院内感染监测与操作课件

院内感染监测与操作

孙学民2013年医院感染又称医院内获得性感染，指患者在入院时既不存在，又不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括在医院获得而于出院后发病的感染。一、医院感染的定义1、外源性感染又称交叉感染，病原体来自患者体外，即来自其他住院患者、医务人员、陪护家属和医院环境等。2、内源性感染又称自身感染，病原体来自患者自身贮菌库（皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道、肠道）的正常菌群或外来的定植菌。在医院中当人体免疫功能下降、体内微生态环境失衡或发生细菌易位时即可发生感染。二、医院感染的分类医院感染可发生在与医院相关的人群中，如门诊和住院患者、医务人员、陪护家属、探视者等均可发生。三、医院感染的对象1、手的微生物监测采样时间：在接触患者或从事医疗活动前进行。采样方法：被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两遍（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。四、医院感染监控中常用的检测方法细菌菌落总数检查：1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂培养，放35℃温箱内24~48h计数菌落。手细菌菌落总数（cfu/cm2）=

平板上菌落数×采样液稀释倍数

采样面积（cm2）（cfu：是菌落形成单位，将稀释后的一定量的菌液通过涂布的方法，让其内的微生物单细胞分散在琼脂平板上，待培养后，每一活细胞就形成一个菌落。就表示每毫升菌液中含有多少单细胞。）结果判定采样时间：消毒处理后4h内采样。采样面积：被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有灭菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子装入5ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。2、物体表面的微生物学监测细菌菌落总数检查：

1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂培养，放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。物体表面细菌菌落总数（cfu/cm2）=

平板上菌落数×采样液稀释倍数采样面积（cm2）结果判定采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。采样方法：自然沉降法，国内大多数医院采用。采样高度：与地面垂直高度0.8～1.5m。布点方法：室内面积≤30m2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处取一点；室内面积>30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。采样方法：用9cm直径的普通营养琼脂平板，在采样点将平板盖打开，把盖子扣在平板的边缘上，暴露5min后送检培养，每个被监测的房间菌落数以平均数计算。3、空气消毒效果的监测细菌菌落总数检查：将平板置37℃温箱内培养24h计数菌落。结果计算：

各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标

GB15982-2012新规范的检测单位复杂，分别为：XXcfu/(5min·直径9cm平皿)、XXcfu(15min·直径9cm平皿)、XXcfu/(30min·直径9cm平皿)。不同的区域采样时间的要求是不相同的，参考范围也不相同的。所以，在送检的空气平板上必须标明采样的地点和时间。（原参考范围：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3,Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3）

手术室分类卫生标准（以沉降法为标准）手术区周边区Ⅰ级特别洁净手术室0.2个/30min0.4个/30minⅡ级标准洁净手术室0.75个/30min1.5个/30minⅢ一般洁净手术室2个/30min4个/30minⅣ级标准洁净手术室5个/30min5个/30min周边区周边区周边区被测区域洁净度级别最少培养皿数（9cm，以沉降30min计）100131000510000310000023000002结果判定采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。请抽取被检样品5ml送检醇类和酚类消毒剂用普通营养肉汤作稀释液。含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒液需在肉汤内加入0.1%硫代硫酸钠作稀释液。季铵盐类消毒液需在肉汤中加入3%Tween80和0.3％卵磷脂作稀液。含有表面活性剂的各种复方消毒剂需在肉汤中加入3％Tween80作稀释液。4、消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测细菌菌落总数检查：分别取1ml采样液放入2只灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，将平板放37℃温箱内培养48小时计数菌落。平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，若每个平板菌落数在10个以下，仍可用于消毒使用（但不能用于灭菌）；若每个平板菌落数超过10个，说明每毫升被检样液含菌量已超过100个，不宜再用。

a、所有蒸汽和环氧乙烷气体的灭菌器至少每周1次用活芽胞杆菌作灭菌效果评价，干热灭菌每月监测1次。采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。布点方法：小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂，置最底层中央；中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂，上层中央放一个，下层前后各一个；大型灭菌器选5个包装物品放入指示剂，上、中层中央各放1个，下层前、中、后部各放1个。监测方法：采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953、ATCC12980或SSIK31株）作为生物指示剂。5、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测b、环氧乙烷气体灭菌的效果监测（1）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。（2）监测方法：用环氧乙烷灭菌指示片，其由红色变成蓝色表示灭菌完全。枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372）作为生物指示剂。紫外线灯管辐射强度值的测定：

1、开启紫外线灯5min后，按说明书操作，将测定波长为253.7nm的紫外线强度测定仪（指定有效期内）探头置被检紫外线灯下垂直1m的中央处，仪表稳定后所示数据即为紫外线灯管的辐射强度值。其中30W直管型紫外灯新灯管辐射强度值≥90微瓦·秒/cm2，使用中辐射强度值≥70微瓦·秒/cm2；150W高强度紫外线新灯的辐射强度值≥200微瓦·秒/cm2。70微瓦·秒/cm2。6、紫外线消毒效果监测

2、紫外线强度指示卡监测法（四环R牌）【性能与原理】紫外线强度指示卡由紫外线光敏色块、标准色块和卡片纸组成。

紫外线光敏色块以涂有聚乙烯膜的卡片纸为片基，将对波长253.7nm的紫外线敏感的化学物质和辅料均匀的涂布于片基上制成涂料卡，并粘贴在卡片纸中央制成。标准色块的辐照强度值分别为90微瓦·秒/cm2和70微瓦·秒/cm2，印制在紫外线光敏色块的两侧。受到规定波长的紫外线照射后，光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。【使用范围】检测紫外线灯辐照强度值（90微瓦·秒/cm2和70微瓦·秒/cm2）是否达到使用要求。用于紫外线辐照强度值的日常监测，以便了解紫外线灯使用情况和及时进行更换。【使用方法】测定时，打开紫外线灯管5min待其稳定后，将指示卡置于距紫外线灯管下方垂直1m中央处，将有图案一面朝向灯管，照射1min。受到规定波长的紫外线照射后，卡片纸中央的紫外线光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。将其与标准色快相比，即可测知紫外线辐照强度值是否达到使用要求。使用中的旧灯管，辐照强度值≥70微瓦·秒/cm2时，可继续使用，辐照强度值＜70微瓦·秒/cm