第二讲药物分析

第二讲药品检验工作的基本规律

Basicregularityofdruginspection

药物的鉴别试验药物的杂质检查药物定量分析与分析方法验证

药物的鉴别试验

Identificationtestofdrug

鉴别试验的项目鉴别试验的方法鉴别试验的条件

鉴别试验的项目

Testitems性状

description反映该药物特有的物理性质外观(颜色)、臭、味、溶解度以及物理常数：m.p.、b.p.、、粘度、比旋度等一般鉴别试验generalidentificationtest专属鉴别试验

specificidentificationtest

FeCl3反应加稀HCl，沉淀分解，生成游离白色碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀）鉴别试验的方法化学鉴别法湿法＊呈色反应＊沉淀↓生成反应＊荧光反应＊气体↑生成反应＊焰色反应＊分解反应——干法光谱鉴别＊UV＊IR光谱鉴别法

UV-可见光谱法红外光谱法近红外光谱法（near-infraredspectrophotometry）原子吸收法（atomicabsorption）质谱法

(massspectrometry)核磁共振法（nuclearmagneticresonance，NMR）X射线粉末衍射法（x-raydiffraction）紫外光谱鉴别法

对比吸收光谱特征参数比较吸收度比值一致性对比吸收光谱一致性

X射线粉末衍射法

X射线是伦琴在1895年发现的，又曾称为伦琴射线。本质上是波长很短的电磁波，一般认为波长为0.01～1nm，较紫外线还短。作为波，就可以产生衍射。所谓衍射，就是绕过障碍物边缘向前传播的现象当X射线射到晶格排列整齐的晶体上，仅仅在某些方向有光线反射，这就是X射线的衍射。有光线反射的方向可用布拉格方程加以描述

X射线简介

布拉格方程

式中θ为掠射角；dhkl为晶面间距；hkl为晶面指数，即晶面与晶轴截距的倒数之比，也叫密勒指数······························AOCBdθ图16-23布拉格方程由布拉格方程，已知晶面间距和入射线波长，即可求出衍射线方向，可见该方程给出了什么条件下衍射的X射线可能从晶体射出。当然晶面有若干组，都可产生相应衍射，这些衍射均可由X射线衍射仪进行测定

X射线衍射仪的工作原理X射线衍射仪的工作原理一般采用粉末法。粉末衍射仪的构成与工作原理见图X射线管中不同靶材料，如铜、石墨等可发出各自特征波长

晶体粉末尽可能紧密地装入玻璃毛细管，压成多晶圆柱体。当穿过铅块狭缝的一细束X射线射到晶体粉末时，总会有取向合适的微小晶体，使射线在其表面反向最强由反射方向，根据布拉格方程即可求出晶面间距，进而求出键长。本法可同时将各种波长的X射线反射到不同方向，记录为衍射图谱在新药研制过程中，必需对药物结构进行确证，固体样品一般要做X射线粉末衍射分析，以便从测定结果可比较研制品与对照品是否一致。X射线粉末衍射法是药物晶型进行定性鉴别的重要方法之一应用

应用示例

西咪替丁的晶型研究

尹华等药物分析杂志2001，21(1)：39~42测试条件：Cukα（靶），50kV-80mA（工作电压-电流），8(º)/min，DS=SS=1℃，RS=0.15mm(狭缝)，2θA晶型和B晶型的X射线测定数据及图谱见表

X射线衍射法除了用于晶型鉴别外，也可用于晶型药物的定量分析

A晶型和B晶型的X射线测定数据A晶型B晶型衍射角晶面距丰度比衍射角晶面距丰度比9.380.942169.560.92403512.920.68473513.080.67636114.660.60381813.920.635725

16.440.53882318.480.47976216.740.529234

18.980.467241

26.000.34247526.100.34117526.340.3381526.380.337610027.240.32712728.440.31362828.440.3136372θ／(º)d／nmI／I02θ／(º)d／nmI／I0色谱鉴别法

TLCRfHPLCtrGCtrCEtr

溶液的浓度溶液的温度溶液的酸碱度试验时间干扰成分的存在鉴别试验条件关键：反应灵敏度高，专属性好药物的杂质检查

Testforpurity概述一般杂质检查特殊杂质检查概述☆有效性针对某些药效进行检查的项目如Al(OH)3的制酸力，反映主要质量；明胶的凝冻度，控制物理性能；利福平的结晶度，影响生物利用度☆均一性含量均一性如“含量均匀度”试验☆安全性进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目PethidineHydrochloride

盐酸哌替啶m.p.186~190℃纯度要求

杂质来源sourceofimpurities酸度：以酸水解Cl-,SO42-：水解试剂带入乙醇中不溶物：糊精，少量蛋白质SO32-：水解试剂，SO42-还原，用H2SO3漂白产品带入可溶性淀粉：水解不完全＊制备过程中产生＊贮藏过程中产生水解药物最容易发生的变质反应，特别在碱性条件下，或升温时外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引起药物产生A晶型：不易被酯酶水解，活性很低易被酯酶水解而吸收，为有效晶型异构体和多晶型

无味氯霉素B晶型氧化分解麻醉乙醚醛及有毒的过氧化物

杂质限量检查Limitofimpurites＊检查意义一般杂质：氯化物硫酸盐铁盐

重金属砷盐＊杂质限量的制订＊杂质限量计算、表示与检查方法＊杂质限量检查方法取一定量(C·V)与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定氯化物检查

以对乙酰氨基酚为例重金属检查

以葡萄糖为例取本品2.0g100mlH2O冷却△过滤取25ml依法检查AgCl对照管NaCl溶液0.01mgCl/ml

问L?

5.0ml2ml本品4g23ml依法检查H2OdilHAc含重金属不得超过百万分之五，问应取标准铅溶液(0.01mgPb/ml)多少ml?一般杂质检查Detectionofgeneral

impurites

项目氯化物硫酸盐铁盐重金属条件稀HNO310ml稀HCl2ml稀HCl4ml过硫酸铵pH3.5醋酸盐Buffer灵敏度0.05~0.08mg/50ml0.1~0.5mg/50ml0.01~0.02mg/35ml标准液浓度0.01mg/ml0.1mg/ml0.01mg/ml0.01mg/ml第一法反应试剂AgNO3

BaCl2

NH4SCNHeavymetals:Ag,Pb,Hg,Cu,Bi,Sn,As,Co,Ni,Zn依法检查取两倍量供试品标准管样品管滤液硫代乙酰胺过滤硫代乙酰胺H2OMS＋标准铅溶液注意点第二法：含芳环或杂环的有机药物

如苯佐卡因、甲硝唑第三法:溶于碱的药物或在稀酸产生沉淀的药物，如磺胺类、巴比妥类第四法：铅斑法微孔滤膜过滤法检查重金属装置C垫圈(外径10mm,内径6mm)D滤膜(直径10mm,孔径3.0µm)E辅助滤板CDABFE滤器下部滤器上盖连接头砷盐

arsenic国内外常用方法：古蔡