芥子油苷对豌豆蚜细胞色素P450s和谷胱甘肽S-转移酶诱导表达的影响

芥子油苷对豌豆蚜细胞色素P450s和谷胱甘肽S-转移酶诱导表达的影响

摘要：

豌豆蚜（Acyrthosiphonpisum）是一种害虫，在农业中对许多作物造成严重的危害。为了探究植物提取物对豌豆蚜细胞色素P450s（cytochromeP450s）和谷胱甘肽S-转移酶（glutathioneS-transferase，GST）的影响，本研究使用芥子油苷对豌豆蚜进行实验。结果发现，芥子油苷对豌豆蚜细胞色素P450s和GST的表达产生了明显的诱导效应。本研究为进一步研究植物提取物在害虫控制中的应用潜力提供了新的线索。

关键词：豌豆蚜、芥子油苷、细胞色素P450s、谷胱甘肽S-转移酶、诱导表达

引言：

豌豆蚜是一种小型昆虫，广泛分布在世界各地。它以豌豆、花生、黄豆等豆科作物为食，对农作物产生严重破坏，给农业生产带来巨大损失。目前，对豌豆蚜的控制主要依赖化学农药，然而长期大量使用农药不仅对环境造成污染，还会导致害虫对农药的抗性进一步增强，使化学农药的效果大打折扣。因此，寻找一种对豌豆蚜具有杀灭作用的低毒无害的新方法势在必行。

植物提取物一直以来都被广泛应用于害虫控制领域，因为植物具有丰富的次生代谢产物。其中，芥子油苷是一种被广泛研究的植物提取物之一，具有一定的杀虫活性。在此基础上，本研究旨在探究芥子油苷对豌豆蚜细胞色素P450s和谷胱甘肽S-转移酶的影响。

材料与方法：

1.实验材料

本实验采用自然生长的豌豆蚜作为实验材料，并使用市售的芥子油苷作为处理物质。

2.实验设计

将豌豆蚜随机分为两组，一组为对照组，另一组在芥子油苷的处理下。每组实验重复三次，每个重复包含相同数量的豌豆蚜。

3.芥子油苷处理

将豌豆蚜置于含有芥子油苷的培养液中，处理时间为24小时。对照组豌豆蚜置于不含芥子油苷的培养液中。

4.提取蛋白质

将芥子油苷处理后的豌豆蚜细胞制成悬浮液，离心并去除上清，使用适量的磷酸缓冲液溶解沉淀，最终得到蛋白质提取液。

5.Westernblot分析

使用Westernblot分析方法，检测细胞色素P450s和GST的诱导表达水平。对蛋白质提取液中目标蛋白进行专一抗体检测。

结果：

通过Westernblot分析，发现在芥子油苷处理组中，豌豆蚜细胞色素P450s和GST的表达量明显增加。对照组中的细胞色素P450s和GST的表达量较低。

讨论：

本研究证明了芥子油苷对豌豆蚜细胞色素P450s和GST的诱导表达效应。细胞色素P450s和GST作为一类重要的酶系统，参与了害虫对外界环境的应对。诱导这些酶的表达可以使豌豆蚜对外界环境的适应性增强，从而增加了它们对芥子油苷等植物提取物的抵抗能力。这可能是芥子油苷在实际应用中效果不佳的原因之一。

结论：

芥子油苷可以通过诱导豌豆蚜细胞色素P450s和GST的表达来发挥杀虫作用。然而，在实际应用中，害虫对芥子油苷的抵抗能力可能会增强。因此，进一步研究如何提高芥子油苷的杀虫效果，以及如何减轻害虫对芥子油苷的抵抗性，将对植物提取物在害虫控制中的应用提供重要的理论支持和实践指导通过本研究的实验结果和讨论，可以得出结论：芥子油苷可以诱导豌豆蚜细胞色素P450s和GST的表达，从而发挥杀虫作用。然而，在实际应用中，害虫对芥子油苷的抵抗能力可能会增强，导致其杀虫效