进行扩增。基于上述结果，绘制CA基因扩增标准曲线，证明稀释度在0～108之间，CT值与拷贝数log值之间呈线性关系（R2=0.9971）。标准曲线见b)炭疽沉淀素血清，与健康皮张抗原和0.5%苯酚生理盐水作用15min，应c)阴性血清，与灭活炭疽抗原作用15min，应呈阴性反应。3.2将最小反应管按标本的编号顺序排好，向反应管内加注炭疽沉淀素血清0.1mL～0.2mL。然后吸取等量的待检抗原，沿反3.3血清与抗原的接触面，界限应清晰、明显b)两液接触面处白环模糊，不明显者为疑似反d)两液接触面界限不清，或其他原因增加了特异性好、灵敏性高的炭疽杆菌荧光定量PCR检测技术；此外（三）技术经济论证无（四）预期的经济效果（3）现行标准中均缺少针对动物炭疽诊断的综合判定表述，不利于临床兽中华人民共和国农业部公告第1125号“一、二、将炭疽病归类为二

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