兰花细菌性褐腐病菌检疫鉴定方法_第1页
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1Pantoeacypripedii菌目Enterobacteriales，肠杆菌科Enterobacteriaceae，欧文氏菌属Erwinia。根据兰花细菌性褐腐病菌的特异性DNA序列进行分子生物学检测；根据兰花细菌性褐腐病菌的培养2参照附录A中的症状描述观察植株是否有兰花细菌性褐腐病的典型症状，对出现典型症状或可病叶上的病健交界部位（无症状样品，随机选取叶片）组织置于培养皿内，用75%的乙醇（或1%的次氯酸钠）表面消毒50s～60s，无菌水清洗3次，然后将其移至灭菌培养皿中，加适量无菌水，用灭菌作阴性对照，以双蒸水代替模板作为空白对照，对待测样品进行PCR凝胶电泳检测，具体检测步骤见附345为革兰氏阴性菌，兼性厌氧，最适生长温度为27℃~30℃,37℃能生长，氧化酶阴性、过氧化光滑不透明。Erwinia属内在兰花上引起腐烂症状的细菌共有三个近似种，分别是E.cypripedii、- -+ -+++ -++- -d++-d-+++-+-+ +++6EcUP：5'-TCAACGCCAAGCCGAEcNP：5'-ACGAATGAACCGTCGPCR扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上进行电泳检测。待测样品、阳性对照和空白对照均未出现相应条带，PCR扩增结果判定为阳性；待测样品、阴性对照和空白对照均未7PrintedinGreatBritain[J].Microbiolooforchidhosttissue[J].PlantDisease,2

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