微生物学检验课件

肠道杆菌

埃希菌属埃希菌属种类大肠埃希菌蟑螂埃希菌弗格森埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌形态染色革兰阴性短杆菌，多数有周鞭毛，有荚膜或微荚膜，有菌毛，均无芽孢培养特性兼性厌氧营养要求不高圆形光滑菌落菌落特征

SS平板－－红色菌落

Mac平板－－红色菌落

EMB平板－－紫黑色有金属光泽菌落生化反应氧化酶试验（－）分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等，（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖）KIA：AA＋－MIU：＋＋－IMViC：＋＋－－抗原结构抗原种类：O、H、K抗原意义：表示大肠埃希菌血清型血清型表示式：O:K:H举例：O111:K58:H2抵抗力胆盐、煌绿对该菌有抑制作用对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感，但易产生耐药性临床意义致病物质：K抗原、菌毛、内毒素、肠毒素（LT、ST）所致疾病：肠外感染：多为机会感染，表现为泌尿系感染（多见），胆囊炎、腹膜炎等

肠内感染：由致病大肠埃希菌引起，表现为腹泻。微生物学检验标本采集：

肠外感染：根据病变部位不同采集不同标本，如血液、尿液、分泌物等肠内感染：采集新鲜粪便检验程序

肠内感染粪便肠道弱选择培养基分解乳糖菌落ETEC生化反应毒素测定EPECEIECEHEC与O、K多价诊断血清做玻片凝集试验生化反应和血清学分型检验程序

肠外感染脓、尿、脑脊液等革兰染色镜检接种血平板分离培养可疑菌落生化反应氧化酶、KIAMIU报告结果血液增菌菌落涂片染色检验方法－肠外感染标本直接涂片镜检分离培养：标本接种血平板和Mac或EMB平版，经18～24小时培养，挑取可疑菌落作进一步鉴定。血标本先增菌，再分离培养。鉴定：菌落涂片生化反应氧化酶：－（与非发酵菌鉴别）

KIA：AA＋/－－

MIR：＋＋－

IMViC＋＋－－尿菌落计数：＞10万／ml尿液有诊断意义检验方法－肠内感染分离培养：粪便标本接种Mac或EMB平版，经18～24小时培养，挑取可疑菌落作进一步鉴定。生化反应：KIA、MIU、IMViC符合大肠埃希菌致病大肠埃希菌鉴定ETEC的鉴定生化反应符合大肠埃希菌毒素检测方法LTST生物学方法家兔或小白鼠肠袢试验家兔或小白鼠肠袢试验皮肤毛细血管通透性试验乳鼠灌胃试验免疫学法ELISAELISA固相放免分子生物学法基因探针基因探针EPEC的鉴定生化反应符合大肠埃希菌血清学分型先用多价诊断血清做玻片凝集试验，如凝集再用单价诊断血清确定血清型EIEC的鉴定生化反应特点（与志贺菌相似）发酵葡萄糖产酸不产气不发酵或迟分解乳糖多数菌株动力阴性与志贺菌的鉴别：毒力测定：豚鼠眼结膜试验血清学分型：O152、O124EHEC的鉴定生化反应符合大肠杆菌血清学分型：有50多个型，代表为O157:H7O157:H7不发酵山梨醇，有助于选择性分离培养鉴定依据在肠道选择平板上为发酵乳糖的有色菌落在KIA上多为＋＋＋－IMViC为＋＋－－尿酶试验－致病性大肠杆菌需作血清学鉴定或毒力测定LT与ST的比较特性不耐热肠毒素耐热肠毒素分子量较大，73000较小，1500～5000耐热性不耐热耐热免疫原性有无B亚单位受体肠黏膜GM1神经节苷酯肠黏膜GM1神经节苷酯致病机理活化细胞腺苷酸环化酶，细胞内cAMP含量升高，分泌功能亢进，引起腹泻活化细胞鸟苷酸环化酶，细胞内cGMP含量升高，分泌功能亢进，引起腹泻致病大肠埃希菌种类菌株侵袭部位疾病与症状致病机制ETEC小肠旅行者腹泻、婴幼儿腹泻、水样便、腹痛等LT、STEPEC小肠婴幼儿腹泻、水样便发热、呕吐病菌黏附、破坏细胞EIEC结肠志贺样腹泻，脓血便黏附、内毒素破坏细胞EHEC结肠出血性结肠炎等志贺样毒素（VERO毒素）EAggec小肠婴儿腹泻、水样便、脱水黏附、毒素大肠埃希菌生化反应结果KIAMIUIMViC氧化酶斜面底层气体H2S动力吲哚尿酶IMViCAA＋/-－＋/-＋－＋＋－－－KA－－＋＋－＋＋－－－KA－－－＋－＋＋－－－KA＋－＋/-＋－＋＋－－－与志贺菌的鉴别生化反应鉴别试验EIEC志贺菌粘质酸盐产酸＋－醋酸盐利用＋－赖氨酸脱羧＋－病

毒病毒是个体微小，结构简单，只含一种核酸，在细胞内以复制方式进行增殖的非细胞型微生物。

病毒特征体积微小：能通过滤菌器，需用电子显微镜观察非细胞结构：无细胞结构，由蛋白质和核酸组成，核酸类型单一：只含一种核酸严格的细胞内寄生以复制方式增殖抵抗力特殊：耐冷不耐热，对抗生素不敏感病毒的基本性状和分类病毒的形态、结构和化学组成病毒的大小与形态病毒体：指完整的、成熟的具有感染性的病毒颗粒。病毒的测量单位：纳米（nm）病毒形态：球形、杆形、丝状、弹状、砖形蝌蚪形等研究病毒大小和形态的方法：电子显微镜超滤膜法超速离心法病毒的结构与化学组成病毒结构

基本结构（核衣壳）辅助结构核心衣壳（壳粒→衣壳）包膜核心只含一种核酸，DNA或RNA（分别称DNA病毒和RNA病毒）控制病毒的增殖、变异、毒力等性状除去病毒衣壳仍具有感染性的核酸称感染性核酸

衣壳化学成分为蛋白质构型：螺旋对称、20面体立体对称、复合对称具有保护核酸的作用具有抗原性，能刺激机体产生免疫应答通过与宿主细胞表面受体结合参与感染包膜化学成分：类脂、多糖和蛋白质类脂、多糖来自宿主细胞蛋白质由病毒基因编码包膜蛋白形成刺突包膜蛋白的作用：具有抗原性参与病毒感染可引起机体发热

病毒的增殖病毒的增殖周期吸附穿入脱壳生物合成组装与释放病毒的增殖周期吸附：特异性吸附穿入：通过胞饮、融合、转位作用方式脱壳：生物合成：病毒mRNA的转录复制子代病毒核酸转译子代病毒蛋白组装与释放芽生释放、破胞释放病毒增殖示意图吸附宿主细胞穿入脱壳生物合成组装释放病毒的异常增殖和干扰现象病毒的异常增殖：顿挫感染、缺陷病毒病毒的干扰现象概念：两种病毒同时或先后感染同一宿主细胞，可发生一种病毒干扰另一种病毒增殖的现象。干扰机理诱导细胞产生干扰素、竞争干扰干扰类型：同种干扰、异种干扰、自身干扰实际意义：指导疫苗的合理使用理化因素对病毒的影响温度：病毒耐冷不耐热，应低温保存病毒辐射：破坏病毒核酸结构，导致病毒灭活脂溶剂：有包膜病毒对脂溶剂敏感消毒剂：可灭活病毒抗生素：病毒对抗生素不敏感，抗生素治疗病毒性疾病无效病毒的变异变异类型：毒力变异耐药性变异抗原性变异温度敏感性变异变异机制基因突变基因重组病毒的分类根据宿主不同分类动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、细菌病毒根据核酸类型分类：

DNA病毒、RNA病毒根据有无包膜分类：有包膜病毒、无包膜病毒临床分类呼吸道病毒、消化道病毒、肝炎病毒、虫媒病毒、出血热病毒、肿瘤病毒亚病毒类病毒：只有单股RNA，无蛋白质衣壳主要引起植物疾病朊粒只含具有感染性的蛋白质（分子量3.0×104

）与老年性痴呆、多发性硬化症、脑组织海绵状淀粉样变（疯牛病）等有关病毒的感染与免疫病毒的感染方式水平传播：通过黏膜表面：呼吸道、消化道、泌尿生殖道通过皮肤传播：媒介昆虫叮咬皮肤医源性传播：经输血、注射、拔牙、手术等垂直传播：经胎盘传播经产道传播病毒感染的类型隐性感染：成为病毒携带者；获得免疫显性感染：急性感染持续性感染慢性感染潜伏感染：慢发感染病毒的致病机制一、病毒对宿主细胞的直接作用影响细胞的生命力杀细胞感染非杀细胞感染细胞融合形成包涵体：有些病毒感染的细胞在普通光学显微镜下可观察到胞浆或胞核内出现圆形或卵圆形的斑块状结构细胞转化细胞凋亡二、病毒感染的免疫病理损伤体液免疫损伤通过Ⅱ、Ⅲ型超敏反应引起损伤细胞免疫损伤通过Tc细胞和Th1细胞杀伤病毒感染的细胞，同时造成组织细胞损伤病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官艾滋病毒直接杀伤CD4T细胞抗病毒免疫干扰素干扰素概念：干扰素是个体出生后，由病毒或干扰素诱导剂刺激多种细胞所产生的一种糖蛋白。种类：

Ⅰ型干扰素：α干扰素、β干扰素

Ⅱ型干扰素：γ干扰素（免疫干扰素）干扰素的产生及干扰素的作用机制干扰素的生物学活性：抗病毒、免疫调节、抗肿瘤NK细胞非特异性杀伤不受MHC限制通过依赖抗体的杀伤作用（ADCC）不依赖抗体的杀伤作用（自然杀伤）干扰素可调节NK细胞的杀伤作用特异性免疫体液免疫的保护作用中和抗体：阻止病毒吸附依赖抗体的细胞毒作用（ADCC）：杀伤病毒寄生的细胞细胞免疫的保护作用

TH1：释放细胞因子效应Tc（CTL）：特异性杀伤病毒寄生的细胞微生物学检查标本采集与送检：用于培养：注意时间、部位、处理、保存血清学诊断：双份血清标本检查方法：显微镜观察：电镜、光镜血清学：查病毒标记物、检测特异性抗体病毒基因检测病毒的分离培养组织细胞培养：将组织或细胞模拟体内的生理条件在试管或培养瓶内培养，使其生存或生长，称组织培养组织培养方法原代培养：如原代猴肾细胞等次代培养：二倍体细胞株：如人胚肺成纤维细胞传代株W1-38传代细胞系：多为肿瘤细胞或突变的二倍体细胞，如Hela细胞、Hep-2细胞等鸡胚接种鸡胚接种的优点鸡胚接种的缺点鸡胚接种部位卵黄囊接种尿囊腔接种绒毛尿囊膜接种动物接种病毒的鉴定－－初步鉴定动物感染：根据病毒感染动物的表现初步判断鸡胚接种：根据接种部位不同，收获不同材料，进行观察细胞培养：细胞病变效应红细胞吸附干扰作用物理化学实验病毒的鉴定－－最后鉴定中和试验已知抗体＋待检病毒－→细胞培养－→观察有无细胞病变交叉保护试验病毒免疫动物－→2周后，用标准动物作攻击试验不接种病毒的动物－→2周后，用标准动物作攻击试验病毒的血清学诊断标本采集：早期和恢复期双份血清急性期单份血清IgM的测定双份血清的IgG的测定常用方法

中和试验

补体结合试验

血凝抑制试验免疫荧光试验酶免试验胶乳凝集试验间接血凝试验特异性预防人工主动免疫灭活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗人工被动免疫抗病毒免疫血清丙球药物治疗金刚烷胺：抑制病毒脱壳-----预防感冒

病毒蛋白酶的抑制物：indinavir核苷类药物：疱疹净，阿昔洛韦抗病毒药物特异性抗体治疗性疫苗免疫制剂其他：干扰素及干扰素诱生剂，中草药抗病毒基因治疗：asODN，asON，核酶补体结合试验抗原-抗体

＋补体

＋绵羊红细胞-溶血素溶血不溶血病毒与抗体对应病毒与抗体不对应血凝试验和血凝抑制试验血凝试验：血凝素＋鸡红细胞－→红细胞凝集血凝抑制试验：血凝素－抗体＋鸡红细胞－→红细胞不凝集20面体立体对称RNACapsomere(壳粒)螺旋对称病毒的分离培养三大培养技术动物接种鸡胚接种细胞培养细胞病变效应（CPE）病毒在细胞内增殖引起细胞形态学改变。干扰素的产生及作用机制病毒结构示意图核心衣壳包膜无包膜病毒有包膜病毒吸附病毒释放示意图病毒形态病毒体结构模式DNA病毒的合成亲代DNA依赖DNA的RNA聚合酶mRNA

早期蛋白（DNA聚合酶）亲代DNA子代DNA子代mRNA

晚期蛋白（衣壳蛋白）转录转译复制转录转译RNA病毒的合成单股正链RNA

（mRNA）

早期蛋白（RNA多聚酶）亲代RNA子代RNA

晚期蛋白（衣壳蛋白）单股负链RNA

正链RNA（mRNA）

早期蛋白（RNA多聚酶）逆转录病毒的合成RNA逆转录酶互补DNARNA:DNA双股DNA整合宿主细胞DNARNA肠道病毒属小核糖核酸病毒科有72型人类肠道病毒：脊髓灰质炎病毒柯萨奇病毒埃可病毒新型肠道病毒（甲型肝炎病毒为72型）肠道病毒共同特征球形，20面体立体对称，无不包膜单股正链RNA细胞中增殖，引起细胞病变对脂溶剂敏感，耐酸经粪口途径传播临床表现多样化肠道病毒微生物学检验标本采集:粪便、肛拭、咽拭、脑脊液检验程序：病毒鉴定：中和试验分子生物学方法：检测细胞培养物中病毒基因组血清学试验：取双份血清进行中和试验检测抗体脊髓灰质炎病毒是引起脊髓灰质炎（小儿麻痹症）的病原体生物学形状形态结构：球形，无包膜，单股正链RNA，有四种核衣壳蛋白培养特性：采用细胞培养，引起典型的细胞病变分型：采用中和试验将Polio病毒分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，各型间无交叉反应抵抗力：在外界环境中抵抗力较强，在酸性环境中较稳定，对湿热、紫外线较敏感致病性与免疫性传染源：病人、带毒者传染途径：粪口途径致病机制：临床特征

90％的感染为隐性感染

1％～2％为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎仅约0.1%出现永久性弛缓性肢体麻痹极少数发展为延髓麻痹病后对同型Polio.v有牢固免疫力微生物学检查粪便标本细胞培养中和试验血清标本中和试验病毒培养血清学诊断基因检测核酸杂交技术聚合酶联反应（PCR）防治原则接种疫苗小儿麻痹糖丸（口服）灭活疫苗（注射）柯萨奇病毒和埃可病毒柯萨奇病毒分A、B两组，共29个血清型埃可病毒有31个血清型消化道感染，很少引起肠道症状临床表现多样血清学检查核核酸检测有助于病原学诊断尚无疫苗进行预防疾病柯萨奇病毒埃可病毒无菌性脑膜炎＋＋麻痹疾病＋＋疱疹性咽峡炎＋－普通感冒＋＋流行性肌痛＋＋手足口病＋报道不一心包炎＋＋新生儿心肌炎＋＋不明原因发热＋－皮疹＋＋婴幼儿腹泻－＋柯萨奇病毒与埃可病毒所致疾病轮状病毒属轮状病毒科球形；双股RNA；双层衣壳，，有放射状突起，呈轮状经粪口途径传播，引起腹泻以粪便为标本，查粪便中的病毒颗粒或病毒抗原疫苗尚在研制中轮状病毒分组及其致病性A组引起婴幼儿腹泻B组感染人----成人C组感染猪，偶尔也感染人D组感染鸟类E组感染猪轮状病毒电镜图项目活疫苗死疫苗接种方法口服糖丸肌肉注射抗体产生血清抗体、分泌型抗体血清抗体细胞免疫有无间接免疫通过接种者粪便排毒无稳定性差，不易保存易保存副作用极少数引起疫苗相关脊灰无免疫效果更好好减毒活疫苗与灭活疫苗的比较致病机制Polio病毒粪口途径小肠粘膜、淋巴结入血

第一次病毒血症

单核吞噬细胞

第二次病毒血症

脊髓前角运动神经原小儿麻痹症脊髓灰质炎病毒形态结构肠道杆菌是一大群生物学性状相近的革兰阴性杆菌。

与医学关系密切的肠道杆菌正常菌群埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属肠杆菌属沙雷菌属枸橼酸菌属致病菌致病性大肠埃希菌志贺菌属沙门菌属耶尔森菌属肠道杆菌共同特性形态染色：均为革兰阴性杆菌，无芽孢，有菌毛，多数有鞭毛，少数有荚膜培养特性：需氧、兼性厌氧；营养要求不高；光滑型菌落；生化反应：☆氧化酶－；触酶＋；硝酸盐还原试验＋发酵葡萄糖☆非致病菌多数分解乳糖，致病菌多数不分解乳糖抗原结构☆O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；种属特异性；与相应抗体结合出现颗粒状凝集；共同抗原可引起交叉反应☆H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热；与相应抗体出现絮状凝集☆表面抗原：化学成分为多糖；不耐热；可阻断O凝集遗传变异：S-R变异、H-O变异临床意义：☆致病物质：菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素☆传染途径：肠道传染、肠道外传染☆所致疾病：○肠道致病菌引起肠道传染病（细菌性痢疾、伤寒等）○条件致病菌：是医院感染的主要病原常用培养基选择性培养基：

☆SS平板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿、硫代硫酸钠等

☆Mac平板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐等

☆中国蓝平板：含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指示剂、

☆EMB平板：含乳糖、伊红和美蓝指示剂选择性平板的特点均含有乳糖和酸碱指示剂：细菌分解乳糖产酸，使培养基pH降低，指示剂呈酸性变色，指示剂不同，菌落呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有色菌落，不分解乳糖的细菌为无色菌落含有不同的抑制剂：对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的抑制作用，因此可以选择性的培养肠道致病菌。选择平板细菌生长现象双糖铁培养基（KIA）配方：含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、琼脂、酚红、乳糖1％、葡萄糖0.1％用途：主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2S。KIA结果观察：发酵葡萄糖：底层呈酸性反应（黄色），斜面为碱性反应（红色），若发酵葡萄糖产酸产气，底层同时有气泡发酵葡萄糖和乳糖：底层和斜面均呈酸性反应（黄色）产生H2S：培养基变黑1.未接种细菌3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性（AA＋－）2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（AA－－）4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（KA－－）5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性（KA－＋）微生物学检验标本采集肠道标本：新鲜粪便肠外标本：根据感染部位不同采集不同标本检验程序粪便肠道选择培养基可疑菌落生化反应血清学实验结果报告药敏试验肠道标本血平板、弱选择平板鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/发酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛肠道杆菌的生化反应鉴定与其他科细菌鉴别：苯丙氨酸（－）葡萄酸盐（－）苯丙氨酸（＋）葡萄酸盐（－）苯丙氨酸（－）葡萄酸盐（＋）埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属沙门菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属志贺菌属摩根菌属沙雷菌属枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属爱德华菌属耶尔森菌属初步分群菌属KIAMIU斜面底层气体H2S动力吲哚脲酶埃希菌属A/KA＋/-－+/-+-志贺菌属KA-－-+/--沙门菌属KA+D/++--变形杆菌属KA++/－+-/++克雷伯菌属AA+－-d+肠道杆菌属间鉴定微量生化反应系统鉴定将细菌的多项生化反应的2进制数结果数，转换成8进制编码而汇集成册，丛编码的检索表中检索而确定细菌菌名．－＋－－＋＋＋－－－＋＋＋－－010011100011100010

011

100

011

100000

0010

1001

2011

3100

4101

5110

6

111

713434虫媒病毒

虫媒病毒是一大群通过吸血节肢动物，叮咬人、家畜及野生动物而传播疾病的病毒，具有自然疫源性。

共同点球形，RNA病毒，有包膜以节肢动物为传播媒介所致疾病有季节性和地区性流行性乙型脑炎病毒是引起乙型脑炎的病原体生物学性状形态结构：球形，RNA病毒，有包膜培养特性：易感动物为小白鼠；可做细胞培养只有一个血清型较少变异传播途径传播媒介：三带喙库蚊传染源已感染的家畜和家禽是乙脑病毒的主要传染源（主要为幼猪）三带喙库蚊既是乙脑病毒的传播媒介又是储存宿主致病性与免疫性隐性感染普遍致病机制免疫性：病后免疫力牢固主要依靠中和抗体乙脑病毒微生物学检验标本：患者血液、脑脊液、尸检脑组织动物接种：乳鼠脑内接种－－发病细胞培养：原代地鼠肾细胞、鸡胚细胞－－红细胞吸附试验抗原抗体检测：采用免疫标记技术检测标本中抗原采用双份血清检测特异性抗体防治原则接种乙脑疫苗防蚊灭蚊登革病毒是引起登革热的病原体生物学特性球形单股正链RNA，有包膜流行病学特征储存宿主：人和猴传染源：患者和隐性感染者传播媒介：

伊蚊流行于热带、亚热带地区，特别是东南亚、西太平洋及中南美洲引起登革热表现:普通登革热、登革休克综合症发病机制带毒伊蚊叮咬网状内皮系统增殖病毒血症普通型出血/休克型登革热病人皮下出血汉坦病毒（HFRSV）又称肾综合征出血热病毒是肾综合征出血热的病原体引起由鼠类传播的自然疫源性疾病生物学性状球形，单股RNA有包膜易感动物为鼠类对脂溶剂敏感，对酸、热抵抗力弱流行病学特征有明显的地区性和季节性鼠类是主要的传播媒介人通过呼吸道、消化道、伤口接触带毒动物的分泌物被感染致病性与免疫性潜伏期一般为两周左右，起病急，发展快典型病例具有三大主症，即发热、出血和肾脏损害病程分为发热期、低血压休克期、少尿期、多尿期和恢复期病后免疫力牢固微生物学检查病毒分离血清学诊断检测特异性lgM抗体检测特异性lgG抗体注意防护疱疹病毒双股DNA，有包膜在细胞内形成包函体感染类型增殖性感染潜伏感染整合感染先天性感染单纯疱疹病毒（HSV）致病性与免疫性传染源：病人和健康带毒者感染方式：

HSV-1：通过口腔或污染的手及飞沫传播

HSV-2：性接触传播隐性感染多见感染类型原发感染：齿龈炎、疱疹性角膜结膜炎等潜伏感染：

HSV-1：潜伏于三叉神经节－－唇疱疹

HSV-2：潜伏于骶神经节先天性感染：流产、胎儿畸形、新生儿疱疹防治原则尚无特异性预防方法注射丙种球蛋白进行紧急预防药物治疗原发感染（唇疱疹）先天感染EB病毒（EBV）主要侵犯B细胞是引起传染性单核细胞增多症的病原体致病性传染源：病人、隐性感染者传播方式：主要经唾液传播，也可经血液传播隐性感染多见EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，继而感染B淋巴细胞，感染的B细胞进入血循环可造成全身性感染；病毒可以非增殖状态长期潜伏于B细胞所致疾病传染性单核细胞增多症鼻咽癌非洲儿童恶性淋巴瘤本章内容结束带毒蚊虫叮咬毛细血管内皮细胞及淋巴节内增殖少量入血

肝、脾单核巨噬细胞内增殖二次病毒血症突破血脑屏障中枢神经系统广泛病变

（乙型脑炎）顿挫感染乙脑病毒

电镜图微生物学检查检测EBV抗体检测异嗜性抗体检测EBV基因组及其表达产物水痘带状疱疹病毒（VZV）只有一个血清型人是VZV的唯一自然宿主皮肤是病毒的主要靶细胞可由同一种病毒引起两种不同的病症儿童初次感染引起水痘潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起带状疱疹，多见于成年人和老年人水痘病毒

呼吸道等途径局部淋巴结增殖血液丘疹、水疱疹、脓疱疹皮肤带状疱疹儿童时期水痘痊愈潜伏在脊髓后根神经节免疫力下降病毒沿感觉神经蔓延在皮肤细胞内增殖形似带状的水疱疹防治原则接种VZV减毒活疫苗药物治疗巨细胞病毒（CMV）CMV感染普遍多为隐性感染可长期带毒形成潜伏感染潜伏部位：唾液腺、乳腺、肾等传播途径：接触感染、先天感染、血源性感染、性感染等感染类型先天感染新生儿感染免疫力低下的病人易感染输血感染细胞转化防治原则疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗基因疫苗药物治疗非发酵菌是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性杆菌

非发酵菌主要种类铜绿假单胞菌不动杆菌属产碱杆菌属莫拉菌属黄杆菌属金氏杆菌属土壤杆菌属等非发酵菌主要特点氧化酶：＋；不动杆菌属除外O/F试验：O/－动力试验：多数有鞭毛，但半固体动力试验不明显，常采用镜检或鞭毛染色葡萄糖氧化发酵试验（O/F）O/F培养基（半固体高层）指示剂：溴麝香草酚蓝培养基pH：7.0O/F：OO/F：F葡萄糖氧化发酵试验（O/F）O/F：OO/F：FO/F：－肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/发酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛假单胞菌属假单胞菌科细菌根据rRNA-DNA同源性分为5群，其中Ⅰ群属于假单胞菌属，共7种细菌，代表菌种为铜绿假单胞菌。多为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌假单胞菌属共同点革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或丛鞭毛专性需氧营养要求不高氧化酶：＋O/F：OMac生长：＋产生水溶性色素铜绿假单胞菌－－形态染色革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或丛鞭毛铜绿假单胞菌－－培养特性专性需氧、营养要求不高最适温度35℃，42℃生长，4℃不生长产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素，培养物呈蓝绿色。培养物有生姜气味铜绿假单胞菌－－菌落特征典型菌落：扁平湿润，边缘不规则，菌落和培养基灰绿色，表面有金属光泽大肠菌样菌落：菌落圆形凸起，似大肠杆菌黏液型菌落：菌落凸起，呈粘液状侏儒型菌落：细小，无光泽在血平板上形成透明溶血环在SS、Mac上形成不发酵乳糖菌落铜绿假单胞菌－－生化反应氧化酶＋O/F：O枸櫞酸盐利用＋精氨酸双水解＋乙酰胺酶＋明胶液化＋铜绿假单胞菌－－抗原结构和抵抗力抗原结构O抗原：包括外膜蛋白和脂多糖H抗原S抗原抵抗力：对外界环境抵抗力强对多种抗生素不敏感铜绿假单胞菌－－临床意义致病物质：内毒素、外毒素、胞外酶、菌毛、荚膜所致疾病条件致病菌医院感染的重要病原菌大面积烧伤创面感染的重要病原菌铜绿假单胞菌－－检验程序标本增菌分离培养（血平板）最后鉴定可疑菌落（性状、色素）初步鉴定涂片染色镜检血标本涂片镜检氧化酶菌落特征绿脓素气味色素鉴定生化反应42℃生长分型O/F：O枸櫞酸盐利用＋精氨酸双水解＋乙酰胺酶＋明胶液化＋铜绿假单胞菌－－检验方法显微镜检查：标本直接涂片革兰染色镜检；鞭毛染色镜检培养：标本接种血平板、Mac平板分离培养，血标本先增菌，再转种鉴定：初步鉴定：菌落特征、水溶性绿色色素、生姜气味、氧化酶、O/F全面鉴定：色素不典型者需全面鉴定铜绿假单胞菌－－分型检查血清学分型噬菌体分型质粒指纹图谱分析脉冲场凝胶电泳分型检查意义：对医院感染的流行病学调查有重要意义荧光假单胞菌革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛专性需氧营养要求不高，普通平板、Mac平板可生长最适生长温度25～30℃，4℃生长，35℃、42℃不生长产生水溶性荧光素（青脓素），不产绿脓素氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶＋；明胶液化＋具有嗜冷性，可在冰箱储存血中繁殖恶臭假单胞菌革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛专性需氧最适生长温度25～30℃，4℃生长，35℃、42℃不生长产生水溶性荧光素（青脓素），不产绿脓素；陈旧培养物有腥臭味氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶－；明胶液化－斯氏假单胞菌革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛或侧生鞭毛最适温度35℃，42℃生长，4℃不生长菌落特征：干燥、粗糙、皱缩，可产生黄色色素，无绿脓素和荧光素产碱杆菌属粪产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌氧化亚种木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种产碱杆菌属－－主要特征革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无荚膜专性需氧营养要求不高，普通平板和Mac平板上可生长氧化酶＋、O/F：K、不分解任何糖是医院感染病原菌之一，粪产杆菌多见检验程序产碱杆菌属－－鉴定要点革兰阴性杆菌氧化酶＋O/F：－硝酸盐还原－；亚硝酸盐还原＋KIA：底层斜面不变色注意与不动杆菌鉴别不动杆菌属－－主要特征现已命名6个生物种，代表菌为醋酸钙不动杆菌革兰阴性球杆菌，成双排列，无鞭毛，动力阴性专性需氧，营养要求不高，普通平板、Mac平板上可生长氧化酶－；O/F：O／－；硝酸盐还原－临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌检验程序不动杆菌属－－鉴定要点革兰阴性球杆菌无动力氧化酶－硝酸盐还原－KIA：底层斜面不变色注意与形态相似的奈瑟菌鉴别注意与不分解糖的产碱杆菌鉴别嗜麦芽窄食黄单胞菌革兰阴性杆菌，丛鞭毛专性需氧、营养要求不高，普通平板生长良好，麦康凯平板可生长氧化酶－葡萄糖O/F：－麦芽糖O/F：＋赖氨酸脱羧＋明胶液化＋黄杆菌科革兰阴性杆菌，无鞭毛专性需氧、营养要求不高，普通平板上生长，形成黄色色素麦康凯平板上不生长氧化酶＋O/F：O莫拉菌属革兰阴性球杆菌，不易脱色，成双排列（与奈瑟菌相似），无鞭毛，部分菌株有荚膜专性需氧，营养要求高，普通平板上不生长氧化酶＋O/F：－非发酵菌－－检验程序标本增菌分离培养（血平板、麦康凯）可疑菌落涂片染色镜检血标本涂片动力观察革兰染色鞭毛染色氧化酶O/F硝酸盐还原KIA斜面底层不变色其他生化反应测验1关于铜绿假单胞菌，错误的是

A

革兰阴性杆菌

B

氧化酶－、触酶－

C

硝酸盐还原－

D

产生水溶性蓝绿色素

E

菌落有金属光泽测验2下列哪项是非发酵菌的主要特征

A需氧或兼性厌氧

B

革兰阴性杆菌

C

营养要求不高

D

无芽孢

E

不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖测验3对革兰阴性杆菌出现下列哪种特征，可怀疑为非发酵菌

A氧化酶＋

B

发酵葡萄糖

C

动力阴性

D

触酶＋

E

氧化利用麦芽糖测验4假单胞菌属中营养要求不高，新分离菌株在培养基上形成特征性干燥、皱缩样菌落，并黏附于平板表面难以移动，可产生黄色色素的细菌可能是

A铜绿假单胞菌

B

斯氏假单胞菌

C

产碱假单胞菌

D

荧光假单胞菌

E

恶臭假单胞菌测验5关于不动杆菌错误的是

A氧化酶＋

B

硝酸盐还原—

C

革兰阴性杆菌，形态多为球杆状

D

无动力

E

专性需氧分枝杆菌属

分枝杆菌属主要特点是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用抗酸染色。专性需氧营养要求特殊，大多数生长缓慢。不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质，所致疾病呈慢性。分枝杆菌属种类结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌非典型分枝杆菌麻风分枝杆菌光产色分枝杆菌暗产色分枝杆菌不产色分枝杆菌迅速生长分枝杆菌分枝杆菌属结核分枝杆菌－－形态染色细长略弯，分枝生长趋势无芽孢，无鞭毛，部分菌株有荚膜革兰染色阳性，不易着色抗酸染色阳性结核分枝杆菌－－培养特性生长条件：专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5～6.8、营养要求高、培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等生长现象：※生长缓慢※改良罗氏培养基菌落特征：干燥、淡黄色、质地较硬的R型菌落※液体培养基：形成菌膜，有毒株呈索状生长结核分枝杆菌－－生化反应生化反应不活泼，不发酵糖类与非结核分枝杆菌鉴别：

耐热触酶试验－；（非结核分枝杆菌＋）与牛分枝杆菌鉴别烟酸试验＋；（牛分枝杆菌－）结核分枝杆菌－－抵抗力与变异性抵抗力特点：“三耐四敏”※耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1：13000）※对湿热、70％乙醇、紫外线、常用抗结核药物（但长期使用易产生耐药性）变异性

※典型形态－→多形性※R型菌落－→S型菌落※有毒－→无毒（用于制备疫苗）※抗结核药敏感－→耐药结核分枝杆菌－－致病物质脂质索状因子:与该菌毒力有密切关系磷脂:分枝菌酸：与抗酸性有关蜡质D:具有佐剂作用硫酸脑苷脂蛋白质糖类结核杆菌不产生内、外毒素，不产生侵袭性酶结核分枝杆菌－－所致疾病与免疫性经多途径感染，引起结核病，以肺结核多见类型：原发感染和继发感染免疫性※抗结核免疫以细胞免疫为主※抗结核免疫属带菌免疫※抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现结核分枝杆菌－－结核菌素试验原理：用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反应的试验。结果：根据注射部位是否出现红肿判断结果＜5mm为阴性≥＞5mm为阳性＞15mm为强阳性应用：选择卡介苗接种对象；判断卡介苗接种效果；辅助诊断婴幼儿结核病；测定肿瘤患者细胞免疫状态结核分枝杆菌－－检验程序标本核酸检测接种固体培养基可疑菌落涂片抗酸染色镜检抗体检测慢性生长菌快速生长菌菌种鉴定标本前处理接种液体培养基接种小白鼠豚鼠脏器涂片镜检抗酸染色鉴定试验结核分枝杆菌－－涂片检查直接涂片薄涂片厚涂片集菌涂片沉淀集菌法漂浮集菌法荧光显微镜检查法：金刚胺O染色→荧光显微镜下检查抗酸染色－－报告方式报告方式镜检结果-仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌±300个视野内发现1~2条抗酸菌＋100个视野内发现1~9条抗酸菌2＋10个视野内发现1~9条抗酸菌3＋每个视野内发现1~9条抗酸菌4＋每个视野内发现9条以上抗酸菌结核分枝杆菌－－分离培养标本前处理：※目的：杀死杂菌；液化标本※方法：4％NaOH法；4％H2SO2法；胰酶-新洁尔灭法等培养基选择：罗氏培养基、米氏培养基、小川培养基等接种培养培养结果记录与报告方法报告方式培养结果＋斜面20个菌落以上，占斜面1/4以下2＋斜面上菌落生长面积占1/4以上，1/2以下3＋斜面上菌落面积占斜面1/2以上，3/4以下4＋斜面上菌落生长密集，成菌苔非典型分枝杆菌是指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。大多为环境中的腐生菌对酸碱比较敏感对常用抗结核药耐受为条件致病菌，艾滋病患者易感染鸟复合分枝杆菌麻风分枝杆菌－－生物学性状为抗酸杆菌细胞内寄生有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状，称为麻风细胞体外人工培养尚未成功犰狳是动物感染模型麻风分枝杆菌－－临床意义与微检经呼吸道、接触感染引起麻风病瘤型麻风（开放型）：传染性强结核样型（闭锁性）：传染性弱微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的主要依据麻风杆菌犰狳抗酸染色染液组成：石炭酸复红、3％盐酸酒精、美兰染色步骤

※石炭酸加温染5分钟，水洗

※3％盐酸酒精脱色致无红色脱下为止，水洗

※美蓝染1分钟，水洗，干后镜检染色结果

※抗酸菌：红色

※非抗酸菌：蓝色染色意义：区别抗酸菌与非抗酸菌结核分枝杆菌菌落结核分枝杆菌（抗酸染色）麻风病人肝炎病毒

是引起病毒性肝炎的病原体

已知的肝炎病毒：甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型肝炎病毒甲型肝炎病毒是引起甲型肝炎的病原体生物学形状属肠道病毒72型形态：呈球形结构：直径27~32nm,单股正链RNA，无包膜动物模型：黑猩猩对HAV易感细胞培养：原代猕猴肝细胞、猴胚肾细胞，一般不产生细胞病变抗原型别单一抵抗力：抵抗力强，对乙醚、酸、热等较稳定致病性与免疫性传染源：病人传染方式：粪口途径致病机制：在肝细胞内增殖，不直接造成肝细胞损伤，免疫病理作用导致肝细胞损伤免疫性：刺激机体产生抗HAVIgG和IgM

抗HAVIgG对再感染具有免疫力微生物学检查免疫电镜检测病毒颗粒免疫学方法检测病毒抗原检测抗HAVIgM是确诊甲型肝炎的依据方法：ELISA法和放射免疫测定PCR法：检测病毒核酸检测抗HAVIgG主要用于流行病学调查防治原则特异性预防：接种甲型肝炎病毒减毒活疫苗紧急预防：肌肉注射丙种球蛋白一般性预防：加强饮水和食品的卫生监督管理乙型肝炎病毒是引起乙型肝炎的病原体乙型肝炎易发展为慢性乙肝乙肝病毒在世界范围内传播乙肝病毒携带者达10％以上生物学形状形态与结构大球形颗粒:又称Dane颗粒，是完整的HBV小球形颗粒:是病毒组装后过剩的衣壳蛋白管形颗粒：由小球形颗粒串连而成

乙肝病毒的基因短链：为正链，长度是长链的50％～100％长链：为负链，含HBV全部遗传信息

S区：编码HBsAg和前S1抗原和前S2抗原

C区：编码HBcAg和HBeAgP区：编码DNA多聚酶

X区：编码HBxAg(可能与肝癌发生有关)乙肝病毒的复制方式吸附、穿入肝细胞脱壳转译外衣壳蛋白转译内衣壳蛋白前基因组复制子代核酸组装释放HBV的抗原组成

HBsAg:以三种不同形式存在于患者血清中HBsAg亚型的分布有明显地区差异,并与种族有关血清HBsAg是感染HBV的重要标志HBsAg刺激机体产生的抗-HBs是中和抗体,对机体有保护作用关于前S1和前S2抗原

HBcAg存在于Dane颗粒中不易在血液中检出可在感染的肝细胞表面存在刺激机体产生抗-HBc（IgG、IgM）血清抗-HBcIgM的检出，表明病毒在肝细胞中复制

HBeAg存在于Dane颗粒中游离存在于血液中是病毒复制及强传染性的指标产生抗－HBe，是预后良好的征象突变株可不产生HBeAgHBV其他生物学性状培养:

◆黑猩猩是HBV最敏感的动物模型

◆细胞培养已获成功抵抗力:强

◆能耐受低温、紫外线、干燥和一般消毒剂100℃10分钟、高压蒸汽灭菌、0.5％过氧乙酸等能使HBV灭活传染源与传播途径传染源：乙肝病人、无症状病毒携带者传播途径：血液、血制品等途径传播母婴垂直传播临床表现：无症状携带者急性乙肝慢性乙肝暴发性肝炎肝外表现：发热、皮疹、血管炎等致病机制细胞免疫介导的免疫损伤免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤自身免疫反应的免疫损伤病毒变异：逃逸免疫免疫性抗-HBs：一般于感染后4～5月阳转，持续6个月或数年，是保护性抗体抗-HBc：一般于感染后3～5周阳转，无保护作用，IgM可作为急性一干的诊断指标，IgG是HBV既往感染的指标抗-HBe：一般在HBeAg消失时出现，是病情开始恢复的征兆HBV诱导免疫应答对机体的双重作用免疫保护作用抗－HBS和抗前S对病毒的中和作用

CTL对细胞内病毒的清除作用免疫损伤作用肝细胞损伤肝外损伤机体免疫状态与HBV感染的转归免疫功能正常－－隐性感染或急性乙肝，病毒被清除免疫低下－－慢性乙肝免疫过强－－暴发性肝炎免疫耐受－－HBV无症状携带HBV与原发性肝癌流行病学方面动物模型病毒分子结构微生物学检查HBV抗原抗体系统的检测HBV五项指标

HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe

抗HBcHBV抗原抗体检测的应用乙型肝炎的诊断判断传染性判断预后筛选献血员检测疫苗接种效果流行病学调查HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc结果分析HBV抗原抗体检测结果的临床分析＋－－－－HBV感染或无症状携带＋＋－－－急慢性乙肝或无症状携带＋＋－－＋急慢性乙肝（大三阳）＋－－＋＋趋于恢复（小三阳）－－＋＋＋－－＋＋－既往感染恢复期－－－－＋－－＋－－既往感染或接种过疫苗防治原则控制传染源，切断传播途径人工自动免疫：疫苗（血源性、基因工程)人工被动免疫：高效价人血清球蛋白（HBIg）丙型肝炎病毒（HCV）球形，有包膜，属RNA病毒传染源：病人、病毒携带者传播途径：输血、注射、性接触等引起丙型肝炎比乙型肝炎更易转为慢性病后免疫力不牢固ELISA法检测抗HCV抗体丁型肝炎病毒（HDV）属缺陷病毒，由HBsAg构成其外壳经输血等途径传播只感染HBsAg阳性的人与HBV协同或同时感染戊型肝炎病毒（HEV）球形，无包膜，属RNA病毒传染源：病人传播途径：粪口途径病情较重，孕妇感染死亡率高乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（隐性感染）HBsAg抗HBs抗HBc(IgG)抗HBeHBeAg03月5月8月1年5年乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（慢性持续性肝炎）HBsAg抗HBc(IgG)抗HBe03月1年10年20年30年HBeAgHBV基因结构环状双股不完全闭合的DNA长链有4个开放读码框架，分别为：S区C区P区X区长链短链DNA聚合酶乙肝病毒的复制乙肝病毒的三种颗粒Dane颗粒核心：双股不完全闭合的DNA

和DNA聚合酶内衣壳：20面立体对称外衣壳：相当于病毒的包膜Dane结构HBV感染的分布甲型肝炎病程HAV体内过程HAV电镜图HAV病毒结构呼吸道病毒

种类正粘病毒：流感病毒副粘病毒：麻疹病毒腮腺炎病毒风疹病毒呼吸道合胞病毒流行性感冒病毒属正粘病毒科是引起流行性感冒的病原体分甲、乙、丙三型甲型流感病毒常引起流感的大流行生物学特性形态结构：球形；属RNA病毒；有包膜结构核心：RNA（分阶段）、核蛋白、

RNA聚合酶基质蛋白（M蛋白）：具有型的特异性包膜血凝素（HA）神经氨酸酶(NA)血凝素与神经氨酸酶是流感病毒的表面抗原是流感病毒分亚型的依据抗原性极不稳定，常发生变异流感病毒分型与变异分型根据核蛋白和M蛋白抗原的不同，流感病毒分甲、乙、丙三型。根据HA、NA抗原不同分若干亚型变异：甲型流感病毒的HANA极易变异

抗原性漂移：变异幅度小，常造成流感中小流行抗原性转变：变异幅度大，常引起流感大流行流行年代亚型类别1947H1N1（亚甲型）1957H2N2（亚洲甲型）1968H3N2（香港甲型）1977H1NI、H3N2甲型流感病毒亚型类别、流行年代培养特性鸡胚培养：不引起鸡胚出现病变，取羊水或尿囊液做血凝试验细胞培养：红细胞吸附试验抵抗力：较弱，不耐热，对干燥、乙醚、甲醛和乳酸等敏感。致病性传染源：病人传播途径：呼吸道致病机制流感病毒呼吸道毒性物质进入血流呼吸道炎症全身中毒症状免疫性病后对同型流感病毒产生免疫力抗HA、抗NA抗体为中和抗体微生物学检查病毒分离：

标本：取患者咽漱液或鼻咽拭

分离方法：鸡胚接种：尿囊腔接种－－收获尿囊液－－血凝试验－－血凝抑制试验细胞培养微生物学检查血清学诊断血凝抑制试验、中和试验、补体结合试验、酶免疫测定抗原检测直接从病人呼吸道分泌物、脱落细胞中检测抗原分型鉴定核酸杂交、PCR、序列分析防治原则一般性预防：空气消毒特异性预防:接种疫苗灭活三价疫苗亚单位疫苗减毒活疫苗禽流感病毒禽流感病毒是流感病毒属的一个成员禽流感病毒具有A型抗原,属于A型流感毒,列为禽流感病毒类。本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝状,为多形性。其直径为80一120nm。具有血凝素（HA）和神经氨酸（NA）历史上高致病性的禽流感都是由H5和H7引起的禽流感病毒致病性禽流感在家禽中以鸡和火鸡及某些野禽的易感性最高一般认为带毒的候鸟使禽流感病毒成世界性传播人可通过与病禽接触而感染麻疹病毒属副粘病毒科球形病毒，单股RNA，有包膜只有一个血清型在细胞中形成嗜酸性包涵体经呼吸道传播，引起麻疹严重的并发症－－肺炎、亚急性硬化性全脑炎病后免疫力牢固接种麻疹疫苗进行特异性预防（8个月、7岁）丙种球蛋白可进行紧急预防

麻疹临床表现发热

畏光、流泪

口腔粘膜出现柯氏斑

皮肤出现红色斑丘疹

冠状病毒属冠状病毒科包括人冠状病毒、禽传染性支气管炎病毒、鼠肝炎病毒严重急性呼吸衰竭综合症（SARS）是新冠状病毒引起的急性呼吸道传染病生物学特性形态结构：多形性，单股正链RNA,有包膜，病毒外形呈日冕状抵抗力：较弱，对湿热、脂溶剂、消毒剂敏感SARS病毒致病性腮腺炎病毒属副粘病毒科球形，有包膜，单股正链RNA只有一个血清型经呼吸道飞沫传播，引起腮腺炎可引起睾丸炎、卵巢炎、脑膜炎等并发症病后免疫力牢固接种腮腺炎减毒活疫苗进行特异性预防风疹病毒属披膜病毒科球形，单股正链RNA，有包膜只有一个血清型经呼吸道传播，引起风疹成人：出疹、关节疼痛等儿童：发热、出疹、耳后淋巴结肿大经胎盘传播，引起先天性风疹综合症接种风疹减毒活疫苗进行特异性预防NAHA包膜M2M1基质蛋白41235678核心RNA核蛋白RNA聚合酶流感病毒电镜图

弧菌科常规检验

弧菌科种类弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光菌属等弧菌科共同特征革兰阴性菌需氧兼性厌氧营养要求不高氧化酶＋发酵葡萄糖产酸不产气弧菌科三个菌属的鉴别试验弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属甘露醇+/-+-鸟氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生长+--嗜盐性+/---霍乱弧菌是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株形态染色革兰阴性弧形或逗点状单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样”无芽孢，无荚膜在新鲜粪便中成“鱼群样”排列霍乱弧菌革兰染色鞭毛染色培养特性兼性厌氧营养要求不高耐碱不耐酸，常用pH8.4～9.2碱性培养基在液体培养基中形成菌膜菌落圆形、较大、扁平霍乱弧菌常用培养基碱性蛋白胨水碱性琼脂平板硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）生化反应试验名称结果试验名称结果氧化酶+吲哚+硝酸盐还原+葡萄糖+赖氨酸+蔗糖+鸟氨酸+甘露醇+精氨酸双水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明胶液化+霍乱弧菌生物型O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型两种生物型具有相同的抗原结构两种生物型多数生物学性状相似霍乱弧菌两种生物型的鉴别鉴别试验古典生物型ElTor生物型V-P-+羊红细胞溶解-+50U多粘菌素SR鸡红细胞凝集-+Ⅳ组噬菌体裂解+-Ⅴ组噬菌体裂解-+霍乱弧菌分群、型O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础根据O抗原不同分为139个血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群称为非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（见下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻叶型（AC）+-+彦岛型（ABC）+++抵抗力与变异ElTor型抵抗力较古典型强，在水中存活时间长对酸性物质敏感对庆大霉素耐受多次传代可失去典型形态而成为杆状临床意义致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。所致疾病：经肠道传染，引起烈性肠道传染病－－霍乱，为甲类传染病。典型病人粪便呈“米泔水”样病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。微生物检验－－标本采集发病早期采集标本以“米泔水”样便为主，及时送检卡－布培养基保存严密包装，专人送检检验程序标本增菌培养碱性蛋白胨水分离培养（TCBS、碱性平板）生化鉴定分型血清学鉴定确诊报告初步报告快速诊断直接涂片动力、制动试验检验方法－－显微镜检查涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形态、排列动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意运动方式制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动力消失分离培养标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂，TCBS：出现黄色菌落庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落鉴定生化反应：粘丝试验、霍乱红反应确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为O1群确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别确定生物型：第Ⅳ组噬菌体裂解试验多粘菌素B敏感试验鸡红细胞凝集试验溶血试验副溶血性弧菌－－生物学性状革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢，无荚膜营养要求不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5％NaCl，无盐培养基不生长TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落神奈川现象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞副溶血性弧菌－－临床意义致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐热相关溶血素）所致疾病：食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引起食物中毒气单胞菌属形态染色：革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端鞭毛，无芽孢生长条件：兼性厌氧；营养要求不高生长温度较宽，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生长嗜温菌10～42℃生长气单胞菌属生长现象TCBS上不生长血平板：灰白、光滑、凸起菌落肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落生化反应氧化酶＋、触酶＋发酵葡萄糖产酸产气6.5％NaCl不生长O129不敏感多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药气单胞菌属－－临床意义致病物质：溶血毒素、细胞毒素所致疾病：肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌肠外感染：败血症、伤口感染等多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药检验程序标本增菌分离培养（血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落肠毒素测定初步生化反应涂片染色镜检血标本氧化酶TCBS生长O/129耐盐试验鉴定试验与肠道杆菌、非发酵菌鉴别与邻单胞菌属和弧菌属鉴别气单胞菌属种间鉴别肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/发酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛鉴定依据革兰阴性杆菌，丛鞭毛肠道选择平板上无色透明菌落氧化酶＋、葡萄糖发酵＋O/129：RTCBS：－6.5％NaCl：－邻单胞菌属－－主要性状只有一个菌种：类志贺邻单胞菌革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无荚膜兼性厌氧，营养要求不高在SS平板形成不发酵乳糖菌落氧化酶＋，葡萄糖发酵＋O/129：STCBS：不生长6.5％NaCl：不生长赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均＋多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药邻单胞菌属－－临床意义腹泻、食物中毒，多见于夏季败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。邻单胞菌属－－检验程序标本增菌分离培养（血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落初步生化反应涂片染色镜检血标本氧化酶TCBS生长O/129耐盐试验邻单胞菌属－－鉴定与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学与气单胞菌属鉴别：O/129，肌醇试验与弧菌属鉴别：TCBS、6.5％NaCl生长试验链球菌属

分布：自然界、人和动物肠道、健康人鼻咽部所致疾病：致病链球菌引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。生物学性状形态染色培养特点生化反应抗原构造分类抵抗力形态染色革兰阳性球菌，链状排列，无鞭毛，无芽孢，可形成荚膜

在液体培养基中易形成长链致病性强的菌株多为长链在脓汁标本中多为短链培养特点－－生长条件营养要求高，在含血液、血清培养基上生长良好

需氧、兼性厌氧D群链球菌可在10℃、45℃生长培养特点－－生长现象液体培养基：呈沉淀生长现象血平板：灰白色、细小、圆形、光滑的、有不同溶血现象的菌落分类菌落特征甲型（α）溶血性链球菌灰色、针尖状菌落、周围有草绿色溶血环（α溶血）乙型（β）溶血性链球菌灰白色、细小菌落、周围有宽大透明溶血环（β溶血）丙型（γ）链球菌灰白色小菌落、无溶血环链球菌在血平板上菌落特征甲链乙链丙链分类－－根据溶血现象分类甲型链球菌：属条件致病菌乙型溶血性链球菌：致病力强丙型链球菌：无致病力分类－－根据抗原构造分类群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，可将链球菌分为20群（A、B、C、D、E、D、E等），引起人类感染的链球菌90％为A群。

型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四种，根据M抗原不同，可将A群分为100型。生化反应触酶试验（－）A群链球菌：杆菌肽敏感试验（+）B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+）D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+）肺炎链球菌生物学特性形态染色：革兰阳性球菌，矛尖状，成双排列，在人和动物体内形成荚膜血平板上菌落特征：菌落细小、周围有草绿色溶血环，48小时后，由于菌落自溶，呈现“脐窝状”生化反应：Optochin敏感试验（+）胆汁溶菌试验（+）菊糖分解试验（+）动物试验：小白鼠毒力试验（+）临床意义－－A群链球菌致病物质:致热外毒素：致热、细胞毒作用、使皮肤产生红疹、抗原性强溶血素：溶解红细胞、破坏血小板和白细胞，分为溶血素O和溶血素S两种侵袭性酶：透明质酸酶、链激酶、链道酶，有利于细菌在体内扩散M蛋白：具有抗吞噬作用；与肾小球基底膜有共同抗原成分，与超敏反应有关链球菌溶素O对氧敏感、抗原性强，刺激机体产生抗O抗体，抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所致超敏反应性疾病的辅助诊断临床意义－－A群链球菌所致疾病化脓性感染：扁桃体炎、丹毒、蜂窝织炎、淋巴管炎、败血症等猩红热风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎临床意义－－其他链球菌B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。变异链球菌：与龋齿有密切关系链球菌常规检验标本采集根据临床标本不同采集不同标本细菌鉴定的基本程序标本直接涂片革兰染色镜检分离培养取可疑菌落鉴定试验和药敏试验结果报告脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色观察菌落及溶血现象触酶试验（－）Optochin敏感试验肺炎链球菌草绿色链球菌杆菌肽胆汁七叶苷A群链球菌D群链球菌肠球菌6.5％NaCl血清学分类检验方法—直接镜检方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检初步报告:“查见革兰阳性球菌”“查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜，疑似肺炎链球菌”荚膜肿胀试验可确诊，“找到肺炎链球菌”检验方法—分离培养脓、痰、脑脊液标本－→接种血平板，进行分离培养菌落特征：

甲型链球菌：针尖样菌落、周围有草绿色溶血环；

乙型链球菌：灰白色小菌落、周围有透明溶血环；

丙型链球菌：灰白色菌落、无溶血环肺炎链球菌：灰白色扁瓶小菌落、周围有草绿色溶血环，培养较久形成脐窝样菌落检验方法—增菌培养增菌培养基：葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤血液与培养基比例：1：10，即5ml标本，50ml增菌液。拮抗剂：硫酸镁（拮抗多种抗生素）、对氨基苯甲酸（拮抗磺胺）等培养时间：常规培养：18～24小时至1周；亚急性细菌性心内膜炎：观察7天至1月链球菌鉴定细菌形态及染色性菌落特征鉴定试验杆菌肽敏感试验CAMP试验胆汁七叶苷试验Optochin敏感试验血清学分群快速胶乳凝集试验肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别菌名形态菌落胆汁溶菌Optochin菊糖分解小白鼠毒力肺链矛尖状、成双排列、有荚膜脐窝状、草绿色溶血环+++/－+甲链圆形、短链、无荚膜针尖状、草绿色溶血环－－－－乙型溶血性链球菌的鉴定β-溶血环包括A、B、C、D、F、G群C群可采用血清学鉴定其它群采用生化反应或其他鉴定试验非β-溶血性链球菌鉴定包括肺炎链球菌牛链球菌无乳链球菌草绿色链球菌营养变异链球菌草绿色链球菌鉴定α溶血或不溶血，胆汁七叶苷阴性，包括变异链球菌群唾液链球菌群血液链球菌群咽峡炎链球菌群鉴定依据A群链球菌－－杆菌肽敏感试验（+）B群链球菌－－CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+）D群链球菌－－胆汁七叶苷（+）、6.5％氯化钠生长（－）肺炎链球菌－－Optochin敏感试验（+）、胆汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型甲型链球菌－－Optochin敏感试验（－）、胆汁溶菌试验（－）肠球菌革兰阳性球菌，短链排列营养要求高在10℃、45℃、pH9.6条件下均可生长血平板上溶血现象不定触酶试验（-）胆汁七叶苷试验（+）6.5％NaCl生长试验（+）PYR试验（+）血清学分类属D群肠球菌临床意义引起的医院感染仅次于葡萄球菌肠球菌感染以粪肠球菌为主以尿路感染多见有不同程度耐药奈瑟菌属

共同点：革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛触酶试验（+）氧化酶试验（+）种类：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种致病菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌形