大学试题(医学)-生物制药工艺学笔试（2018-2023年）真题摘选含答案

长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。大学试题(医学)-生物制药工艺学笔试（2018-2023年）真题摘选含答案（图片大小可自由调整）卷I一.参考题库(共30题)1.头孢菌素的合成主要是化学酰化法，大多数都是（）位和（）位侧链同时改造的产物。2.简述脂类药物的分类，主要生产方法。3.简述生物材料的来源。 4.下列药物属于酶类药物的有（）。A、透明质酸B、胸腺激素C、木瓜蛋白酶D、细胞色素C5.红细胞生成素与靶细胞的特定结合，促进（）的增值，分化并成熟为红细胞，增加骨髓向循环血中释放红细胞。 A、红细胞前体细胞B、造血干细胞C、造血组织D、血夜6.简述全球十大生物技术公司。7.下列哪项不属于昆虫表达系统的优点（）。A、安全易饲养B、高量表达C、高效表达D、外源基因的表达在转染的晚期8.在杂交瘤培养中，血清的加入对培养非常有效，一般为（）的胎牛血清。A、5%~10%B、8%~15%C、10%~20%D、12%~20%9.初级代谢产物10.生物活性物质的常用提取方法包括（）。A、用酸、碱、盐水溶液提取B、用表面活性剂提取C、用有机溶剂提取D、超临界萃取11.青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？12.什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？ 13.氨基酸发酵过程中若发生噬菌体感染时会出现一些明显的变化，主要表现（）。 A、发酵液光密度值急剧下降B、发酵液泡沫增多、粘度增大，甚至呈胶状C、C源、N源以及氧的消耗减慢甚至停滞，排气中CO2含量迅速下降D、以上说法都对14.工程动物细胞系的建立：基本过程，表达载体设计，转化与培养方案筛选和鉴定方法。它们与基因工程微生物的异同是什么？15.促进凝血酶原合成的是（）。A、维生素AB、维生素CC、维生素DD、维生素EE、维生素K16.维生素K3中常加的稳定剂是（）。A、氢氧化钠B、硫酸钠C、硫酸氢钠D、亚硫酸氢钠E、焦亚硫酸氢钠17.红霉素的发酵生产需要添加的前体物质为（）。18.简述亚基疫苗的优点。 19.生物制品的质量标准强调哪些性质？20.简述酵母表达系统的优点与不足。 21.连续发酵22.对于Ig分子结构的描述，哪一项是错误的（）。A、每个Ig分子具有两条相同的轻链B、一条重链和轻链的组合在结构上与分子的另一半对称C、每个Ig分子都有链内二硫键构成的功能区D、每个Ig分子都有铰链区23.生化药品 24.在四环素生产过程中，（）对发酵至关重要，是从生长转型到生产的最关键影响因素，生长阶段需要（），而生产阶段需要（）。25.缺乏维生素C易患以下哪种疾病（）。A、恶性贫血B、口角炎C、抗坏血病D、夜盲症26.对硝其－α－溴代苯乙酮的制备中水含量有何影响？为什么？ 27.细胞破碎的方法及其原理是什么？选用原则是什么？28.制药废渣的处理方法主要有哪几种？29.青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？ 30.诱导物对生长和产物合成有何影响，为什么？ 卷I参考答案一.参考题库1.参考答案:7；32.参考答案:脂类药物按生物化学上的分类可分为复合脂、简单脂和异戊二烯系脂。按化学结构则可细分为六类：⑴胆肪类，⑵磷脂类，⑶糖苷脂类，⑷萜式脂类，⑸固醇及类固醇类，⑹其它，如胆红素，人工牛黄，人工熊胆等生产方法：⑴直接抽提法⑵水解法⑶化学合成或半合成法⑷生物转化法3.参考答案:1）生物资源主要有动物、植物、微生物的组织、器官、细胞与代谢产物。2）应用动植物细胞培养与微生物发酵技术也是获得生物制药原料的重要途径。3）基因工程技术与细胞工程技术和酶工程技术是开发生物制药资源的新途径。4.参考答案:C5.参考答案:A6.参考答案: 1）美国安进公司 2）罗氏/基因泰克公司 3）美国强生 4）丹麦诺和诺德 5）美国礼来 6）法国赛诺菲-安万特 7）美国雅培 8）德国默克 9）美国先灵葆雅 10）美国惠氏7.参考答案:D8.参考答案:C9.参考答案:微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质10.参考答案:A,B,C11.参考答案: 控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。最后要注意消沫，影响呼吸代谢。12.参考答案: 将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。 工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质） 酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性） 链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应） 转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）13.参考答案:D14.参考答案: 15.参考答案:E16.参考答案:E17.参考答案:丙醇18.参考答案: 1、避免直接使用病原体而使接受者可能致病的危险 2、具有更高的安全性 3、单独使用特异性蛋白可能会增强疫苗的效果19.参考答案:特殊性，安全性，有效性，可接受性。20.参考答案: 1）五种类型的载体，安全、无毒。 2）营养缺陷选择外来质粒。 3）培养条件简单、大规模培养技术成熟。 4）亚细胞器分化，进行蛋白质的翻译后正确修饰和加工，并具有良好的蛋白质分泌能力。 缺点：酿酒酵母发酵产生乙醇，制约了高密度发酵。修饰的蛋白质糖基化侧链过长，会引起副作用。21.参考答案:发酵过程中一边补入新鲜的料液，一边以相近的流速放料，维持发酵液原来的体积22.参考答案:D23.参考答案:从生物体分离纯化得到的一类结构上十分接近人体内的正常生理活性物质，具有调节人体生理功能，达到预防和治疗疾病的物质。24.参考答案:无机磷；高磷；低磷25.参考答案:C26.参考答案:水分存在时与溴化氢反应，诱导其延长或基本不起反应，因此对硝基苯乙酮溴代反应时，水分存在不利于反应，必段严格控制溶剂的水份。27.参考答案: （一）机械法 特点：处理量大、破碎效率高、速度快、工业上常用手段。 原理：挤压、剪切 （二）非机械法 化学法；酶解法；物理法。 细胞破碎的一般原则：若提取的产物在细胞质内，需用机械破碎法；若在细胞膜附近则可用较温和的非机械法；若提取的产物与细胞膜或壁相结合时，可采用机械法与化学法相结合的方法，以促进产物溶解度的提高或缓和操作条件，但保持产物的释放率不变。28.参考答案: ①综合利用。废渣经回收及除毒后，应尽量进行综合利用。用作生产的原辅材料；用作燃料；用作饲料和肥料；用作铺路或建筑材料；投海、深埋、焚烧、深井排放等处理。 ②焚烧。焚烧既能大大减少废渣的体积，消除其中的有害物质，又能回收热量。对于一时无回收价值的可燃性废渣，特别是当含有毒性或有杀菌作用的废渣，无法用厌气处理时，可以焚烧处理。 ③填埋法。埋入土中，通过微生物自然降解，但容易污染水源（包括地下水）。为了防止有机物潜在的危险性，目前倾向于先焚烧变成少量残渣后，再用填埋法处理。29.参考答案:青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。提炼工艺包括如下单元操作：①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。30.参考答案:诱导物用来诱导表达型工程菌。在细胞生长到一定阶段，必需添加诱导物，以解除目标基因的抑制状态，活化基因，进行转录和翻译，生成产物。适宜的诱导时间非常重要。诱导物的浓度及其发酵温度会影响表达量和产物存在形式。化学诱导型启动子：lzc、tac、T7等，诱导时间为对数生长期。温度诱导型启动子：PL、PR等，诱导时间为对数期或稍后一些。卷II一.参考题库(共30题)1.青霉素属于（）类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时，整个提炼过程应在（）、（）、（）进行。2.抗体通过（）段与中性粒细胞，单核细胞，NK细胞结合，产生ADCC作用。3.生产药物的天然微生物细菌主要生产各类抗生素，以链霉菌属最多。4.抗生素工业生产的主要方法包括（）。A、生物合成法B、化学合成法C、酶转化法D、基因工程法5.比较各种表达系统生产rhEPO的优缺点。 6.非处方药来源于（）。A、处方药B、临床长期使用，由医药专家评审遴选C、经卫生行政部门审批颁布D、国家基本药物目录E、民间传统用药7.简述大环内酯类抗生素的结构特点、分类。代表性抗生素有哪些？8.氯霉素有（）个手性中心，（）个光学异构体。9.简述构建基因工程菌的一般过程。10.简述用酵母表达人胰岛素的工艺优缺点。 11.基因工程大肠杆菌与宿主菌的培养基的本质区别在于，前者必须加入（）。A、抗生素B、氨基酸C、前体D、激素12.真核基因的获得可采取（）方法。A、直接从生物体中提取后再化学合成B、直接从生物体提取C、直接从生物体中提取后在进行PCR扩增D、逆转录法13.生物制药的工艺流程是怎样的？14.动物细胞大规模培养的方法有哪些？各自的特点是什么？ 15.基因工程菌的构建包括（）、（）、（）三个主要环节。16.离体动物细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的代谢特征是什么？蛋白质的合成、修饰、分泌功能与制药有何关系？ 17.简述琼脂扩散法（管碟法）测定抗生素生物效价的原理及实验步骤。 18.体液免疫 19.世界排前十位的药物是什么？它们属于哪类药物？采取的制药工艺是什么？20.生物药物21.微生物发酵培养中常用的pH控制手段是（）。A、缓冲液B、直接流加酸或碱C、通入CO2D、流加营养物质22.免疫球蛋白L链N端1/2，H链N端1/4或1/5的肽段，称为（）区。23.基因工程菌可直接很好地吸收利用铵盐等，一般不能利用硝态氮，几乎都能利用有机氮。24.简述大肠杆菌表达系统的优点和不足。 25.大肠杆菌表达真核基因时对其蛋白质产物（）。A、能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物能进行糖基化B、能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物不能进行糖基化C、不能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物能进行糖基化D、不能进行翻译后修饰，故对蛋白质产物不能进行糖基化26.青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作，为什么？27.工业上用于生产链霉素的菌种是（）。28.简述利用基因工程技术提高抗生素产量的方法。29.比较分析链霉素，红霉素，四环素发酵工艺控制的异同及其原理。  30.药物生产应用的动物细胞系主要以（）细胞为主，占常见生产用动物细胞系的44%。卷II参考答案一.参考题库1.参考答案:β-内酰胺；低温；快速；准确调节pH值下2.参考答案:Fc3.参考答案:错误4.参考答案:A,B,C,D5.参考答案: ①SV40病毒启动子的表达载体，在COS-1中瞬时表达hEPO。 ②昆虫SF9细胞中杆状病毒载体表达rhEPO。产率有所改善，糖基化程度较小。 ③家蚕系统表达，糖基化简单，药物在体内稳定性较低、活性较差等问题。 ④大肠杆菌表达，仅具体外抗原结合活性。 ⑤干扰素-α基因启动子的rhEPO表达载体，BALL-1细胞，产生较高量的rhEPO。 ⑥CHO、BHK细胞中稳定表达，rhEPO与天然EPO结构、活性相似。6.参考答案:A,B,C7.参考答案: 以一个大环内酯为母体，通过羟基以苷键和1~3个分子的糖相连接的一类抗生物质。 分类： 1.多氧大环内酯抗生素：吉他霉素 2.多烯大环内酯抗生素：制霉菌素 3.蒽沙大环内酯抗生素：利福霉素8.参考答案:2；49.参考答案: 1、目的基因的获取 2、PCR技术扩增目的基因 3、基因表达载体的构建 4、将目的基因导入受体细胞 5、目的基因的检测与鉴定10.参考答案: 优点：表达产物二硫键的结构与位置正确，不需要复性加工处理； 缺点：表达量低，发酵时间长。11.参考答案:A12.参考答案:D13.参考答案: 14.参考答案:1）单层贴壁培养优点：容易更换培养液，灌注培养时，能达到高细胞密度；有利于产物的分泌表达，可改变培养液与细胞的比例。缺点：操作较繁杂，检测受到限制，培养条件难以均一，传质和传氧差，放大培养是瓶颈2）悬浮培养优点：操作简单，培养条件相对均一，传质和传氧较好，容易放大培养。缺点：细胞体积小，密度低，培养病毒易失去标记而降低免疫能力3）微载体培养优点：细胞生长的环境均一，培养基利用率高，重复性好，减少了劳动强度，容易放大，兼具贴壁和悬浮培养的双重优点4）固定化培养优点：细胞密度高、抗剪切力和污染，生产首选15.参考答案:目标基因的获得；最佳表达载体的构建；工程菌构建16.参考答案: 葡萄糖代谢：糖酵解为主，生成丙酮酸和乳酸。丙酮酸经TCA循环，氧化产生CO2和水，释放能量。葡萄糖一小部分进入PPP途径，生成4、5、7碳糖和NADPH。 谷氨酰胺：作为氮源，转氨、脱氨（为主），合成非必需氨基酸。大多数谷氨酰胺通过脱氨生成谷氨酸，并释放铵离子。小部分谷氨酰胺通过转氨生成其他嘌呤、嘧啶和氨基糖等合成代谢的前体。 氨基酸在粗糙内质网上的核糖体上，以mRNA为模板，进行密码翻译，生成蛋白质的多肽链。在粗糙内质网腔和高尔基体内加工修饰形成糖基化蛋白质。糖基结构易变化，不同细胞系糖基化特征不同，要根据药物的结构选择适宜细胞系。17.参考答案:管碟法原理：抗生素在涂布特定菌的琼脂培养基内扩散，形成一定浓度抗生素的球型区，抑制试验菌生长，通过透明培养基观察抑菌圈，抗生素剂量的对数与抑菌圈面积或直径成正比。在同样条件下将已知效价的标准品溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应（抑菌圈）进行比较。操作分为八步：1.试验菌的纯化与悬液的制备2.缓冲液、灭菌水与培养基的制备3.标准品、供试品的称量、溶解与稀释4.双碟的制备及放管5.滴加药液6.恒温培养7.测量抑菌圈直径或面积8.计算18.参考答案:通过形成抗体而产生的免疫能力。19.参考答案: 20.参考答案:是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。21.参考答案:C22.参考答案:可变（V）23.参考答案:正确24.参考答案:1）发展最早、应用最广泛的经典的表达系统。2）具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高（高达70％），培养周期短，抗污染能力强。3）不能用于加工修饰化（糖基化、酰胺化）蛋白表达。4）细胞死亡后，细胞壁脂多糖游离出来，形成内毒素，具有抗原性，产生热源。