各类中药制剂分析课件

各类中药制剂分析丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等中药制剂剂型繁多中药制剂的分类中国药典（2000年版）一部（二十六种）丸剂胶剂膏药颗粒剂滴眼剂散剂合剂露剂糖浆剂软膏剂片剂酒剂茶剂滴丸剂注射剂锭剂酊剂搽剂胶囊剂滴鼻剂栓剂巴布膏剂橡胶膏剂气雾剂喷雾剂煎膏剂（膏滋）流浸膏剂与浸膏剂第一节液体中药制剂的分析用药材提取物制备的液体制剂合剂、口服液、酒剂、茶剂、酊剂滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）一、液体中药制剂的一般质量要求性状相对密度和总固体含量pH值装量差异乙醇量甲醇量防腐剂量微生物限度标准二、液体中药制剂质量分析的特点质控指标的选择

1）处方中药味较少且有效成分明确，选主要有效成分

2）药味较多的处方，选择有代表性的

3）对于酒剂，测定总固体量酒剂总固体检查有两种测定方法第一法测定含糖、蜂蜜的酒剂。第二法测定不含糖、蜂蜜的酒剂。注：主要区别在于硅藻土的加入1、合剂与口服液（单剂量合剂也可称为“口服液”）pH装量相对密度微生物限度一般检查项目合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法提取，经浓缩制成的内服液体制剂合剂属于水性液体制剂，杂质较多。常用的净化方法：液—液提取法柱色谱法注：液—液提取法中还可利用被测成分的酸碱性，先将提取液调成碱性或酸性，然后再行提取。

2、酒剂与酊剂酒剂酊剂含乙醇量（GC）甲醇量检查（GC）总固体装量微生物限度一般检查项目药材用蒸馏酒提取制成的澄清液体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂酒剂与酊剂中含醇量较高，杂质较少。常用的净化方法是将酒剂或酊剂加热蒸去乙醇，然后再用适当的有机溶剂提取。（当被测成分为生物碱类时，可蒸去乙醇后加碱（氨水）碱化，再用有机溶剂提取；当被测成分为酸性成分时，蒸去乙醇后加酸酸化，再用有机溶剂提取。）有时也可用柱层析法（例如C18柱、氧化铝柱、大孔树脂柱等），对蒸去乙醇后的样品进行净化分离。

三、应用实例-小青龙合剂[处方]

麻黄125g桂枝125g白芍125g

干姜125五味子125g

细辛62g甘草(蜜炙)法半夏188gNOTES：合剂是在传统汤剂基础上改进后的一种新剂型生物碱桂皮醛芍药甙挥发油三萜皂甙[制法]以上八味，细辛、桂枝提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与白芍、麻黄、五味子、甘草加水煎煮至味尽，合并煎液，滤过，滤液和蒸馏后的水溶液合并，浓缩至约1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏剂项下渗漉法，用70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，漉液浓缩，与上述药液合并，静置，滤过，滤液浓缩至1000ml，加入苯甲酸钠3g与细辛、桂枝挥发油，搅匀，即得。[性状]本品为棕黑色的液体；气微香，味甜、微辛。[功能与主治]解表化饮，止咳平喘。用于风寒水饮，恶寒发热，无汗，喘咳痰稀。[用法与用量]口服，一次10-20ml，一日3次，用时摇匀。方药分析：君麻黄—发汗为君臣桂枝—解表为臣佐甘草—恐发汗太过,佐以甘草缓之使白芍、干姜、细辛、法半夏、五味子—几药合力共为使。可外发汗，内行水，散表里之邪。汉代张仲景《伤寒论》——小青龙汤近代由重庆桐君阁中药厂改汤剂为合剂本方治疗伤寒表不解，心下有水气，干呕，发热而咳。近代也用于慢性支气管炎，支气管哮喘、肺气肿，均见咳、喘、痰白清稀者。供试品溶液与阴性对照液的制备：取合剂10ml，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液[油层]，浓缩至1ml，为供试品溶液A；

[水层]用Na2CO3调PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，残渣用1ml甲醇溶解，为供试品溶液B；NOTES：阴性对照液如上法同步进行。1.桂皮醛的鉴别取供试品液A、阴性对照液、桂皮醛对照液（1ug/ml）15ul，点于同一硅胶G板上，环己烷-乙酸乙酯（17：3）展开，晾干，喷2，4—二硝基苯肼乙醇T.S，供试品A与对照品在相应位置上显相同的橙色斑点，而阴性对照液无此斑点。2.细辛挥发油的鉴别取供试品液A、阴性对照液、细辛挥发油对照液（1：10乙醚液）5ul，点于同一硅胶G板上，环己烷展开，晾干，喷10%香草醛浓硫酸T.S，加热至显色，供试品A与对照品在相应位置上显相同的粉红色斑点，而阴性对照液无此斑点。3.麻黄碱的鉴别取供试品液B，阴性对照液，麻黄碱对照品液（1mg/ml）各5ul，点于同一硅胶G，氯仿-甲醇-浓氨水（20：5：0.5）展开，晾干，喷茚三酮T.S，加热至斑点显色，供试品B与对照品在相应位置上显相同的蓝紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。

取合剂5ml，上聚酰胺柱，DW洗脱，洗脱液水浴浓缩至干，用1ml甲醇溶解，为供试品溶液C；聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱，弃取洗脱液，用3M氨乙醇液洗脱，收集洗脱液水浴蒸干，1ml甲醇溶解，为供试品溶液D。4.芍药甙的鉴别取供试品液C、阴性对照液、芍药甙对照液（1mg/ml）10ul，点于同一硅胶G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，供试品C与对照品在相应位置上显相同的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。5.甘草酸的鉴别取供试品液D、阴性对照液、甘草酸铵对照液（2mg/ml）2ul，点于同一硅胶G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸馏水（30：2：2：4）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，UV灯365nm观察，供试品D与对照品在相应位置上显相同的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。含量测定HPLC法测定芍药甙的含量仪器与色谱条件

BECKMAN332型高效液相色谱仪163型可变波长紫外检测仪，220nm427型记录及数据处理仪色谱柱为YWGC18流动相乙腈-水（15：85）标准曲线制备精密称取芍药甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分别吸取0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容。回收率测定精密吸取除去白芍制成的合剂（即阴性对照液）0.3ml与适量芍药甙对照品液，通过0.5g聚酰胺柱，用水洗脱至50ml量瓶中至刻度，依前述条件测定，平均回收率为99.42%，RSD为0.23%（n=3）。样品测定取自制小青龙合剂摇匀，用滤纸过滤，精密吸取0.3ml滤液通过聚酰胺柱，以不同回收率测定条件进行测定。4、相对密度

的测定

相对密度：20℃时药物密度/水密度

测定相对密度的方法：比重瓶法：供试品用量少，较常用（一般液体或半固体制剂）

韦氏比重秤法：仅用于易挥发液体5、含醇量

的测定

（1）气相色谱法

（2）蒸馏法

小儿热速清口服液的分析【组成】柴胡、黄芩、板蓝根、葛根、金银花、水牛角、连翘和大黄等八味药【性状】本品为红棕色澄清液体；气香、味甜、微苦。【鉴别】(1)取本品30ml，置水浴蒸至近干，加硅藻土10g，研匀，加醋酸乙酯50ml,超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（7：2.5：0.25）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品20ml，加乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚提取液，浓缩至约1ml,作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.2g，加乙醚10ml，振摇提取20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以苯－醋酸乙酯－甲酸(7.5:2.4:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。【检查】相对密度应不低于1.08。

pH值应为4.5～7.0。其他应符合合剂项下有关的各项规定。【含量测定】照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为276nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备取黄芩苷对照品约10mg，精密称定，置200ml量瓶中，加50%甲醇适量，置热水浴中振摇使溶解，放置至室温，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含黄芩苷50µg）。供试品溶液的制备精密量取本品0.5ml，照柱色谱法，置D101大孔吸附树脂柱（内径约1.5cm，填充高度10cm）上，以每分钟1.5ml的流速，用水70ml洗涤，继用40%乙醇洗脱，弃去7～9ml，收集续洗脱液，置50ml量瓶中，至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液5µl与供试品溶液10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每ml含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于2.2mg。

药材提取液的浓缩液第二节半固体中药制剂的分析糖浆剂、煎膏剂(膏滋)流浸膏剂与浸膏剂（半固体或固体）（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）一、半固体中药制剂的一般质量要求性状乙醇量含糖量pH值相对密度和总固体含量不溶物装量差异微生物限度标准二、半固体中药制剂质量分析的特点生产提取溶剂大多为水或稀醇检测时一般需经有机提取后分析（1）有效成分明确且有适当方法，测定有效成分的含量

（2）有效成分不明或无定量方法的，可测一定溶剂的浸出物含量

（3）对于流浸膏，有的测总固体量以控制其质量药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼蜜或糖制成的半流体制剂1、煎膏剂(膏滋)相对密度不溶物装量微生物限度检查项目应无焦臭、异味，无糖结晶析出2、流浸膏剂与浸膏剂（半固体/固体）药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶剂，调整浓度至规定标准而制成的制剂装量微生物限度检查项目1ml流浸膏——1g原药材1g浸膏——2~5g原药材样品前处理当流浸膏剂或浸膏剂由单味中药组成时，相对杂质较少，个别制剂可经稀释后直接测定。若杂质较多需净化处理时，可采用稀释后液-液提取法、回流提取法及柱色谱分离法等。

3、糖浆剂糖浆剂系指含有药材提取物的浓蔗糖水溶液。

样品前处理糖浆剂因含有较多的蔗糖，溶液较为粘稠。重点要排除糖浆剂中糖分的干扰。分离、净化的方法：溶剂提取法、柱层析法（液—液提取法中，根据指标成分的性质，可选一合适的溶剂直接进行液-液提取，使被分析成分与其它成分分离，也可将药液调至不同的pH值，再用合适的溶剂提取，以利于酸、碱性成分的提出。当指标成分具有挥发性时，可将其蒸馏出来。）三、应用实例——儿康宁糖浆【组成】党参、黄芪、白术、茯苓、山药、薏苡仁、麦冬、制何首乌、大枣、焦山楂、炒麦芽和桑枝等十二味药【性状】本品为棕黄色至棕褐色的黏稠液体；气芳香，味甜。【鉴别】(1)取本品10ml，加水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加正丁醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水(4:1:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热约5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取本品20ml，用三氯甲烷提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10～20µl、对照品溶液5µl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(15:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上,显相同的荧光斑点；置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。(3)取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用正丁醇饱和的水洗涤至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液10µl、对照品溶液5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(10:20:11:5)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。【检查】相对密度应不低于1.24。

pH值应为4.0～5.0。其他应符合糖浆剂项下有关的各项规定。【正丁醇提取物】精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，第1次30ml，以后每次20ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，置105℃干燥3小时,移置干燥器中、冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。本品含正丁醇提取物不得少于3.0％。【含量测定】照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-水（25:75）为流动相；检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备

精密称取2，3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含0.02mg的溶液，即得。供试品溶液的制备

精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液用微孔滤膜（0.45µm）滤过，取续滤液，即得。测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含制何首乌以2，3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9）计，不得少于30µg。

第三节固体中药制剂的分析药材提取物、药材粉末加赋形剂制备而成丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶剂、胶囊剂、锭剂、胶剂、茶剂、栓剂（有植物组织与细胞，可做显微鉴别）

一、丸剂

指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等丸剂的特点：在胃肠道崩解缓慢，逐渐释放药物，因而作用持久。对毒剧药及刺激性药物可以缓和吸收，减少毒性和不良反应。制备中可容纳固体、半固体粘性药材或浸出液。利用赋形剂或丸衣来掩盖主药的不良气味。

（一）丸剂的一般质量要求性状水分重量差异(按丸或重量服用)装量差异(按一次剂量分装的)溶散时限微生物限度检查项目水分规定大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸≤15.0%水蜜丸、浓缩水蜜丸≤12.0%水丸、糊丸、浓缩水丸

≤9.0%装量差异高低溶散时限6丸，照崩解时限检查法重量差异第一法（按丸服用）每次最高丸数或每丸（＞1.5g），10份高低高低第二法（按重量服）每份10丸，10份

高低

丸剂所用的原料是药材细粉或药材提取物，组成很复杂，所以，在对丸剂进行分析前，一般需对样品进行处理。（二）丸剂质量分析的特点1.样品的预处理

水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸等可直接研细或粉碎。蜜丸中由于含有相当多的蜂蜜，不能直接将其研细或粉碎，可用小刀将其切成小块。（如测蜜丸中的脂溶性成分，可用水溶解，离心，取药渣，再对药渣进行提取。）大多数情况下是直接加溶剂进行提取，但有时（特别是定量分析时）蜜丸需要先做一些特殊处理：称取一定量蜜丸置研钵中，加入一定量硅藻土研磨直至蜜丸均匀分散（也可将蜜丸置容器内，加适量水或醇使蜜丸溶散，然后加入适量硅藻土搅匀）。2.样品的提取常用的提取方法：振荡提取法：采用电动振荡器进行，提取时间大约需十几分钟至几十分钟甚至2～3小时不等超声提取法：提取时间需十几分钟至几十分钟室温浸渍法：需十几小时以上，如12小时、24小时或更长低温浸渍法：需几十分钟或几小时回流提取法：需几十分钟或几小时连续回流提取法：需要数小时，大多4～8小时3.样品的净化由于丸剂往往是由多种原料药直接粉碎制成的，所含成分相当复杂，通过上述方法提取后，得到的提取液，通常必须经过净化处理后方能进行检测。常用的净化方法有溶剂液-液提取法，包括根据溶剂极性大小而采用的梯度液-液提取法，另外还有沉淀法、柱色谱法等。（三）分析实例—万氏牛黄清心丸[处方]

牛黄10g朱砂60g黄连200g黄芩120g栀子120g郁金80g分析实例—万氏牛黄清心丸[制法]以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸，即得。古方为糊丸，亦有水丸[性状]本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。[功能主治]清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，烦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。[方药分析]本方来源于明.«痘疹世医》心法，本方为清心开窍剂，主治热邪内陷心包所致窍闭神昏症。方中牛黄，清心解毒，豁痰开窍为君药；黄连、黄芩、栀子清热泻火，为臣药；朱砂清心，重镇安神，郁金行气开窍共为佐使药，合用以奏透邪泻热，开窍安神之效。[方药分析]牛黄—清热解毒药，主含胆酸类成分。黄连—清热燥湿药，主要为小檗碱。黄芩—清热燥湿药，主要为黄酮类。栀子—清热泻火药，主含栀子甙。朱砂—安神药，主含硫化汞（HgS）。郁金—活血去瘀药，主含挥发油。

鉴别

显微鉴别郁金—糊化淀粉团块几乎无色。栀子—种皮石细胞。黄芩—纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细。黄连—纤维鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显。朱砂—不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色。郁金—糊化淀粉团块栀子—种皮石细胞黄芩—纤维黄连—纤维朱砂—不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色

化学鉴别1.朱砂的鉴别取本品3g，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，加入盐酸1ml及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色。

HgS+2HCl+Cu

CuCl2+Hg+H2SNOTES：在酸性条件下，朱砂与铜片发生置换反应析出金属汞，在铜片表面形成银白色汞齐。2.人工牛黄的鉴别取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加热回流30min,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。TLC法CMC-Na，硅胶G展开剂醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32:6:1:1）显色剂

10%磷钼酸乙醇液，

1100C,10min人工牛黄供试品牛黄空白猪去氧胆酸胆酸3.黄芩的鉴别供试品溶液的制备：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。TLC法CMC-Na，硅胶G（4%醋酸钠）展开剂醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）显色剂2%三氯化铁乙醇液使斑点更为集中-OH与Fe+3络合黄芩甙供试品黄芩空白4.栀子的鉴别供试品溶液的制备：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。TLC法CMC-Na，硅胶G展开剂醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10:7:2:0.5）显色剂

10%硫酸乙醇

1050C,10min栀子甙供试品栀子空白5.黄连的鉴别供试品溶液的制备：取含量测定项下剩余的盐酸-甲醇提取液4ml，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，使成1ml作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：黄连对照药材50mg，加甲醇10ml，回流加热15min,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

对照品溶液的制备：再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。TLC法硅胶GCMC-Na展开剂苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12:6:3:3:1）显色剂

UV（365nm）盐酸小檗碱黄连公式品供试品黄连空白含量测定

1.朱砂取本品约5g，剪碎，精密称定，置250ml凯氏烧瓶中，加硫酸30ml与硝酸钾8g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250ml锥形瓶中，用水50ml分次洗涤烧瓶，洗液并人溶液中，滴加1%高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消失，再滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液滴定，即得。每1ml的硫氰酸铵滴定液相当于11.63mg的硫化汞。硫酸与硝酸钾—分解试样及有机破坏高锰酸钾溶液—除去试样分解时产生的亚硫酸粉红色两分钟内不消失—亚硫酸可将Hg2+

还原Hg+使含量变低，观察两分钟完全除去亚硫酸硫酸亚铁溶液—除去过量的高锰酸钾滴定反应Hg2++2CNS-→Hg(CNS)2显色反应CNS-(过量)+Fe3+→Fe(CNS)2+(红色)2.黄连取本品约4g，剪碎，精密称定，置索氏提取器，盐酸-甲醇（1:100）适量，加热回流提取至提取液无色，提取液移至50ml量瓶中，用盐酸-甲醇适量稀释至刻度，摇匀，照柱色谱法，精密量取5ml，上AL2O3柱,25ml洗脱，收集洗液置50ml量瓶中，乙醇稀释至刻度，精密吸取2ml置50ml量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀。UV345nm测定A。为728,本品含总生物碱按盐酸小檗碱计不得少于1.7%。黄连方中臣药之首用量最大有效成分清楚黄连有效成分为小檗碱，尚含其它少量生物碱，如黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、巴马亭等，均为原小檗碱型生物碱。

硫酸溶液—在酸性条件下，N原子呈共轭体系的季铵状态，在345nm处有最大吸收。其它五味药的空白提取液在该波长处略有吸收，约相当于0.3%小檗碱，因此测定结果偏高。本品为蜜丸制剂，其黄连生物碱溶出速率较药材相对缓慢，回流至提取液无色后应放置一段时间。六味地黄丸1.处方与制法熟地黄160g滋阴补肾、填精补血主药山茱萸（制）80g补养肝肾辅药山药80g补脾固肾辅药泽泻60g利水佐药茯苓60g健脾渗湿利水佐药牡丹皮60g凉血、清泻肝火佐药

以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜35～50g与适量的水泛丸，干燥；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。大蜜丸重9g。2.功能与主治补肾阴。主治因肝肾阴虚，虚火上炎所致的腰膝酸软，头晕目眩，耳鸣耳聋，遗精盗汗，骨蒸潮热，舌红少苔，脉细数等诸证。3.方解补中寓泻，以补为主。方中重用熟地滋阴补肾，填精补血，为主药；辅以山茱萸补养肝肾，涩精止遗；山药补脾固肾涩精，以上为本方“三补”方面，用以治本。佐以泽泻利水；牡丹皮凉血清泻肝火；茯苓健脾渗湿利水，为本方“三泻”面。补泻并用，补中寓泻，以补为主，以泻相辅。甘淡和平，不温不燥，补而不滞，滋而不腻。故可常服。定性鉴别（一）显微鉴别：略（二）理化鉴别

1.地黄和山茱萸中环烯醚萜苷类化合物的鉴别―薄层色谱法

（1）供试液的制备：

取本品5g，用甲醇回流提取2小时，回收甲醇，残渣加水溶解，用正丁醇萃取3次，回收正丁醇，加水溶解，滤去不溶物，上活性炭柱，先以水200ml洗脱，再用150m1的5％乙醇洗脱，最后用20％乙醇洗脱。收集20％乙醇洗脱部分，浓缩至1m1，点样于硅胶G薄层上。(2）薄层色谱条件：

薄层板：硅胶G薄层板（厚度：0.3mm）展开剂：醋酸乙酯-甲乙酮-甲酸-水（5：

3：1：1）显色剂：1％香草醛乙醇液和3％高氯酸水溶液，临用时等量混合（3）薄层色谱结果：1.梓醇2.六味地黄丸3.地黄4.山茱萸：3.山茱萸中乌苏酸的鉴别-薄层色谱法

（1）供试液的制备：

取本品9g，切碎，加硅藻土4g，研匀，加乙醚40ml，回流1小时，滤过，滤液低温挥去乙醚，残渣加丙酮溶解，使成1ml.

（2）薄层色谱条件：薄层板：硅胶G薄层板（厚度：0.3mm）展开剂：环己烷-氯仿-醋酸乙酯（20：5：3）显色剂：醋酐-浓硫酸（9：1）喷雾,110℃，加热5～7分钟，至桃红色斑点出现.4.丹皮中丹皮酚的鉴别

供试液的制备：取本品10g，以水蒸气蒸馏，收集馏出液约20ml。

（1）重氮化试剂的反应：

取供试液2ml，加1～2滴对硝基氯化重氮苯试液，再加1～2滴Na2CO3溶液应现红色.（2）Gibb’s试剂的反应：取供试液2mL，加数滴Gibb’s试剂，滴加氨水使pH达9～10左右，应生成兰色化合物。*Gibb’s试剂：2，6－二氯苯醌氯亚胺：四硼酸钠（1：32）的混合粉末。（3）三氯化铁反应：取供试液2m1，加一滴三氯化铁试剂，溶液呈兰紫色.（4）薄层鉴别：薄层板：硅胶G自制板；厚度：0.3mm展开剂：环己烷－醋酸乙酯（3∶1）显色剂：盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。六味地黄丸中砷盐、重金属、酸不溶性灰分等杂质的鉴别六味地黄丸系滋补类药品，患者多长期服用，砷盐、重金属在体内产生积蓄中毒，为保障用药安全，需做砷盐和重金属的考察。六味地黄丸中主要有效成分乌苏酸和丹皮酚的定量分析（一）乌苏酸的含量测定-双波长薄层扫描法：

l.供试液的制备：取本品大蜜丸10g（水蜜丸5g），精密称定，加水30ml，放置使崩解，以滤纸滤过，滤渣再用30ml水洗涤，于室温干燥至呈松软的粉末状，于100℃烘干。残渣同滤纸一起置索氏提取器中，用乙醚回流提取4小时，提取液回收乙醚至干。残留物用低沸点石油醚浸泡四次，每次15ml（约浸泡2分钟），倾去石油醚，残留物加无水乙醇－乙醚（2：3）混合液微热使溶解，定量地转移5ml量瓶中，摇匀，备点样用。2.对照品溶液：

0.5mg／ml乌苏酸的无水乙醇溶液3.测定条件：薄层板：硅胶G薄层板（厚度：0.3mm）展开剂：环己烷-氯仿-醋酸乙酯（20∶5∶3）显色剂：醋酐-浓硫酸（9：1）喷雾，置110℃，加热5～7分钟，至桃红色斑点出现。测定波长：S=520nm，R＝720nm测定及扫描方式：透射式锯齿扫描狭缝：1.25×1.25mm灵敏度：×1扫描速度：20mm／min4.测定结果：采用外标一点法进行测定。将测得之样品峰面积积分值和标准品峰面积积分值,按下式计算：（求每丸中乌苏酸的毫克数）（Ai）样供试液中乌苏酸斑点的峰面积（Ai）标对照品溶液的峰面积

W标对照品溶液的点样量（μg）

Vl

供试液的体积（ml）

V2

供试液的点样量（μl）

W′每丸重（g）

W样品重（g）。本品含山茱萸，按乌苏酸计，大蜜丸不得少于0.013％，水蜜丸不得少于0.02％.′（三）丹皮酚的含量测定－紫外分光光度法

取本品大蜜丸2g，精密称定，以水蒸汽蒸馏，收集馏液约450ml，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，置lcm吸收池内，于274±lnm波长处测定吸收度，根据标准曲线或回归方程计算含量。本品含丹皮按丹皮酚计，大蜜丸不得少于0.07％，水蜜丸不得少于0.10％.

二、片剂

药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状或异形片状的制剂，分为浸膏片、半浸膏片和全粉片

片剂以口服普通片为主，另有含片、咀嚼片、泡腾片和肠溶片等。（一）片剂的一般质量要求性状重量差异崩解时限硬度（或脆碎度）微生物限度检查项目片剂中常含有一定量的赋形剂，如淀粉、糊精、糖粉、硫酸钙等，有的还含有药材细粉，某些成分仍保留在植物组织、细胞中。赋形剂的存在，有可能对片剂的分析产生影响，不过，这些赋形剂大多是水溶性的，当用有机溶剂提取时，往往可去除它们的干扰。（二）片剂鉴别、含量测定的特点样品的处理片剂的提取方法：与其它固体制剂类似，通常是将片剂研碎（糖衣片需除去糖衣）后，过一定目筛，选择适宜的溶剂，采用冷浸法、回流法、超声波振荡提取法等，将被测成分提取出来。净化方法：液-液提取法、柱色谱法片剂的含量——每片中含被测成分的重量若有效成分明确，结构已知，规格具体，则常采用按标示量计算的百分含量，以此表示每片中有效成分测得的实际含量与标示量的符合程度。按标示量计算百分含量的算式如下：标示量%=（样品中被测成分测得的实际重量×平均片重）/（样品重×标示量）×100%

含量均匀度的检查含量均匀度系指小剂量口服固体制剂、粉雾剂或注射用无菌粉末中的每片(个)含量偏离标示量的程度。凡检查含量均匀度的制剂，不再检查重(装)量差异。如A＋1.80S≤15.0，符合规定；若A＋S＞15.0，则不符合规定；若A＋1.80S＞15.0，且A＋S≤15.0，则应另取20片(个)复试。根据初、复试结果，计算均值X、标准差S和标示量与均值之差的绝对值A：如A+1.45S≤15.0，即符合规定；若A＋1.45S＞15.0，则不符合规定。注：含量均匀度的限度可变含量均匀度检查实例为考察某批黄连素片剂的含量均匀度，现取黄连素片10片。照黄连素片剂项下规定的方法，分别测定盐酸小檗碱含量，结果为56.2、52.3、46.1、49.8、55.6、53.8、46.5、48.8、51.2、50.8mg；黄连素片剂中盐酸小檗碱的标示量为50mg，规定含量均匀度的限度为15%，请判定该批黄连素片剂是否合格？分析结果该批黄连素片合格溶出度的检查有些固体制剂（片剂或胶囊剂）需进行。溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。溶出度是评价药物质量的一个重要内在指标，是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外实验法。片剂溶出度的测定主要用于一些难溶性的药物。溶出度测定方法：中国药典采用转篮法和桨法含量均匀度和溶出度是保证片剂释放均匀性和生物利用度的有效检查方法。

（三）分析实例—牛黄解毒片【组成】人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草等【性状】本品为素片、糖衣片或薄膜衣片，素片或包衣片除去包衣后显棕黄色；有冰片香气，味微苦、辛。【鉴别】(1)取本品，置显微镜下观察：草酸钙簇晶大，直径60～140µm。不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽。

(2)取本品1片，研细，进行微量升华，所得的白色升华物，加新配制的1%香草醛硫酸溶液1～2滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。(3)取本品2片，研细，加三氯甲烷10ml研磨，滤过，滤液蒸干，加乙醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇（20:25：2:3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)取本品1片，研细，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，加热回流30分钟，放冷，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的5个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。(5)取本品4片，研细，加乙醚30ml，超声处理15分钟，滤过，弃去乙醚，滤渣置水浴上挥尽乙醚，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，滴加盐酸调节PH值至2～3，加醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙醋液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙醋-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。【检查】三氧化二砷取本品适量，研细，精密称取1.52g,加稀盐酸20ml，时时搅拌1小时，滤过，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10ml，搅拌10分钟，洗液与滤液合并，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2ml,加盐酸5ml与水21ml，照砷盐检查法检查，所显砷斑颜色不得深于标准砷斑。【含量测定】高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸（45:55:0.2）为流动相；检测波长为315nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml中含30µg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品20片（包衣片除去包衣），精密称定，研细，取约0.6g，精密称定，加70%乙醇30ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液5µl与供试品溶液10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含黄芩以黄芩苷（C21H18O11）计，小片不得少于3.0mg；大片不得少于4.5mg。三、颗粒剂

药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂（一）颗粒剂的一般质量要求

检查项目性状粒度水分溶化性装量差异微生物限度粒度＞1号筛＜4号筛≤8%(左右轻轻往返3分钟)溶化性装量差异单剂量包装同丸剂多剂量包装最低装量检查法平均装量≥标示装量每个装量≥限量%（二）颗粒剂质量分析的特点颗粒剂较为纯净。当颗粒剂不含药材细粉，而全部为药材提取物时，可用合适的溶剂进行溶解或提取。对于含药材细粉的颗粒剂，要注意提取溶剂的渗透性，可采用超声提取法或热回流提取法。注意颗粒剂中辅料（糖、糊精）对测定的干扰，提取时应选择合适的溶剂。

四、散剂

一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂古老的传统剂型之一（一）散剂的一般质量要求

检查项目性状均匀度水分装量差异微生物限度均匀度取供试品适量置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在亮处观察，应呈现均匀的色泽，无花纹、色斑水分≤9.0%无菌用于烧伤或严重创伤的外用散剂，应照无菌检查法检查（二）散剂质量分析的特点散剂的分析重点：剧毒成分和贵重药材。分析取样时应注意样品的代表性药材粉末中具有形态特征的组织碎片是显微鉴别的重要依据，可用于判断制剂的真伪。

五、栓剂栓剂系指药材提取物或药粉与适宜基质制成供腔道给药的固体制剂。（一）栓剂的一般质量要求

检查项目性状重量差异融变时限硬度微生物限度（二）栓剂质量分析的特点重点：栓剂在分析前，需将基质除去，以减少干扰。常用的基质可分为油脂性基质和亲水性基质。除去基质的方法有：将栓剂与硅藻土等惰性材料混合、研匀，转入回流提取器中，用适宜的溶剂回流提取，亲水性基质一般用有机溶剂提取，油脂性基质一般用水或稀醇提取。六、滴丸剂滴丸剂系指药材经适宜的方法提取、纯化、浓缩并与适宜的基质加热熔融混匀后，滴入不相混溶的冷凝液中，收缩冷凝而制成的球形或类球形制剂。（一）滴丸剂的一般质量要求

检查项目性状重量差异溶散时限微生物限度（二）滴丸剂质量分析的特点滴丸常用的基质：水溶性基质与水不溶性基质在分析前，必须先将基质与被检测成分分离，分离方法与栓剂基本一样。对一些酸、碱性指标成分，可通过酸化或碱化处理，让其游离或成盐后，用水或有机溶剂液-液提取，从而达到与基质分离的目的。

外用膏剂系指采用适宜的基质将药物制成专供外用的半固体或近似固体的一类剂型第四节外用膏剂的分析软膏剂、膏药、橡胶膏剂、巴布膏剂

一、软膏剂药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半固体外