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文档简介
11三月2024蛋白质工程的崛起修改基因工程的诞生,为克服这一远缘杂交的障碍问题,带来了新的希望。
转基因抗虫棉花乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)大肠杆菌生产出了胰岛素白细胞介素-2干扰素基因工程的实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使后者产生本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。基因工程生产出的蛋白质都能在自然界中找到吗?基因工程产物
基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。这些天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它们的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。改造干扰素(半胱氨酸)体外很难保存干扰素(丝氨酸)体外-70℃条件下可以保存半年实例1:干扰素的保存人类对蛋白质功能需求的实例:玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶(352位的苏氨酸)二氢吡啶二羧酸合成酶(104位的天冬酰胺)改造改造天冬氨酸激酶(异亮氨酸)二氢吡啶二羧酸合成酶(异亮氨酸)玉米中赖氨酸含量可提高数倍实例2:玉米中赖氨酸的含量比较低如果把胰岛素B链由B28脯氨酸-B29赖氨酸改为B28赖氨酸-B29脯氨酸就可以避免胰岛素分子形成聚合体以保证其效能的及时发挥。实例3:胰岛素注射到人体后会堆积在皮下,要经过较长时间才能进入血液,而且进入到血液中的胰岛素又会不断地被分解。实例4:在已研究过的几千种酶中,只有极少数可以应用于工业生产,绝大多数酶都不能应用于工业生产,这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在,反应温度较高,在这种条件下,大多数酶会很快变性失活。要想克服这些不足,得到自然界没有的蛋白质,怎么办呢?改造蛋白质的结构蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程的基本原理1、目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。逆转录转录DNARNA翻译肽链复制复制折叠等具有空间结构的蛋白质表达生物特有的功能或性状天然蛋白质的合成过程遵循中心法则,并需经过高级空间结构的转变请问,对天然蛋白质进行改造,应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现?改造蛋白质?就我跟你说,它长的比我都复杂,那不扯呢吗?做事要找根,咱们还是从基因着手!你认为那个更有道理?为什么?蛋白质的结构蛋白质的一级结构
蛋白质的二级结构
蛋白质的结构胰岛素的三级结构血红蛋白质的四级结构
还是在基因上着手好
应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下:(1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。(2)对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。3、基本途径(中心法则逆推)从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)2、蛋白质工程的原理:基因改造讨论:某多肽链的一段氨基酸序列是:
……—丙氨酸—色氨酸—赖氨酸—甲硫氨酸—苯丙氨酸—……(1)怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。有多少种?(2)确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因(DNA)?(1)mRNA序列为:GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)AUGUUU(或C)脱氧核苷酸序列:CGA(或G或T或C)ACCTTT(或C)TACAAA(或G)(2)确定目的基因的碱基序列后,就可以根据人类的需要改造它,通过人工合成的方法或从基因库中获取。小结:蛋白质工程概念:
是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。前提:原理:目的:了解蛋白质的结构和功能改造基因(基因修饰或基因合成)定向改造或制造蛋白质项目基因工程蛋白质工程操作起点操作核心过程目标结果联系目的基因预期的蛋白质功能基因表达载体基因获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与表达预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质定向改造生物的遗传特性,获得人类所需的生物类型或生物产品定向改造或生产人类所需的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因的修饰或基因的合成。生产自然界没有的蛋白质
异想天开能不能根据人类需要的蛋白质的结构,设计相应的基因,导入合适的细菌中,让细菌生产人类所需要的蛋白质食品呢?提示:理论上讲可以,但目前还没有真正成功的例子。一些报道利用细菌生产人类需要的蛋白质往往都是自然界已经存在的蛋白质,并非完全是人工设计出来而自然不存在的蛋白质。主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂,人类对蛋白质的高级结构和在生物体内如何行使功能知之甚少,很难设计出一个崭新而又具有生命功能作用的蛋白质,而且一个崭新的蛋白质会带来什么危害也是人们所担心的。三、蛋白质工程的进展和前景1.进展胰岛素速效型药品2.前景应用于微电子方面,制作电子元件3.现状蛋白质工程目前成功的例子不多,原因是对蛋白质的高级结构了解不够。要设计出更加符合人类需求的蛋白质还需经过艰辛的探索。但随着科学技术的深入发展,它将会给人类带来
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